黃 堅(jiān)，陳義培，岳武成，陳曉雯，劉慶華，彭智文，王 軍，王成輝

(上海海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)部淡水水產(chǎn)種質(zhì)資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,水產(chǎn)科學(xué)國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，上海水產(chǎn)養(yǎng)殖工程技術(shù)研究中心，上海 201306)

中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)俗稱河蟹，為雜食性甲殼類，具有好格斗與搶食的生活習(xí)性[1-2]。中華絨螯蟹的這種互相間好格斗習(xí)性，造成了養(yǎng)殖生產(chǎn)上總產(chǎn)量不高[3]。因而，中華絨螯蟹單體養(yǎng)殖也逐漸引起了人們的重視。楊培根等[4]于1997年開展了中華絨螯蟹的單體籠養(yǎng)試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)4個(gè)多月內(nèi)平均蛻殼2.3次，蛻殼后體質(zhì)量平均增長(zhǎng)33.2%。黃姝等[5]在250 L的實(shí)驗(yàn)水槽內(nèi)進(jìn)行了中華絨螯蟹成蟹階段的單體蛻殼與生長(zhǎng)觀察，在200 d的實(shí)驗(yàn)期內(nèi)，河蟹進(jìn)行了4次蛻殼，每次蛻殼后的體質(zhì)量平均增長(zhǎng)率為48.7%～80.1%。陳嬌[6]在室內(nèi)60 L水槽內(nèi)對(duì)成蟹在一個(gè)蛻殼周期內(nèi)的單體蛻殼與生長(zhǎng)進(jìn)行了連續(xù)觀察，發(fā)現(xiàn)河蟹的肥滿度60% 左右時(shí)啟動(dòng)下一次蛻殼。但由于受單體養(yǎng)殖設(shè)施等條件的制約，國(guó)內(nèi)對(duì)中華絨螯蟹單體養(yǎng)殖中添加營(yíng)養(yǎng)液的試驗(yàn)一直較少。

近年來(lái)，一種新型的蟹類養(yǎng)殖設(shè)施—“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”開始進(jìn)入人們的視線[7-8]。個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)是將一個(gè)個(gè)小型養(yǎng)殖盒進(jìn)行立體式組裝，宛如一棟“公寓”，每棟“公寓”配備了水處理設(shè)備、殺菌設(shè)備和控溫設(shè)備等，以實(shí)現(xiàn)蟹類的循環(huán)水控溫養(yǎng)殖?！皞€(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”是將“扁平開放式”轉(zhuǎn)變?yōu)椤傲Ⅲw封閉式”的蟹類單體養(yǎng)殖，避免了蟹類間的互相格斗，為蟹類的單體養(yǎng)殖創(chuàng)造了條件。此外，“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”采用循環(huán)水養(yǎng)殖，節(jié)約了水資源，避免了養(yǎng)殖廢水的排放污染。然而，目前尚無(wú)在“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”中添加營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行中華絨螯蟹單體養(yǎng)殖試驗(yàn)的報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)向“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行了中華絨螯蟹的成蟹單體暫養(yǎng)試驗(yàn)，旨在了解“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加營(yíng)養(yǎng)液對(duì)中華絨螯蟹成熟單體養(yǎng)殖后生長(zhǎng)指標(biāo)與營(yíng)養(yǎng)成分的差異情況。

1 材料和方法

1.1 樣品的采集

2016年10月底，取上海福島水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社飼養(yǎng)的“江海21”配套選育B系，經(jīng)親本篩選后的剩余雄蟹，規(guī)格為每只100～130 g，數(shù)量150只。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”為本實(shí)驗(yàn)室與上海泓循環(huán)境科技發(fā)展有限公司合作開發(fā)的自動(dòng)控溫循環(huán)水全封閉的河蟹養(yǎng)殖系統(tǒng)。養(yǎng)殖盒規(guī)格為40 cm×30 cm×18 cm，每個(gè)盒內(nèi)放養(yǎng)一只蟹。實(shí)驗(yàn)蟹在系統(tǒng)內(nèi)適應(yīng)一周開始正式試驗(yàn)，將“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”分為A、B兩組，水源均為自來(lái)水。A組放養(yǎng)63只成蟹，其飼養(yǎng)水體中加入1‰ 的葡萄糖和1‰ 的谷氨酸鈉作為營(yíng)養(yǎng)液，每周日晚?yè)Q水并重新加入同樣的營(yíng)養(yǎng)液；B組放養(yǎng)56只成蟹，其水體不加營(yíng)養(yǎng)液；其余31只成蟹直接測(cè)量其體質(zhì)量、殼長(zhǎng)、殼寬等生長(zhǎng)指標(biāo)，解剖后取肝胰腺、性腺進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分分析作為暫養(yǎng)前對(duì)照組。放養(yǎng)前測(cè)量每只河蟹的體質(zhì)量、殼長(zhǎng)、殼寬等生長(zhǎng)指標(biāo)。試驗(yàn)期間的水溫設(shè)置為20 ℃，每天傍晚6點(diǎn)投喂甌江彩鯉“龍申1號(hào)”魚肉，采用“飽食投喂法”，第二天早晨9點(diǎn)清除殘餌。其中A、B兩組水質(zhì)指標(biāo)一樣。正式試驗(yàn)日期從2016年11月7日—12月7日，共30 d。

1.3 生長(zhǎng)參數(shù)測(cè)定

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，分別對(duì)所有河蟹稱重后，取肝胰腺、性腺進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分分析。相關(guān)生長(zhǎng)參數(shù)的計(jì)算方法如下：

成活率=試驗(yàn)結(jié)束時(shí)成活個(gè)體數(shù)/試驗(yàn)開始時(shí)個(gè)體數(shù)×100%

RBW=(WBn﹣WBn-1)/WBn-1× 100%

F=W/L3×100

式中，RBW為增重率(%)，WB為體質(zhì)量(g)，F(xiàn)為肥滿度，L為殼長(zhǎng)(cm)

1.4 背甲色度值測(cè)定

利用色差儀分別對(duì)暫養(yǎng)前后試驗(yàn)河蟹在水煮前、后(沸水煮10 min)的背甲5個(gè)部位點(diǎn)(左上、左下、中部、右上、右下)的顏色色度值進(jìn)行測(cè)定，然后換算成每只蟹的平均色度值。

1.5 肝胰腺的甜度測(cè)定

取試驗(yàn)河蟹的肝胰腺 0.5 g于1.5 mL離心管中并放入鍋中煮10 min，對(duì)煮熟的肝胰腺進(jìn)行研磨，利用糖度計(jì)對(duì)研磨出汁的肝胰腺進(jìn)行測(cè)定。

1.6 營(yíng)養(yǎng)成分分析

試驗(yàn)河蟹肝胰腺和性腺組織中氨基酸、脂肪酸含量的測(cè)定參照劉慶華等[9]的方法。

1.7 數(shù)據(jù)處理與分析

所有數(shù)據(jù)采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示，應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與顯著性檢驗(yàn)，P<0.05為顯著，P<0.01為極顯著。

2 結(jié)果分析

2.1 暫養(yǎng)前后及暫養(yǎng)方式的相關(guān)表型差異分析

通過(guò)30 d的“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”暫養(yǎng)， A組和B組的成活率均在70% 以上，A組平均增重3.76%，B組平均增重1.34%，與暫養(yǎng)前相比，體重和肥滿度均有極顯著增加，且A組的增重率顯著高于B組(表1)。從肝胰腺的甜度看， A組在暫養(yǎng)后極顯著高于暫養(yǎng)前，而B組在暫養(yǎng)后卻極顯著低于暫養(yǎng)前，其中A組極顯著高于B組。從背甲的顏色色度值看，A組和B組在水煮前(活體)的顏色色度值均比暫養(yǎng)前有極顯著提高，且B組極顯著高于A組。

表1 暫養(yǎng)前后中華絨螯蟹的相關(guān)表型差異比較Tab.1 Relative phenotypic difference of E.sinensis before and after preservation

注：同行不同上標(biāo)小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同上標(biāo)大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.2 暫養(yǎng)前、后及暫養(yǎng)方式肝胰腺營(yíng)養(yǎng)成分比較

2.2.1 肝胰腺氨基酸含量

暫養(yǎng)前、后的肝胰腺中均檢測(cè)出17種氨基酸。從暫養(yǎng)前后來(lái)看，暫養(yǎng)后的必需氨基酸總量略高于暫養(yǎng)前，但只有暫養(yǎng)B組的苯丙氨酸(PHE)含量極顯著高于暫養(yǎng)前(表2)。從暫養(yǎng)方式來(lái)看，B組必需氨基酸總量與氨基酸總量略高于A組，除了B組的苯丙氨酸(PHE)含量極顯著高于A組，其它單個(gè)氨基酸組分及其鮮味氨基酸總量均不存在顯著差異?？梢?“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加營(yíng)養(yǎng)液對(duì)中華絨螯蟹肝胰腺中的氨基酸含量不存在顯著影響。

表2 暫養(yǎng)前、后中華絨螯蟹肝胰腺中的氨基酸組成與含量Tab.2 Amino acid composition and content in hepatopancreas of E.sinensis before and after preservation g/kg

注：同行不同上標(biāo)小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同上標(biāo)大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.2.2 肝胰腺脂肪酸含量

本實(shí)驗(yàn)蟹的肝胰腺中共檢出28種脂肪酸(表3)。從暫養(yǎng)前后來(lái)看，4種飽和脂肪酸(C14∶0、C17∶0、C22∶0、C23∶0)、3種單不飽和脂肪酸(C14∶1、C20∶1N9、C22∶1N9)和3種多不飽和脂肪酸(C18∶2N6C、C18∶3N6、C22∶2N6)在暫養(yǎng)前后存在顯著差異。從暫養(yǎng)方式來(lái)看，2種飽和脂肪酸(C17∶0、C22∶0)、2種單不飽和脂肪酸(C20∶1N9、C22∶1N9)、3種多不飽和脂肪酸(C18∶2N6C、C18∶3N6、C22∶2N6)在A、B兩個(gè)暫養(yǎng)組間存在顯著差異，其中暫養(yǎng)A組的飽和脂肪酸總量(ΣSFA)顯著低于B組。結(jié)果表明：“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加營(yíng)養(yǎng)液對(duì)中華絨螯蟹肝胰腺中的總體脂肪酸含量沒(méi)有顯著影響。

表3 暫養(yǎng)前、后中華絨螯蟹肝胰腺中的脂肪酸組成與含量Tab.3 Composition and content of fatty acids in hepatopancreas of E.sinensis before and after preservation g/100g

注：同行不同上標(biāo)小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同大寫上標(biāo)字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.3 暫養(yǎng)前、后及暫養(yǎng)方式性腺營(yíng)養(yǎng)成分比較

2.3.1 性腺氨基酸含量

暫養(yǎng)前、后從實(shí)驗(yàn)蟹的性腺中也均檢出了17種氨基酸(表4)。從暫養(yǎng)前后來(lái)看，A組暫養(yǎng)后的必需氨基酸、鮮味氨基酸和氨基酸總量分別比暫養(yǎng)前提高31.10%、51.75%和50.70%；B組暫養(yǎng)后的必需氨基酸、鮮味氨基酸和氨基酸總量分別比暫養(yǎng)前提高49.11%、89.99%和80.71%，差異顯著。從暫養(yǎng)方式來(lái)看，B組的必需氨基酸、鮮味氨基酸和氨基酸總量分別比A組高13.74%、22.79%和19.91%。通過(guò)“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”暫養(yǎng)中華絨螯蟹性腺中的氨基酸含量有明顯提高，但水體中添加營(yíng)養(yǎng)液對(duì)中華絨螯蟹性腺中的總體氨基酸含量沒(méi)有顯著影響。

表4 暫養(yǎng)前后中華絨螯蟹性腺中的氨基酸組成與含量Tab.4 Amino acid composition and content in gonads of E.sinensis before and after preservation g/kg

注：同行不同上標(biāo)小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同上標(biāo)大寫字母表示差異極顯著(P<0.01).

表5 暫養(yǎng)前、后中華絨螯蟹性腺中的脂肪酸組成與含量Tab.5 Composition and content of fatty acids in gonads of E.sinensis before and after preservation g/100g

注：同行不同上標(biāo)小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同上標(biāo)大寫字母表示差異極顯著(P<0.01).

2.3.2 性腺脂肪酸含量

本次實(shí)驗(yàn)蟹的性腺中只檢出19種脂肪酸(表5)。從暫養(yǎng)前后來(lái)看，4種飽和脂肪酸(C17∶0、C18∶0、C22∶0、C24∶0)、2種單不飽和脂肪酸(C16∶1、C24∶1N9)和2種多不飽和脂肪酸(C20∶3N6、C20∶4N6)在暫養(yǎng)前后存在顯著差異。從暫養(yǎng)方式來(lái)看，3種飽和脂肪酸(C17∶0、C18∶0、C24∶0)、2種單不飽和脂肪酸(C16∶1、C24∶1N9)和2種多不飽和脂肪酸(C20∶3N6、C20∶4N6)在A、B兩個(gè)暫養(yǎng)組間存在顯著差異，其它脂肪酸在A、B兩個(gè)暫養(yǎng)組間均不存在顯著差異。A組的性腺飽和脂肪酸(SFA)、單不飽和脂肪酸(MUFA)和多不飽和脂肪酸均顯著高于B組。結(jié)果表明：“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”暫養(yǎng)后，對(duì)中華絨螯蟹性腺中的總體脂肪酸含量沒(méi)有顯著影響，但向水體中添加營(yíng)養(yǎng)液中華絨螯蟹性腺中的總體脂肪酸會(huì)明顯提高。

3 討論

不同的養(yǎng)殖水體環(huán)境[10-11]和水體營(yíng)養(yǎng)[12]對(duì)中華絨螯蟹的生長(zhǎng)具有明顯的影響。本研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”對(duì)中華絨螯蟹的單體暫養(yǎng)，成活率在70% 以上。A組的增重率顯著高于B組。表明“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”對(duì)中華絨螯蟹的成熟單體暫養(yǎng)確實(shí)有育肥作用，在“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加葡萄糖、谷氨酸鈉對(duì)中華絨螯蟹的成熟單體暫養(yǎng)的育肥更為明顯，這可能是中華絨螯蟹吸收了營(yíng)養(yǎng)液中的谷氨酸鈉后增大了食欲，加快生長(zhǎng)。對(duì)于肝胰腺的甜度，A組極顯著高于B組，表明在“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加葡萄糖、谷氨酸鈉能夠改善中華絨螯蟹的肝胰腺甜味，這可能是中華絨螯蟹在吸收了營(yíng)養(yǎng)液中的葡萄糖后積累到肝胰腺，使其變甜。

中華絨螯蟹蟹殼體色對(duì)其價(jià)格有直接的影響[13]，孔麗[14]的研究結(jié)果表明不同的體色，主要由于體內(nèi)含有不同的色素細(xì)胞，影響中華絨螯蟹體色的色素細(xì)胞大部分來(lái)自于胡蘿卜群的色素[15]。龔志等[13]的研究結(jié)果表明蟹殼內(nèi)含有類胡蘿卜素，伴隨著中華絨螯蟹的生長(zhǎng)，其體內(nèi)產(chǎn)生的胡蘿卜素也就越多。本研究發(fā)現(xiàn)，A組水煮前(活體)的背甲顏色色度值顯著低于B組，這可能是葡萄糖消耗了部分類胡蘿卜素。因?yàn)?，葡萄糖氧化后?huì)產(chǎn)生熱量[16]，而丘生譯[15]研究發(fā)現(xiàn)胡蘿卜素在低溫情況下不容易分解，在高溫情況下會(huì)加快分解。

中華絨螯蟹的口感風(fēng)味與鮮味氨基酸的含量有關(guān)，劉慶華等[9]研究結(jié)果表明中華絨螯蟹鮮味氨基酸主要有丙氨酸(ALA)、谷氨酸(GLU)、甘氨酸(GLY)、天冬氨酸(ASP)4種氨基酸。本研究還發(fā)現(xiàn)，B組肝胰腺必需氨基酸總量、鮮味氨基酸、氨基酸總量分別比A組高9.96%、8.13%、7.64%，B組性腺必需氨基酸總量、鮮味氨基酸、氨基酸總量分別比A組高13.74%、22.79%和19.91%。這可能是營(yíng)養(yǎng)液中的葡萄糖消耗了部分氨基酸。因?yàn)槠咸烟桥c甘氨酸(GLY)、蘇氨酸(THR)、丙氨酸(ALA)、谷氨酸(GLU)、天冬氨酸(ASP)等會(huì)發(fā)生取代反應(yīng)[17-22]，生成葡萄糖氨基酸糖胺，消耗了氨基酸的含量。

中華絨螯蟹的口感風(fēng)味還與不飽和脂肪酸的含量有關(guān)，劉慶華等[9]研究結(jié)果表明不飽和脂肪酸含量越高，中華絨螯蟹的口感風(fēng)味也就越好。本研究還發(fā)現(xiàn)，A組肝胰腺的單不飽和脂肪酸(MUFA)和多不飽和脂肪酸(PUFA)與B組均不存在顯著差異，而A組性腺的飽和脂肪酸總量(SFA)、單不飽和脂肪酸(MUFA)和多不飽和脂肪酸(PUFA)均顯著高于B組，這可能是水體中添加營(yíng)養(yǎng)液增加了脂肪酸的含量。因?yàn)槠咸烟强梢赞D(zhuǎn)化成脂肪酸[23-24]，從而增加了脂肪酸的含量。

綜上所述，本研究揭示了在“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”暫養(yǎng)前、后及暫養(yǎng)方式中華絨螯蟹的體重肥滿度、甜度、背甲顏色值、營(yíng)養(yǎng)成分的變化特征，表明在“個(gè)體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加營(yíng)養(yǎng)液對(duì)中華絨螯蟹成熟單體的體重、甜度、性腺的脂肪酸營(yíng)養(yǎng)成分是有顯著提高的。