錢瑋和，陳海燕，王瑩

江蘇省淮安市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇淮安 223001

小兒肺炎是常見的兒科呼吸道疾病，以肺部病原菌感染、炎癥反應(yīng)為主要病理特點(diǎn)，發(fā)病位置多見于肺泡、肺間質(zhì)以及終末氣道。支原體感染是誘發(fā)肺炎的主要原因之一，在所有肺炎患兒中，占比可在15%以上?；挤窝字гw感染的兒童本身機(jī)體各項(xiàng)功能尚未發(fā)育完全，對(duì)外源性侵害的抵抗力較弱，患病后除了出現(xiàn)呼吸道感染的臨床癥狀外，還會(huì)因致病菌在上皮細(xì)胞上的附著于有毒物質(zhì)的釋放，損害正常的呼吸道纖毛運(yùn)動(dòng)，并出現(xiàn)黏膜上皮細(xì)胞腫脹、壞死；再加上支原體感染本身具有流行性,隨著患兒病情進(jìn)展，可誘發(fā)扁桃體炎、咽喉炎等一系列并發(fā)癥,甚至誘發(fā)臟器損傷及功能障礙，對(duì)小兒的健康乃至生命安全造成嚴(yán)重威脅。對(duì)小兒肺炎支原體感染的正確診斷和有效治療至關(guān)重要。該文選取2017年2—12月間在該院接受診療的肺炎支原體患兒500例作為研究對(duì)象，通過對(duì)其臨床檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行回顧和分析，探討臨床檢驗(yàn)在患兒診療中的應(yīng)用價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在該院接受診療的肺炎支原體患兒500例作為研究對(duì)象，患兒入院后均有明確的呼吸道感染癥狀,包括咳嗽、呼吸困難，伴或不伴惡心嘔吐、發(fā)熱、食欲減退等癥；經(jīng)肺部聽診，可聞及肺啰音及雙肺粗、低呼吸音；經(jīng)X線檢查可見患兒的肺部存在片絮狀陰影,且肺門部有增厚陰影征?；純壕戏窝字гw感染的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：除外經(jīng)診斷不符合肺炎支原體標(biāo)準(zhǔn)，合并其他感染疾病的患兒。

患兒中，男259例，女241例，患兒的年齡在6個(gè)月～12歲之間，平均年齡為（4.6±1.1）歲；患兒的病程在 10～42 d 之間，平均（28.1±2.5）d。

1.2 方法

所有患兒入院后均分別接受血常規(guī)、尿常規(guī)、血免疫學(xué)檢查、血?dú)夥治?、?xì)菌培養(yǎng)等一系列臨床檢驗(yàn)。檢測(cè)標(biāo)本包括血液標(biāo)本、尿液標(biāo)本及痰液標(biāo)本，其中血液標(biāo)本采集空腹靜脈血5 mL；尿液標(biāo)本采集患兒的中段晨尿；痰液標(biāo)本經(jīng)咽拭子在患兒口腔、咽喉部反復(fù)捻轉(zhuǎn)獲得。

血尿常規(guī)及血?dú)夥治龅臋z測(cè)用到的儀器包括XN-2000型細(xì)胞分析儀,IQ-200尿沉渣分析儀,以及GE Mpremier3500型血?dú)夥治鰞x等。

血免疫學(xué)檢測(cè)包括酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)和冷凝集試驗(yàn)。通過酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)血清中特異免疫球蛋白M抗體（MP-IgM）含量進(jìn)行測(cè)定，將采集到的空腹靜脈血標(biāo)本2 mL離心分離后，以上海金標(biāo)生物科技有限公司生產(chǎn)的肺炎支原體檢測(cè)試劑盒中進(jìn)行檢驗(yàn),嚴(yán)格按照檢測(cè)試劑盒的操作說明進(jìn)行，以檢測(cè)結(jié)果顯示抗體＞1∶160認(rèn)為結(jié)果呈陽性。冷凝集試驗(yàn)同樣是以離心分離后的血清作為檢測(cè)對(duì)象，讓其與明膠顆粒發(fā)生反應(yīng),如紅細(xì)胞發(fā)生凝集，而將其置于37℃水浴后凝集現(xiàn)象消失，且檢測(cè)效價(jià)＞1∶32,則認(rèn)為驗(yàn)結(jié)果呈陽性。在患兒入院后的7 d再次行這兩項(xiàng)檢驗(yàn)[2]。

細(xì)菌培養(yǎng)：將采集到的痰液標(biāo)本置于無菌痰液收集器中,將其接種到細(xì)菌培養(yǎng)基上，加入肺炎支原體鑒別培養(yǎng)基,并送入37℃的恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)1 d后，對(duì)培養(yǎng)基的顏色進(jìn)行觀察，當(dāng)培養(yǎng)基顏色從紅色變?yōu)榍辶恋狞S色時(shí)可以判斷檢驗(yàn)結(jié)果呈陽性；如培養(yǎng)基顏色未發(fā)生變化，則可認(rèn)為結(jié)果呈陰性；但培養(yǎng)基顏色變黃色，而呈渾濁態(tài),則認(rèn)為檢驗(yàn)結(jié)果無效[1]。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

記錄觀察患兒的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血沉、C-反應(yīng)蛋白、尿蛋白、尿潛血檢測(cè)結(jié)果、血?dú)夥治鼋Y(jié)果，并對(duì)其血清MP-IgM、冷凝集試驗(yàn)、細(xì)菌培養(yǎng)陽性率等進(jìn)行計(jì)算。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

該次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，進(jìn)行 χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血尿常規(guī)及血?dú)夥治鼋Y(jié)果

經(jīng)血常規(guī)分析，500例患兒中，共有245例存在白細(xì)胞計(jì)數(shù)升高的情況，占比為49.0%；經(jīng)尿常規(guī)分析，共有104例患兒存在尿潛血陽性或尿蛋白的情況，占比為20.8%。血沉、C-反應(yīng)蛋白水平及血?dú)夥治霎惓５幕純悍謩e占38.2%、50.2%和33.4%。見表1。

表1 患者血尿常規(guī)及血?dú)夥治鼋Y(jié)果統(tǒng)計(jì)

2.2 血清免疫學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附法和冷凝集試驗(yàn)檢測(cè)，陽性率分別為90.4%和72.2%，有酶聯(lián)免疫吸附法顯著高于冷凝集試驗(yàn)的結(jié)果，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩種方法檢測(cè)肺炎支原體感染的陽性率比較

2.3 細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果

經(jīng)咽拭子細(xì)菌培養(yǎng)，共檢出肺炎支原體感染患兒86例，占比為17.2%，顯著高于肺炎克雷伯菌、肺炎鏈球菌、陰溝腸桿菌等的檢測(cè)陽性率，比較均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表 3。

表3 肺炎支原體感染患兒的細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果

3 討論

支原體是一類大小介于細(xì)菌和病毒之間的微小生物,兼具了無細(xì)胞壁、兼性厭氧以及獨(dú)立存活等多種生物學(xué)特性[2]。肺炎支原體可以通過機(jī)體的呼吸道進(jìn)行傳播，其對(duì)患者的損傷機(jī)制在于，支原體可以通過呼吸道上的特異受體點(diǎn)位在患者的纖毛上皮細(xì)胞膜上吸附，進(jìn)一步對(duì)上皮細(xì)胞造成破壞,因此使患者纖毛正?；顒?dòng)被抑制。與此同時(shí)，肺炎支原體還可以穿過呼吸道黏膜的黏液纖毛層,在黏膜上皮細(xì)胞黏附停留,通過有毒物質(zhì)的釋放,對(duì)纖毛運(yùn)動(dòng)造成抑制。多種機(jī)制共同作用會(huì)使患者呼吸道黏膜受損，上皮細(xì)胞變性，誘發(fā)咳嗽、咳痰、頭痛發(fā)熱、全身乏力等一系列呼吸道癥狀[3]。對(duì)于年齡較小的患兒，還可能因免疫功能的異常，并發(fā)包括心肌炎、腦膜安、溶血性貧血癥等嚴(yán)重并發(fā)疾病。

與常見的肺部感染相比，小兒肺炎支原體感染并無明顯的特異性臨床表現(xiàn)，在臨床診斷過程中，也容易出現(xiàn)誤漏診的情況。因而，在診斷時(shí)就需要通過多種方法的聯(lián)合應(yīng)用對(duì)其進(jìn)行正確判斷。臨床常用的方法包括血常規(guī)、尿常規(guī)檢查、血細(xì)胞培養(yǎng)、血清生化學(xué)檢驗(yàn)、血?dú)夥治?、?xì)菌培養(yǎng)等多種[4]。

該文對(duì)500例肺炎支原體感染患兒實(shí)施了血尿常規(guī)檢查及血?dú)夥治?，結(jié)果可見多數(shù)患兒存在白細(xì)胞計(jì)數(shù)、C反應(yīng)蛋白以及紅細(xì)胞沉降率異常升高，尿常規(guī)及、血?dú)夥治霎惓５那闆r，但是在其他呼吸系統(tǒng)感染性疾病的患者中也會(huì)有相似的檢查結(jié)果，在肺炎支原體感染的診斷中缺乏特異性[5]。加上患兒在感染肺炎支原體后,會(huì)因免疫力降低,導(dǎo)致上述指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果波動(dòng)幅度較大。而通過咽拭子細(xì)菌培養(yǎng)，雖然與肺炎克雷伯菌、肺炎鏈球菌、陰溝腸桿菌等的檢測(cè)陽性率相比，肺炎支原體的檢出率顯著更高，但仍只有17.2%，陽性率并不很高。

從幾種檢測(cè)方法的判斷結(jié)果上來看，酶聯(lián)免疫吸附法和冷凝集試驗(yàn)的效果更為出眾，通過酶聯(lián)免疫法對(duì)血清中的抗MP-IgM進(jìn)行檢驗(yàn)，陽性率可以達(dá)到90.4%。該抗體在患兒發(fā)病后的7 d就能被檢測(cè)到，在患兒患病后的11～30 d內(nèi)能達(dá)到峰值，通過對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，可對(duì)肺炎支原體進(jìn)行特異性判斷，加上其操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)靈敏度高，被認(rèn)為是臨床診斷肺炎支原體感染檢驗(yàn)的最重要的手段之一[6]。而冷凝集試驗(yàn)是一種肺炎支原體感染的非特異性診斷方式，通常在患兒發(fā)病后的7 d，也可以檢出陽性結(jié)果[7]，在診斷陽性率上，其略低于酶聯(lián)免疫吸附法，但也能達(dá)到72.2%，二者都有極高的參考價(jià)值。劉玲等[8]的研究對(duì)不同病程患兒的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)＞7 d的患兒檢測(cè)陽性率高于≤7 d的患兒，這與患兒感染后的機(jī)體變化有關(guān)。單一酶聯(lián)免疫法在檢測(cè)中可能因監(jiān)測(cè)時(shí)間過早或者抗體含量較低造成檢測(cè)養(yǎng)陰性；而冷凝集實(shí)驗(yàn)也存在一定的漏診率。因而，在檢測(cè)中，要通過多種方式的聯(lián)合應(yīng)用來實(shí)現(xiàn)肺炎支原體感染患兒的早期診斷，并準(zhǔn)確判斷感染類型[9-12]。

綜上所述,小兒肺炎支原體感染具有較高的發(fā)病率,在臨床檢驗(yàn)的過程中可綜合應(yīng)用血尿常規(guī)檢查、血?dú)夥治?、酶?lián)免疫法檢驗(yàn)、冷凝集試驗(yàn)及細(xì)菌培養(yǎng)等，以提高確診率,為患兒的臨床治療提供可靠依據(jù)。