李新蕊，李默雷，楊振才，李玉娟

(河北師范大學生命科學學院，石家莊 050024)

泥鰍仔魚出膜后不久極容易出現(xiàn)大量死亡，開口餌料不足以及不適口是導致苗種培育失敗的重要原因之一[1]。目前關(guān)于泥鰍開口餌料的研究內(nèi)容主要集中在對泥鰍適宜開口餌料的選擇上[2-8]，結(jié)果均表明輪蟲最適宜作為泥鰍的開口餌料，但對泥鰍餌料的適宜需求量未見報道。適宜的餌料密度能有效提高仔魚的成活率和生長速度，縮短苗種培育期，增加收入，對此，本試驗以輪蟲為泥鰍開口餌料，探究不同餌料密度與泥鰍仔魚攝食、存活、生長的關(guān)系及其適宜的餌料密度，以期為其苗種培育提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗條件

在實驗室內(nèi)進行。試驗用水為經(jīng)24 h充分曝氣的地下井水。試驗期間，采用微孔曝氣管增氧，溶解氧維持在8 mg/L以上，pH 7.36～7.89，水溫為(21.0±0.3)℃。試驗容器為長寬深58 cm×32 cm×44 cm的塑料箱，水深30 cm，實際盛水50 L。

1.2 試驗仔魚和開口餌料

試驗用魚為出膜約3 d、大小均勻、體質(zhì)健壯的臺灣泥鰍仔魚，口裂剛剛開啟，卵黃囊接近消失，處于混合營養(yǎng)階段，平均全長(5.117±0.042)mm。

試驗所用餌料取自室外池塘，每天上午7:00用25號浮游生物網(wǎng)(0.064 mm)從池中撈取，用13號浮游生物網(wǎng)(0.112 mm)濾除較大的浮游動物和雜物后,將濾液攪勻取樣測其輪蟲密度。

輪蟲密度的測定：取混勻水樣15 mL加入0.25 mL魯哥氏碘液固定后，將沉淀樣品充分搖勻，吸出1 mL，用1 mL計數(shù)框，在10×40倍顯微鏡下觀察計數(shù)；每個樣品計數(shù)兩片，取其平均值；同一樣品的兩次計數(shù)結(jié)果與其均數(shù)之差超過平均值±15%，需再計數(shù)一片。

1.3 試驗設(shè)計和方法

共設(shè)計5個輪蟲密度試驗組，分別為100個/L(A組)、500個/L(B組)、1 000個/L(C組)、3 000個/L(D組)、5 000個/L(E組)。每組3個重復，每個重復放養(yǎng)泥鰍仔魚1 000尾。

試驗周期為7 d(4～10日齡階段)。試驗期間，每天上午7:00用虹吸法換水一次，溫差不大于1 ℃； 8:30測定各箱內(nèi)現(xiàn)存輪蟲密度，并補充至試驗設(shè)計密度。

4～9日齡階段，每日9：30每箱隨機撈取仔魚30尾(撈取前攪動水面讓魚分布盡量均勻，分別從四角、中間五點各取魚6尾)，觀察并記錄腸道內(nèi)有食物的尾數(shù)，計算攝食發(fā)生率和攝食率。同時用攝像解剖鏡(江南永新光學有限公司jsz5d，精度為±0.001 mm)測量各組仔魚全長及體高，全長為仔魚吻端至尾鰭末端的距離，體高為胸鰭基部垂直于全長的高度，測量觀察過程中小心操作，測定完成立即放回原箱內(nèi)。并于試驗結(jié)束時(10日齡)測定仔魚終末全長、體高及存活情況。

1.4 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析

根據(jù)下式計算攝食發(fā)生率、攝食率、存活率、相對生長率、特定生長率：

攝食發(fā)生率(FI)=取樣中首次攝食的個體數(shù)/取樣總個體數(shù)×100%

攝食率(FR)=腸道有食物的個體數(shù)/測定總個體數(shù)×100%

存活率=終末存活魚尾數(shù)/初始魚尾數(shù)×100%

相對生長率(RGR)=(終末全長-初始全長)/初始全長/天數(shù)×100%

特定生長率(SGR)= [(ln終末全長)-(ln初始全長)]/天數(shù)×100%

試驗數(shù)據(jù)采用Statistic10.0軟件進行分析，各組間的差異采用單因素方差分析和Duncan′s多重比較。仔魚的SGR隨餌料密度的變化采用回歸分析。P<0.05為差異或回歸顯著水平。試驗結(jié)果以“平均值±標準差”(Mean±S.D.)表示。

2 結(jié)果

2.1 餌料密度對臺灣泥鰍仔魚攝食率的影響

方差分析表明，4日齡仔魚的FI在不同餌料密度組間差異顯著(F(4,10)=28.610，P<0.000 1)，D、E組仔魚的FI顯著高于A、B、C組的(P<0.05)，而D、E組之間的差異不顯著(圖1)。

圖1 4日齡各處理組臺灣泥鰍仔魚的攝食發(fā)生率Fig.1 The effect of different feeding level on the feeding incidence of the 4 days post hatch P.dabryanus不同字母代表各餌料密度組之間差異顯著(P<0.05)

5～9日齡，不同餌料密度組仔魚攝食率隨時間的變化情況見圖2， D、E組的攝食率均維持在近100%的水平，C組的在60%～80%之間波動，而A組和B組的始終在50%以下。

圖2 不同餌料密度培育的泥鰍仔魚的攝食率變化Fig.2 The variation of survive rate of P.dabryanuslarvae fed with different prey densities

2.2 餌料密度對臺灣泥鰍仔魚存活率的影響

各試驗組仔魚的存活率見圖3，餌料密度對泥鰍仔魚的存活率有顯著影響(F(4,10)=67.81，P<0.000 1)，A組、B組泥鰍仔魚分別在8日齡、9日齡時全部死亡，其它試驗組仔魚的存活率隨著餌料密度的增加而顯著升高(P<0.05)，D、E組的存活率均達到60%以上，說明當餌料密度為100個/L、500個/L時不能維持泥鰍仔魚生存。

2.3 餌料密度對臺灣泥鰍仔魚生長的影響

方差分析表明，餌料密度對仔魚的終末全長、RGR、SGR有顯著的影響(F(4,50)=52.85，P<0.000 1；F(4,50)=32.91，P<0.000 1；F(4,50)=28.94，P<0.000 1)(表1)，E組仔魚生長最快，RGR達7.34%/d，SGR為5.89%/d。

圖3 不同餌料密度培育的臺灣泥鰍仔魚(9日齡)的存活率Fig.3 The survive rate of P.dabryanus larvae(9 days post hacth)with different prey densities不同字母代表各餌料密度組之間差異顯著(P<0.05)

組別初始全長/mm終末全長/mm相對生長率/(%/d)特定生長率/(%/d)A組5.117±0.0425.286±0.133a0.827±0.651a0.734±0.629aB組5.117±0.0425.771±0.064b2.555±0.249b2.392±0.221bC組5.117±0.0426.009±0.076b2.491±0.211b2.285±0.180bD組5.117±0.0427.258±0.223c5.977±0.622c4.923±0.454cE組5.117±0.0427.746±0.159d7.338±0.444d5.892±0.291c

注：*同列中標有不同字母者表示組間差異顯著(P<0.05)。

將各處理組的SGR和餌料密度做二次多項式回歸表明， SGR與餌料密度的回歸關(guān)系顯著(F(2,52)=54.141，P<0.000 1)，回歸方程為：SGR=-1.76×10-7PD2+1.88×10-3PD+0.87(見圖4)。由圖4可見，SGR隨著餌料密度的增加而增加，曲線最高點對應的餌料密度為5 350個/L，表明滿足4～10日齡臺灣泥鰍仔魚最快生長速度的餌料密度可能為5 350個/L。

圖4 不同餌料密度培育的臺灣泥鰍仔魚的特定生長率Fig.4 The specific growth rate of P.dabryanus larvae with different feeding level

不同餌料密度組泥鰍仔魚的全長變化如圖5。A組在6日齡時達到最大，8日齡時全部死亡。B組在7日齡達到最大，9日齡時全部死亡。C組在9日齡時最大，6～10日齡之間變化不大。D、E組在5日齡時無差異，之后E組的增速快于D組，且差異越來越大。

圖5 不同餌料密度培育的臺灣泥鰍仔魚全長變化Fig.5 The variation of total length of P.dabryanuslarvae fed with different prey densities

體高的結(jié)果見圖6。試驗期間，A、B、C組仔魚的體高呈下降趨勢，D、E組仔魚在5日齡時體高比較接近，之后D組仔魚體高緩慢增大，E組仔魚體高不停增大，試驗結(jié)束時仔魚平均體高0.617 mm。

圖6 不同餌料密度培育的臺灣泥鰍仔魚體高變化Fig.6 The variation of body depth of P.dabryanuslarvae fed with different prey densities

3 討論

3.1 不同餌料密度對臺灣泥鰍仔魚攝食率的影響

王有基[9]對泥鰍早期攝食節(jié)律的研究中發(fā)現(xiàn)，8日齡前的FI存在顯著性差異(P<0.05)，4日齡時泥鰍仔魚FI為55%左右。本試驗中，后三組FI為57.11%～71.56%，且差異不顯著，說明4日齡時當餌料密度達到3 000個/L及以上時，即可滿足此時泥鰍仔魚攝食需求；之后3 000、5 000個/L組仔魚FR均接近100%，說明泥鰍在5日齡后幾乎全部開口。

同時，當輪蟲密度維持在3 000個/L時，4～9日齡間的泥鰍仔魚就可以吃到食物。其余組泥鰍仔魚的FR最終均呈下降趨勢，說明隨著泥鰍仔魚的生長，仔魚的攝食量增大，餌料不足時吃到食物的仔魚數(shù)量也隨之變少。因此，在泥鰍苗種培育期間，從保證泥鰍具有攝食能力的角度出發(fā)，要求水體中輪蟲的密度在3 000個/L以上。

3.2 不同餌料密度對臺灣泥鰍仔魚存活率的影響

本試驗中，仔魚的最高存活率為65.4%，蘇應兵等[6]的研究中輪蟲組泥鰍的存活率為55.23%，朱明等[4]的研究中輪蟲組泥鰍的存活率約為62%，與本試驗結(jié)果相近。

Bagenal等[11]認為,仔魚后期的存活率主要是餌料供應不及時及仔魚對餌料的適應問題，研究表明，泥鰍在3日齡開口后如果不及時投喂餌料,其生長性能和存活率越來越差[9]。這可能是本試驗中餌料密度為100、500個/L組仔魚分別在8、9日齡時全部死亡的原因。

本試驗中不同餌料密度之間的存活率差異顯著，說明餌料密度與仔魚存活率之間存在相關(guān)性，雖然卵黃囊為早期仔魚提供了足夠的營養(yǎng)物質(zhì)，但此時仔魚的活動能力有限，捕食能力較弱。本試驗證明，餌料密度低是泥鰍苗種培育時存活率低的一個原因，500個/L及以下的輪蟲密度不能滿足泥鰍仔魚的生存。

3.3 不同餌料密度對臺灣泥鰍仔魚生長的影響

關(guān)于餌料密度對魚類早期發(fā)育階段攝食生長的影響已有很多報道，有少部分研究表明餌料密度對仔魚生長率沒有顯著影響[12]，一般認為隨著餌料密度的增加，仔魚的生長率先升高后下降，存在一個最佳餌料密度[13]。對于這一關(guān)系，Parra等[14]的解釋是低密度下仔魚的進食效率較高，劉文逵等[13]研究的解釋為餌料密度過高，耗氧高，代謝廢物也多，從而對仔魚的生存環(huán)境造成了不良影響。本試驗結(jié)果表明，隨著餌料密度的增加，臺灣泥鰍仔魚的終末全長、RGR及SGR均呈現(xiàn)顯著增加趨勢，通過對SGR和餌料密度回歸分析得到二次回歸關(guān)系，計算得到4～10日齡臺灣泥鰍仔魚最佳的餌料密度可能為5 350個/L。

從本試驗不同組間仔魚4～10日齡的全長和體高的變化可以看出，當餌料密度在3 000個/L以下時，仔魚從外界獲得的營養(yǎng)不能滿足其需要，一直處于需要消耗自身營養(yǎng)維持生命活動的狀態(tài)。當餌料密度維持在3 000個/L時，雖然魚體持續(xù)緩慢生長，但身體卻處于日漸消瘦狀態(tài)。

對比臺灣泥鰍仔魚攝食、全長和體高數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)對于4～10日齡的泥鰍仔魚，當攝食量不足時，仔魚的體高會明顯的減小，而全長維持不變或緩慢變長，說明在泥鰍仔魚階段，體高指標可以靈敏地對餌料供應充足或缺乏做出反應。因此，在實際生產(chǎn)中可以依據(jù)仔魚的體高情況來判斷仔魚的飽食程度。

在自然環(huán)境中生物餌料數(shù)量不穩(wěn)定，很容易受溫度、水質(zhì)等因素影響，目前泥鰍仔魚苗種培育通常采用腐熟糞肥肥水[15]，水體中輪蟲的豐度一般為3 000個/L左右，可維持3～5 d。結(jié)合本試驗的研究結(jié)果，從提高生長率、成活率、收益的角度考慮，在實際泥鰍仔魚的培育過程中，如果水體中輪蟲密度不足5 350個/L，建議從開始攝食起即適量添加餌料，以保證仔魚正常的生長發(fā)育。