孔魯裔 牟鈺 吳楠

現(xiàn)代社會(huì)食品安全問(wèn)題已經(jīng)成為社會(huì)各界關(guān)注的焦點(diǎn)問(wèn)題。食品安全形勢(shì)變得極為復(fù)雜，食品添加劑、化學(xué)污染、加工工藝都會(huì)對(duì)食品安全產(chǎn)生廣泛而深遠(yuǎn)的影響。因此如何全面而科學(xué)地檢測(cè)食品質(zhì)量成為焦點(diǎn)問(wèn)題，高效液相色譜在食品檢測(cè)中的應(yīng)用解決了這一問(wèn)題。

高效液相色譜法概述

HPLC法的分離原理。高效液相色譜法（HPLC）是在HPLC技術(shù)的基礎(chǔ)上形成的一種新型綜合分離分析技術(shù)，在HPLC的分離技術(shù)基礎(chǔ)上加入了液相色譜技術(shù)，對(duì)分離完成的被測(cè)食品基本成分進(jìn)行液相色譜分析，并以高壓輸出的方式實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的輸出，最終形成對(duì)被測(cè)食品質(zhì)量的綜合檢測(cè)結(jié)果，在這一過(guò)程中HPLC技術(shù)對(duì)被測(cè)物質(zhì)的分離主要是靠分離組分的分子與流動(dòng)相分子爭(zhēng)奪吸附表面活性中心的吸附能力差別而實(shí)現(xiàn)的。

HPLC法的優(yōu)點(diǎn)。從食品安全檢測(cè)的角度來(lái)看，高效液相色譜法具有適用范圍廣、分離效率高、速度快、流動(dòng)相可選擇范圍廣的特點(diǎn)，在具體的檢測(cè)活動(dòng)中HPLC基本能夠適應(yīng)當(dāng)前食品安全檢測(cè)的全部?jī)?nèi)容，同時(shí)因?yàn)闄z測(cè)過(guò)程中采取的分離和液相處理技術(shù)都是在現(xiàn)代生物學(xué)和網(wǎng)絡(luò)信息技術(shù)的支持下實(shí)現(xiàn)的，所以絕大部分檢測(cè)工作并不需要過(guò)多的預(yù)處理和處理步驟，檢測(cè)過(guò)程整體表現(xiàn)為快、準(zhǔn)、穩(wěn)，能夠準(zhǔn)確快速地提供檢測(cè)結(jié)果。在揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差、分子量大的高分子化合物以及離子型化合物的檢測(cè)中尤其有利。

HPLC法的應(yīng)用。鑒于HPLC在檢測(cè)活動(dòng)中的優(yōu)秀功能和突出特點(diǎn)，HPLC當(dāng)前已經(jīng)成為食品、藥品檢測(cè)的主要技術(shù)。2014年《中國(guó)藥典》中采用HPLC進(jìn)行檢測(cè)的藥品數(shù)量比例大幅度上升，表明醫(yī)藥領(lǐng)域已經(jīng)開始認(rèn)可這種檢測(cè)技術(shù)的準(zhǔn)確性和安全性，這一技術(shù)未來(lái)可能會(huì)成為醫(yī)藥領(lǐng)域主要的檢測(cè)技術(shù)。當(dāng)前HPLC法廣泛地應(yīng)用于食品、藥品的檢測(cè)活動(dòng)中，應(yīng)用的主要目的是檢測(cè)被測(cè)物體中是否存在有害和無(wú)用物質(zhì)以及這些物質(zhì)的含量。在檢測(cè)實(shí)踐中涉及到的檢測(cè)物質(zhì)囊括了石油化工、食品、合成藥物、生物化工等產(chǎn)品。

高效液相色譜法在食品檢測(cè)中的應(yīng)用

N-亞硝胺的測(cè)定。在臘肉等腌制食品中，生產(chǎn)主體經(jīng)常會(huì)添加硝酸鹽或者亞硝酸鹽作為腌制食品的發(fā)色劑，硝酸鹽本身并不存在嚴(yán)重的危害，但是如果其添加的量過(guò)大，在還原作用的影響下肉制品中會(huì)生成N-亞硝胺，而N-亞硝胺對(duì)人體的危害較大，長(zhǎng)期攝入會(huì)導(dǎo)致肝癌和結(jié)腸癌等惡性疾病。針對(duì)N-亞硝胺的傳統(tǒng)測(cè)量方法是氣相色譜法，這種方法只能對(duì)被測(cè)物體中揮發(fā)性的N-亞硝胺進(jìn)行測(cè)量，測(cè)量的精度不高，而且測(cè)量過(guò)程中僅色譜測(cè)定這一環(huán)節(jié)就需要一個(gè)多小時(shí)的時(shí)間，而采用高效液相色譜法全過(guò)程只需要13分鐘。

多環(huán)烴和雜環(huán)芳烴的測(cè)定。具體的測(cè)量過(guò)程如下：使用十二烷及化學(xué)鍵合薄殼型硅膠作為色譜柱填充劑，在Zipax擔(dān)體上涂漬0.5%AgNO3作為固定相，以乙青-正己烷作為淋洗液進(jìn)行分離機(jī)制既可以是銀離子與雜環(huán)烴中的氮原子形成絡(luò)合物，也可以用Corasil涂漬0.3%BOP做固定相，二異丙醚做淋洗液。

偶氮化合物的測(cè)定。如前文所述芳香胺是人工色素的主要成分，其在肉制品中的應(yīng)用會(huì)與肉制品反應(yīng)而產(chǎn)生偶氮化合物，偶氮化合物中包含對(duì)氨基偶氮苯、對(duì)二甲基偶氮苯等實(shí)驗(yàn)證明具有誘發(fā)肝癌作用的致癌物。在對(duì)偶氮化合物的分離測(cè)定工作中根據(jù)偶氮化合物的性質(zhì)，可以采用15cm MicropakSI- 10作為色譜柱，以CH2CL2-乙烷為淋洗液，進(jìn)行基于高效液相色譜法的測(cè)定。

黃曲霉毒素的測(cè)定。使用高效液相色譜法對(duì)黃曲霉毒素進(jìn)行測(cè)定可以選用Sil- X-Ⅱ作為色譜柱，室溫環(huán)境下選擇氯仿-異辛烷作為淋洗液，將黃曲霉素中的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)內(nèi)容B1、B2、G1、G2一次沖出，分析時(shí)間約為7分鐘。將黃曲霉毒素結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵因素分別測(cè)算出來(lái)就可以測(cè)出黃曲霉毒素的含量和黃曲霉毒素的結(jié)構(gòu)類型。與氣相色譜法相比，液相色譜法不受樣品的揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性、極性、大分子量限制，被測(cè)樣品只要可以制成溶液，就可以通過(guò)不同類型的液相色譜法實(shí)現(xiàn)分離。

在食品安全形勢(shì)日漸嚴(yán)峻的情況下，對(duì)食品安全質(zhì)量的檢測(cè)工作成為重中之重，只有保證管理主體擁有科學(xué)、高效的檢測(cè)手段，才能保證管理主體對(duì)食品安全的有效管理，保證食品市場(chǎng)的安全規(guī)范，因此對(duì)高效液相色譜在食品質(zhì)量檢測(cè)中應(yīng)用的研究具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。