□ 王存孝 南京科技職業(yè)學(xué)院

腐竹是一種傳統(tǒng)的豆制品，為了增強(qiáng)其光澤，在腐竹加工過程中會(huì)添加食品添加劑，如低亞硫酸鈉、雙乙酸鈉等。然而，一些人將二氧化硫作為防腐劑和漂白劑廣泛用于腐竹加工中，導(dǎo)致殘留不同濃度的二氧化硫。研究表明，二氧化硫和呼吸道疾病有直接聯(lián)系，并對神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生影響。

目前，國標(biāo)法測定二氧化硫使用的是鹽酸副玫瑰苯胺法。此外，蒸餾碘量法、色譜法和電化學(xué)法等方法也能用于二氧化硫的測定。本文選用甲醛鹽酸副玫瑰苯胺法對腐竹中二氧化硫殘留量進(jìn)行了測定，并討論了測定條件對檢測結(jié)果的影響。

1 甲醛鹽酸副玫瑰苯胺法的測定

1.1 測定原理

在樣品中加入甲醛，生成穩(wěn)定的羥基甲磺酸化合物，再加入氫氧化鈉溶液使化合物分解，釋放出的二氧化硫和鹽酸副玫瑰苯胺生成紫紅色化合物，化學(xué)方程式如下：

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器

研磨機(jī)，電子分析天平，若干個(gè)100mL的容量瓶，SB-5200DT超聲儀，漏斗，漏斗架，吸量管，UV-2550紫外-分光光度計(jì)（日本島津公司），蒸餾裝置。

1.2.2 試劑

①甲醛吸收液：稱取2.0gKHP于100mL容量瓶中，在加入5.5mL甲醛溶液，20mLEDTA溶液，用蒸餾水稀釋，定容。取上述溶液稀釋100倍，即得。②鹽酸副玫瑰苯胺溶液：取20mL15%鹽酸副玫瑰苯胺溶液于100mL容量瓶中，加15mL的鹽酸（1+1），稀釋，定容，搖勻備用。③二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：ρ（SO2）=0.5000μg/mL。④二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)使用液：取儲(chǔ)備液1mL于250mL容量瓶中，加水稀釋，定容，搖勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.3 測定步驟

1.3.1 樣品前處理

用研磨粉碎機(jī)將試樣粉碎均勻，再稱取10.00g于燒瓶當(dāng)中，加入50mL蒸餾水和15mL鹽酸，蒸餾30 min后用甲醛緩沖溶液沖洗蒸餾吸收液，并轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶，稀釋，定容。

1.3.2 配制二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液系列

分別吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液于100mL容量瓶中，編號(hào)。用甲醛緩沖吸收液10mL，氫氧化鈉溶液、鹽酸副玫瑰苯胺溶液各1mL，稀釋，定容，搖勻，靜置。

1.3.3 最大吸收波長的確定

取4號(hào)容量瓶在450～650nm找出最大吸光度所對應(yīng)的最大吸收波長，以波長為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制二氧化硫吸收光譜圖。顯色溫度為25℃，顯色時(shí)間為10min。

由吸收光譜圖查出，最大吸收波長為570nm，如圖1所示。

1.3.4 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

取6個(gè)編號(hào)的容量瓶，用1cm的比色皿，在波長570nm處，以蒸餾水為參比溶液測定二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的吸光度。以二氧化硫含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果如圖2所示。

1.3.5 樣品的測定

分別移取4.00mL樣品溶液于3個(gè)100mL容量瓶中。用以上方法測定樣品溶液的吸光度。在上述的方程式中代入數(shù)據(jù)計(jì)算二氧化硫含量。樣品測定結(jié)果平均值ρ（SO2）為14.1μg/mL，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.5%。

圖1 二氧化硫吸收光譜圖

2 結(jié)果與討論

2.1 鹽酸用量

分別稱取0.100 0g鹽酸副玫瑰苯胺于7個(gè)燒杯中，溶解并轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，稀釋，定容。取20mL上述溶液，置于100mL容量瓶中，編號(hào)，依次加入4.00、8.00、12.00、16.00、20.00、24.00mL的鹽酸（1+1），稀釋，定容。再加入試樣，在570nm處進(jìn)行測定。結(jié)果如圖3所示。

得出結(jié)論：取15mL的鹽酸（1+1）加入顯色劑中最為合適。

2.2 顯色劑用量

取5mL二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)使用液于100mL容量瓶中，與測定樣品溶液的吸光度步驟相同，改變鹽酸副玫瑰苯胺溶液的用量，結(jié)果表明鹽酸副玫瑰苯胺用量1mL最為合適。見表1。

2.3 顯色時(shí)間與顯色溫度

分別在15、20、25、30℃的溫度下按照上述實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行，改變加入鹽酸副玫瑰苯胺顯色劑后的顯色時(shí)間。發(fā)現(xiàn)本實(shí)驗(yàn)的最佳顯色溫度為25℃，顯色時(shí)間為10min。

2.4 不同蒸餾時(shí)間的影響

采用本文的樣品前處理方法，按照步驟進(jìn)行僅僅改變蒸餾時(shí)間為5、10、15、20、25、30、35、40、45min后，測定他們的吸光度，并計(jì)算相應(yīng)的二氧化硫含量。發(fā)現(xiàn)蒸餾時(shí)間30～45min時(shí)二氧化硫含量基本不變。最終，確定30min為最佳蒸餾時(shí)間。

3 結(jié)語

本文采用甲醛鹽酸副玫瑰苯胺法對二氧化硫殘留量進(jìn)行測定，該方法操作簡單，重復(fù)性好，但是樣品需要蒸餾的時(shí)間較長，要想成為快速檢測食品殘留二氧化硫含量的主流技術(shù)，還必須改進(jìn)樣品的前處理方法。

圖2 二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖3 鹽酸的量與吸光度的關(guān)系

表1 顯色劑用量對顯色反應(yīng)的影響