郭曉春，宋順超，胡光輝，鄭畹，徐德兵，陳福，閆爭亮

(1.云南省林業(yè)科學(xué)院油茶研究所，云南 廣南 663300；2.云南省林業(yè)科學(xué)院，云南 昆明 650201)

刺股溝臀肖葉甲(ColaspoidesopacaJacoby)為鞘翅目(Coleoptera)肖葉甲科(Eumolpidae)溝臀肖葉甲屬(Colaspoides)，也叫油茶金花蟲，在云南省文山州普遍發(fā)生，是云南油茶的主要食葉害蟲之一[1-2]。刺股溝臀肖葉甲成蟲取食油茶(Camelliaoleifera)、茶樹(Camelliasinensis)、油桐(Verniciafordii)、羊蹄甲(Bauhiniapurpurea)、木荷屬(Schima)等多種植物[3-4]。該蟲群集于油茶的嫩枝和嫩葉上取食，使葉片呈缺刻或窗斑，嚴(yán)重的可吃掉整片葉子。當(dāng)蟲口密度過大時，會降低樹葉光合作用，導(dǎo)致樹體生長不良；由于其取食造成枝葉損傷，還加速病害的傳播，導(dǎo)致茶果減產(chǎn)。李密等[5]將刺股溝臀肖葉甲列為高度危害的油茶害蟲。對刺股溝臀肖葉甲的防治，目前只能不斷使用化學(xué)殺蟲劑，且需要多次施藥。

作為一種高檔食用油，品質(zhì)保證是茶油的首選前提，這就要求在油茶病蟲害防治中，盡可能地減少化學(xué)農(nóng)藥的使用量，以保證果實(shí)中盡可能少的農(nóng)藥殘留。昆蟲引誘劑是化學(xué)農(nóng)藥的很好的替代品，已被廣泛應(yīng)用于害蟲的防治中[6-7]。昆蟲引誘劑包括寄主植物揮發(fā)物和昆蟲信息素。從寄主植物揮發(fā)物中篩選對目標(biāo)昆蟲具有引誘作用的物質(zhì)，是研究昆蟲引誘劑主要方法之一[8]。

龍正海等[9]對油茶嫩枝的揮發(fā)物做過分析，其揮發(fā)物的主要成分為α-萜品醇(13.18%)、芳樟醇(12.96%)、香葉醇(7.52%)、橙花叔醇(3.31%)、水楊酸甲酯(2.43%)、1-辛醇(2.21%)；邱建生等[10]對包括普通油茶在內(nèi)的12種山茶屬(Camellia)植物花的揮發(fā)物的分析顯示，普通油茶揮發(fā)物中，醇類化合物含量高達(dá)32.23%，而(Z)-3-己烯-1-醇的相對含量達(dá)23.22%；酯類含量達(dá)43.2%，而(Z)-3-己烯酯達(dá)到37.59%，其中(Z)-3-己烯丁酯含量為4.60%。

因此，選擇油茶嫩枝中含量較高的幾種揮發(fā)性化合物以及油茶花中主要的揮發(fā)物組分進(jìn)行刺股溝臀肖葉甲引誘試驗(yàn)，以期探索出有效的引誘劑，為大面積防治油茶刺股溝臀肖葉甲提供強(qiáng)有力的理論支撐。

1 材料與方法

1.1 供試藥品

本試驗(yàn)以龍正海等[9]的分析結(jié)果為依據(jù)，選擇其相對含量較高的α-萜品醇、芳樟醇、香葉醇、橙花叔醇4種萜類物質(zhì)和壬醛、水楊酸甲酯、(Z)-3-己烯-1-醇、(Z)-3-己烯丁酯為測試化合物。其名稱、純度、來源見表1。

表1 引誘刺股溝臀肖葉甲所用化合物的種類純度及來源

1.2 誘芯制備

以反口小乳膠塞(The west company,Phoenixville,PA)為載體，在乳膠塞的凹面部分加入各化合物的二氯甲烷溶液(100μL/mL)50μL，待溶劑揮發(fā)后，再加50μL溶液，室溫下讓溶劑自然揮發(fā)。這樣，每個反口小乳膠塞荷載引誘劑質(zhì)量為20μL，然后置于冰箱中密封保存。

在2017年進(jìn)行復(fù)組分試驗(yàn)時，將α-萜品醇、芳樟醇、香葉醇、橙花叔醇4種萜類化合物按照1︰1︰1︰1的比例配置成100μL/mL的二氯甲烷溶液，分2次取50μL于乳膠塞的凹面，待溶劑自然揮發(fā)后置于冰箱中保存。2018年的復(fù)組分試驗(yàn)，則有3個處理，分別是α-萜品醇、芳樟醇、香葉醇、橙花叔醇4個萜類化合物按照1︰1︰1︰1的混合物(A)，芳樟醇、香葉醇、水楊酸甲酯、(Z)-3-己烯-1-醇、壬醛5種物質(zhì)的比例為1︰1︰1︰1︰1(B)和1︰2︰1︰1︰4(C)的混合物。

1.3 誘捕器

以550mL塑料礦泉水瓶為誘捕器。在塑料瓶的上部1/3處，裁剪出對稱的3個圓形洞口，以便害蟲進(jìn)入。在瓶底放入1塊蘸有5mL的25%的溴氰菊酯乳油的100倍液，以便殺死誘捕到的害蟲。將吸附有待試化合物的反口小乳膠塞以細(xì)鐵絲懸掛于塑料瓶內(nèi)正好與圓形洞口平行的位置，作為引誘源。

1.4 試驗(yàn)地點(diǎn)

2017年，單組分林間試驗(yàn)在位于文山州廣南縣舊莫鄉(xiāng)的板茂村進(jìn)行。此地建有東昌農(nóng)林產(chǎn)品開發(fā)公司和云南省林業(yè)科學(xué)院油茶研究所共建的高原山地油茶豐產(chǎn)栽培技術(shù)示范基地，基地海拔1 200m，油茶樹樹齡10年。復(fù)組分試驗(yàn)則在舊莫鄉(xiāng)板茂村和蓮城鎮(zhèn)老龍村油茶標(biāo)準(zhǔn)化栽培基地2個地點(diǎn)分別進(jìn)行。位于蓮城鎮(zhèn)老龍村的油茶標(biāo)準(zhǔn)化栽培基地海拔1 152m，原為集體荒山，2013年由東昌農(nóng)林產(chǎn)品開發(fā)公司建立油茶基地，樹齡4年，平均樹高100cm。

2018年，在廣南縣舊莫鄉(xiāng)的板茂村的高原山地油茶豐產(chǎn)栽培技術(shù)示范基地進(jìn)行了復(fù)組分試驗(yàn)。

1.5 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2017年，將組裝好的誘捕器懸掛于油茶樹靠近主干的樹冠下，所有誘捕器隨機(jī)排列，但保證誘捕器之間相互距離不小于20m。每個化合物3個重復(fù)，以未用誘芯的誘捕器為對照。10d以后檢查誘捕效果，算出每個化合物的平均誘捕量。試驗(yàn)復(fù)組分時，每個處理5個重復(fù)，10d后檢查誘捕效果。

2018年，同時試驗(yàn)混合物A、B、C 3個配比，每個處理5個重復(fù)。在懸掛誘捕器10d后，比較3個化合物配比的誘捕效果。誘捕時間從4月27日至6月1日。

2 結(jié)果與分析

2.1 2017年單組分的誘捕效果

單組分的誘捕結(jié)果見表2。由表2林間誘捕結(jié)果看，屬于萜類的芳樟醇、香葉醇對刺股溝臀肖葉甲具有明顯的引誘作用，而α-萜品醇、橙花叔醇則不具有引誘作用。酯類化合物水楊酸甲酯、 (Z)-3-己烯丁酯和醇類化合物(Z)-3-己烯-1-醇雖也誘捕到少量刺股溝臀肖葉甲，但與對照沒有明顯差異。引誘作用最強(qiáng)的為壬醛，平均誘捕量為17.33±7.02頭/誘捕器?？梢?，刺股溝臀肖葉甲對萜烯類、醛類物質(zhì)具有較好的嗅覺反應(yīng)。

表2 幾種化合物對刺股溝臀肖葉甲的平均誘捕量

注：調(diào)查時間為2017年，表3同，每個處理3個重復(fù)。

2.2 2017年復(fù)組分的誘捕效果

復(fù)組分的誘捕結(jié)果如表3所示。在板茂村，刺股溝臀肖葉甲平均誘捕量為4.40±1.14頭/誘捕器，在老龍村，平均誘捕量為2.20±1.64頭/誘捕器。板茂村誘捕量顯著大于老龍村誘捕量(P<0.05，Student t-檢驗(yàn))。

表3 4種化合物的混合物對刺股溝臀肖葉甲的平均誘捕量

注：每個處理5個重復(fù)，設(shè)1個空白對照。

2.3 A、B、C 3個復(fù)組分的誘捕效果

A、B、C 3個混合物誘捕結(jié)果見表4。與α-萜品醇、芳樟醇、香葉醇、橙花叔醇4個萜類化合物1︰1︰1︰1的混合物(A)相比，芳樟醇、香葉醇、水楊酸甲酯、(Z)-3-己烯-1-醇、壬醛5種物質(zhì)1︰1︰1︰1︰1的混合物(B)和1︰2︰1︰1︰4的混合物(C)誘捕到大量的刺股溝臀肖葉甲(P<0.01，Student t-檢驗(yàn))。混合物C與混合物B相比較，可誘捕到相對較多的刺股溝臀肖葉甲(P<0.05，Student t-檢驗(yàn))。由此可見，芳樟醇、香葉醇、水楊酸甲酯、(Z)-3-己烯-1-醇、壬醛5種物質(zhì)的1︰2︰1︰1︰4的混合物對刺股溝臀肖葉甲具有較好的引誘作用。

表4 3種混合物對刺股溝臀肖葉甲的平均誘捕量

注：調(diào)查時間為2018年，每個處理5個重復(fù)，設(shè)1個空白對照。

3 結(jié)論與討論

油茶嫩葉中，含有較多的α-萜品醇(13.18%)、芳樟醇(12.96%)、香葉醇(7.52%，其中順式1.35%，反式6.17%)、橙花叔醇(3.31%)。但4個萜類化合物相比較，香葉醇和芳樟醇對刺股溝臀肖葉甲具有明顯的引誘效果，且香葉醇引誘作用更大；但α-萜品醇、橙花叔醇卻沒有表現(xiàn)出對刺股溝臀肖葉甲的引誘作用?？梢姡坦蓽贤涡と~甲對其寄主揮發(fā)物具有一定的選擇性。當(dāng)以α-萜品醇、芳樟醇、香葉醇、橙花叔醇的1︰1︰1︰1的混合物為引誘劑時，對刺股溝臀肖葉甲同樣表現(xiàn)出明顯的引誘作用，但混合物的引誘效果與芳樟醇沒有明顯差異，而顯著低于單獨(dú)以香葉醇為引誘劑的引誘效果(P<0.05，t-檢驗(yàn))。這說明，α-萜品醇和橙花叔醇對刺股溝臀肖葉甲可能具有一定的驅(qū)避作用，混合物中由于這2種物質(zhì)的存在，干擾了芳樟醇、香葉醇對刺股溝臀肖葉甲的引誘。

幾種化合物相比較，壬醛對刺股溝臀肖葉甲的引誘作用最大，但壬醛在油茶嫩枝葉中的含量(2.21%)遠(yuǎn)低于前述幾種萜烯類化合物。說明在寄主揮發(fā)物中含量較高的化合物未必對刺股溝臀肖葉甲具有引誘作用。

刺股溝臀肖葉甲危害寄主的嫩枝、嫩葉[2]，未見其為害寄主花的報(bào)道。油茶花的主要揮發(fā)物水楊酸甲酯、(Z)-3-己烯丁酯和(Z)-3-己烯-1-醇只誘捕到少量的刺股溝臀肖葉甲，對刺股溝臀肖葉甲的引誘效果不明顯，這與刺股溝臀肖葉甲的生物學(xué)特性相一致。但是，在香葉醇、芳樟醇的基礎(chǔ)上添加水楊酸甲酯、(Z)-3-己烯-1-醇、壬醛，誘捕量(混合物B、混合物C)顯著增加。這說明，水楊酸甲酯、(Z)-3-己烯-1-醇、壬醛雖然單獨(dú)使用時引誘作用微弱，但對香葉醇、芳樟醇的引誘具有增效作用。

在2017年的誘捕試驗(yàn)中，板茂村誘捕量顯著大于老龍村誘捕量(P<0.05，t-檢驗(yàn))，這與田間的蟲口密度一致。刺股溝臀肖葉甲以老熟幼蟲在2-6cm的土層下越冬，在土層中化蛹、羽化，其生命周期中有7個月的時間在土層下度過。老龍油茶基地在年初進(jìn)行過復(fù)墾、施肥。在復(fù)墾過程中，刺股溝臀肖葉甲的幼蟲、蛹的生存環(huán)境遭到破壞，增大了其自然死亡率，降低了油茶園的蟲口密度。復(fù)墾既能改良土壤增加肥力，又能消滅土壤中的害蟲。因此，加強(qiáng)油茶林的復(fù)墾，也是防治刺股溝臀肖葉甲的有效方法之一。