屈小軼 王揚偉* 喬宏興 蔣增海 徐耀輝

（1河南牧業(yè)經(jīng)濟學(xué)院動物醫(yī)學(xué)院，河南鄭州 450046；2河南省豬病防控工程技術(shù)研究中心，河南鄭州 450046）

豬增生性腸炎（Porcine proliferative enteritis,PPE）是由胞內(nèi)勞森菌（Lawsonia intracellularis,LI）引起豬的一種傳染病，以回腸和結(jié)腸的黏膜出現(xiàn)根瘤樣病變?yōu)樘卣鳎啬c、盲腸及結(jié)腸的高度增生變厚，主要感染生長育肥豬，臨床表現(xiàn)為間歇性下痢、貧血、食欲下降和生長緩慢。自1931年被首次報道以來，PPE已呈世界性流行，可引發(fā)重大經(jīng)濟損失[1-8]。

2017年2—6 月，湖北省某規(guī)?；B(yǎng)豬場發(fā)生以間歇性腹瀉、糞便變軟變稀而呈糊狀或水樣、有時混有血液、病豬生長遲緩等癥狀為特征的豬傳染病，經(jīng)臨床綜合診斷和豬增生性腸炎FIRSTtest檢測確診為PPE。在加強消毒等綜合防控措施的同時，用阿莫西林、泰妙菌素和泰樂菌素防治本病做對比試驗，發(fā)現(xiàn)泰妙菌素和泰樂菌素對PPE起到很好的防治作用?，F(xiàn)將具體診治過程總結(jié)如下。

1 發(fā)病情況

湖北省某年出欄量為7萬頭育肥豬的規(guī)模化養(yǎng)豬場，每到保育豬群中后期，都會有相當(dāng)一部分豬只發(fā)生間歇性腹瀉，糞便變軟、變稀而呈糊狀或水樣，有時混有血液。見圖1。病豬生長遲緩，病死率27%左右。病死豬回腸、結(jié)腸前部和盲腸腸管脹滿變粗，腸黏膜增厚，有的呈腦回樣，回腸腔內(nèi)有血凝塊。腸充血或出血，腸系膜水腫，腸系膜淋巴結(jié)腫大。根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀和病理變化初步診斷為PPE。

2 FIRSTtest檢測

2.1 樣品采集

豬場存欄總量25 000頭（其中母豬3 400頭、不同日齡商品豬21 600頭），隨機采集100頭豬的新鮮糞樣（保育豬25頭、育肥豬25頭、后備母豬25頭、妊娠母豬25頭），每份樣品3 g左右，在樣品采集后短時間內(nèi)檢測，觀察結(jié)果。

2.2 FIRSTtest檢測

⑴收集樣品：用無菌刮片收集1 g糞樣裝入玻璃試管，不超過1 mL刻度線；

圖1 腹瀉的糞便

⑵稀釋樣品：用移液管吸取5 mL緩沖稀釋液加入收集管內(nèi)，直到6 mL刻度線處，然后充分搖勻，放置在試管架上；

⑶樣品沉淀：靜置5 min，使樣品分級沉淀；

⑷轉(zhuǎn)移樣品：用移液管吸取0.5 mL收集管上清液到分析試管中（每個樣品都要使用不同的移液管），分析試管中含有包被的胞內(nèi)勞森菌多克隆抗體。設(shè)陽性對照（將陽性對照物搖勻后加入沒用過的分析試管中）。完成以上步驟后將各個分析試管搖勻靜置于試管架上；

⑸第1次培養(yǎng)：每隔10 min輕輕搖晃2～3次，共靜置30 min；

⑹磁頭分離：靜置完成后將分析試管轉(zhuǎn)移至磁鐵試管架上，磁頭分離3 min；

⑺第1次沖洗：將磁鐵試管架緩慢傾斜，倒掉上清液，然后將試管倒置于吸水紙上，擦掉多余水分。用移液管吸取0.8 mL沖洗液加入每個分析試管中，然后將所有的樣品搖勻，使聚集在試管底部的聚集物完全溶解，然后將分析試管重新放回磁鐵試管架。靜置3 min后，用同樣的方法去除上清液并擦干；然后第2次沖洗，重復(fù)第1次沖洗步驟；

⑻在磁鐵試管架上放置1 min后，重復(fù)步驟⑺；

⑼溶解過氧化物酶共軛物：吸取溶解液加入裝有凍干共軛物的瓶子內(nèi)并搖勻，備用；

⑽添加共軛物：用移液管吸取0.5 mL過氧化物酶共軛物溶解液到分析試管內(nèi)，然后搖勻放在普通試管架上；

⑾第2次培養(yǎng)：在試管架上靜置培養(yǎng)20 min，培養(yǎng)期間輕輕搖動2～3次；

⑿第2次磁頭分離和沖洗：把分析試管從試管架上取出，放于磁鐵試管架上磁頭分離1 min，重復(fù)步驟⑺；

⒀顯色：用移液管吸取0.5 mL顯色劑溶液加入每個分析試管內(nèi)，充分搖勻，靜置。設(shè)陰性對照（把0.5 mL顯色劑直接加入未用過的分析試管內(nèi)，充分搖勻，靜置）；

⒁第3次培養(yǎng)：在試管架上靜置7 min；

⒂觀察結(jié)果：把分析試管放在磁鐵試管架上，立刻觀察結(jié)果。陽性的為深藍(lán)色，弱陽性的為淺藍(lán)色，陰性的為透明色。

2.3 FIRSTtest檢測結(jié)果

檢測豬場100份糞樣，其中保育豬25份，育肥豬25份，后備母豬25份，妊娠母豬25份。共檢出陽性樣品44份，其中保育育8份，陽性率32%；育肥育15份，陽性率60%；后備母豬10份，陽性率40%；妊娠母豬11份，陽性率44%。

3 防治措施

為評價不同藥物對PPE的防治效果，在加強飼養(yǎng)管理和消毒等綜合防控措施的同時，用泰妙菌素、泰樂菌素和阿莫西林分別拌料防治本病做對比試驗，發(fā)現(xiàn)泰妙菌素和泰樂菌素對PPE有很好的防治作用。

3.1 試驗方法

將品種、日齡相同，體重相似且同棟的確診為PPE的120頭40日齡豬分為4組，每組30頭，分別隔離飼養(yǎng)，每組單獨1個欄舍。前3組分別用泰妙菌素（100 g/噸料）、泰樂菌素（110 g/噸料）、阿莫西林（350 g/噸）拌料，連用30天，第4組做空白對照，不使用任何藥物，30天內(nèi)各試驗組防疫計劃、飼喂、環(huán)境控制等條件完全一致，試驗前和試驗結(jié)束時分別記錄各組的體重、健康狀況和成活率等。

表1 藥物試驗結(jié)果

3.2 試驗結(jié)果

由表1可以看出，在成活率、增重、料肉比、痊愈頭數(shù)各項指標(biāo)方面，泰妙菌素組和泰樂菌素組療效均優(yōu)于阿莫西林組，泰妙菌素和泰樂菌素兩者效果區(qū)別不大，空白對照組死淘率高達(dá)30%。經(jīng)治療后的豬只皮紅毛亮，精神和食欲恢復(fù)正常，表明泰妙菌素和泰樂菌素對PEE均有較好的治療效果。

4 小結(jié)和討論

⑴ PPE可以采用PCR、ELISA和IFA等方法檢測[9-13]。本研究采用新型的FIRSTtest檢測法，相較于以上檢測方法更為簡單、準(zhǔn)確，可現(xiàn)場檢查，在2 h內(nèi)完成檢測。

⑵通過對湖北某規(guī)?；B(yǎng)豬場的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)LI廣泛存在于各個飼養(yǎng)階段的豬只體內(nèi)，育肥豬、后備母豬和妊娠母豬感染率較高，豬場管理者應(yīng)加強對PPE的防治，減少本病對豬場的經(jīng)濟損失。

⑶藥物防治試驗證明泰妙菌素和泰樂菌素在治療本病上都有較為理想的效果，藥物使用時間最好能在21天以上，且兩種藥物對于由多殺性巴氏桿菌等引起的呼吸道疾病也有一定的防治效果。