于良生，紀(jì)恒勝，梅 涵，趙 磊，孟凡剛，楊國(guó)帥

（青島大學(xué)附屬醫(yī)院，山東 青島 266003）

慢性盆腔炎是一種多發(fā)性的婦科疾病。此病可嚴(yán)重影響患者的身心健康。臨床實(shí)踐證實(shí)，單用抗生素治療慢性盆腔炎的效果較不理想。近年來，我院應(yīng)用自行研制的復(fù)方紅藤合劑治療慢性盆腔炎，取得了很好的效果[1]。本文主要介紹復(fù)方紅藤合劑的處方、制備方法及色譜分析法在對(duì)此藥進(jìn)行質(zhì)量控制[2]中的應(yīng)用價(jià)值。

1 試驗(yàn)材料

高效液相色譜儀（美國(guó)Waters公司生產(chǎn)），綠原酸（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)為110735-200501），丹參酮ⅡA（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)為110766-2005181），當(dāng)歸對(duì)照藥材（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)為120927-200512）。本次試驗(yàn)所用的復(fù)方紅藤合劑由青島大學(xué)附屬醫(yī)院制劑室提供。

2 復(fù)方紅藤合劑的處方與制備

2.1 處方

紅藤 20 g，丹參 20 g，金銀花 20 g，黨參 15 g，當(dāng)歸 12 g，木香10 g，赤芍10 g，茯苓10 g，陳皮6 g，甘草5 g。

2.2 制法

取紅藤、丹參、金銀花各2㎏,黨參1.5 ㎏,當(dāng)歸1.2㎏，木香、赤芍、茯苓各1㎏，陳皮0.6㎏，甘草0.5㎏，置于中藥提取器內(nèi)，加入潔凈水100L后浸漬2h,加熱煎煮90min，濾出藥液，在藥渣中再加50L的潔凈水加熱煎煮1h,合并兩次所得的藥液，靜置沉淀12h，取上清液濃縮至25L，灌裝（250ml/瓶），封口，在116℃的環(huán)境下進(jìn)行40min的滅菌處理，即得。

3 復(fù)方紅藤合劑的質(zhì)量控制[3]

3.1 性狀

復(fù)方紅藤合劑應(yīng)為深棕色的湯劑，其味苦、微甘。

3.2 成分鑒別

3.2.1 綠原酸的鑒別[4]取本品10 ml，蒸干,加甲醇5 ml使其溶解，作為供試樣品溶液備用。另取綠原酸對(duì)照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg綠原酸的溶液，作為對(duì)照樣品溶液。采用薄層色譜法進(jìn)行試驗(yàn)，吸取供試樣品溶液10～20μL、對(duì)照品溶液10μL，分別點(diǎn)于以同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上,以醋酸丁酯－甲酸－水（7:2.5:2.5）的上層溶液為展開劑進(jìn)行展開，取出晾干，置于紫外光燈（波長(zhǎng)為365 nm）下檢視。在供試樣品（復(fù)方紅藤合劑）的色譜中，在與對(duì)照樣品的色譜相應(yīng)位置上，顯示出相同顏色的熒光斑點(diǎn)[5]。

3.2.2 當(dāng)歸的鑒別[6]取本品30 ml，將其蒸干，在殘?jiān)屑尤霟o水乙醇1 ml使其溶解，作為供試樣品溶液備用。另取當(dāng)歸對(duì)照品1 g，加入石油醚（溫度為60～90℃）20 ml，進(jìn)行超聲波處理15 min，進(jìn)行濾過并蒸干，在其殘?jiān)屑尤霟o水乙醇1 ml使其溶解，作為對(duì)照樣品溶液。采用薄層色譜法進(jìn)行試驗(yàn)，分別吸取上述兩種溶液各5μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以正己烷－醋酸乙酯（比例為9：1）為展開劑將其展開，取出晾干，置于紫外光燈（波長(zhǎng)為365 nm）下進(jìn)行檢視。經(jīng)檢視，在供試樣品的色譜中，在與對(duì)照樣品色譜相對(duì)應(yīng)的位置上，顯示出相同顏色的熒光斑點(diǎn)[7]。

3.3 丹參酮ⅡA（C19H18O3）含量的測(cè)定[8]

3.3.1 色譜條件 色譜柱：Thersil-Keystone150.0 mm×4.6 mm,ODS;流動(dòng)相：甲醇－水（80:20）;柱溫：室溫；流量：1 mL-1;檢測(cè)波長(zhǎng)：270 nm；理論板數(shù)按丹參酮ⅡA峰計(jì)算，應(yīng)大于20000。

3.3.2 對(duì)照樣品溶液的制備 取丹參酮ⅡA對(duì)照樣品10 mg，置于棕色量瓶?jī)?nèi)，加入甲醇，制成每1 ml含20μL丹參酮ⅡA的溶液,即得。

3.3.3 供試樣品溶液的制備 取本品10 ml置于具塞錐形瓶中，加入叔丁基甲醚30 ml，進(jìn)行超聲波處理30 min，放冷，吸取有機(jī)層并將其放入試管內(nèi)，于40℃的水浴中用氮?dú)獯蹈?在殘?jiān)屑尤?00μL的甲醇使其溶解，即得。

3.3.4 丹參酮ⅡA的含量測(cè)定 取10個(gè)批號(hào)的復(fù)方紅藤合劑，分別制成供試樣品溶液。分別精密吸取對(duì)照樣品溶液與供試樣品溶液各10μL,注入高效液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定結(jié)果顯示，各批次樣品中丹參酮ⅡA的含量均＞0.41mg/ml。詳情見表1。

表1 對(duì)各批次樣品中丹參酮ⅡA含量進(jìn)行測(cè)定的結(jié)果Tab 1 Results of content determinations （n=10，mg/mL）

4 討論

復(fù)方紅藤合劑具有清熱解毒、活血化瘀、行氣止痛的功效，主要用于治療慢性盆腔炎、附件炎等婦科疾病。此藥的規(guī)格為每瓶250 ml，其用法是：在飯前30 min服用，0.5瓶/次，2次/日。經(jīng)檢測(cè)，我院研制的復(fù)方紅藤合劑符合中國(guó)藥典2010年版一部[9]（附錄ⅥD）中“中藥合劑”項(xiàng)下相關(guān)的規(guī)定。本次試驗(yàn)采用薄層色譜法對(duì)“復(fù)方紅藤合劑”處方中幾個(gè)具有代表性的成分進(jìn)行鑒別，結(jié)果證實(shí)，該方法的專屬性強(qiáng)，可對(duì)復(fù)方紅藤合劑中的有效成分進(jìn)行準(zhǔn)確的定性鑒別。本次試驗(yàn)采用高效液相色譜法對(duì)復(fù)方紅藤合劑中丹參酮ⅡA的含量進(jìn)行測(cè)定，也取得理想的效果。

總之，色譜分析法可用于對(duì)復(fù)方紅藤合劑中的有效成分進(jìn)行定性鑒別及定量分析，在對(duì)復(fù)方紅藤合劑進(jìn)行質(zhì)量控制中的應(yīng)用價(jià)值較高。