宋子葉,郭尚敬,楊萬立,趙 燕
(聊城大學(xué)農(nóng)學(xué)院,山東 聊城 252000)
小麥(Triticum aestivum L.)為禾本科糧食作物的一種,其種子富含脂肪、蛋白質(zhì)和淀粉等各類營養(yǎng)物質(zhì),是人們賴以生存的主要食物。在育種和生產(chǎn)過程中常需要高發(fā)芽率的種子,而小麥種子易受多種因素的影響導(dǎo)致活力下降,因此,提高低發(fā)芽率種子的活力是小麥育種和生產(chǎn)中需要解決的重要問題[1]。種子引發(fā)是人們在播種前對種子進行一定的預(yù)處理,以有效提高種子活力、發(fā)芽率和整齊度的一項重要技術(shù)[2]。Ali H等[3]研究表明,水引發(fā)12 h可促進小麥發(fā)芽,縮短萌發(fā)時間,對促進小麥生長和分蘗效果最明顯,且可提高灌溉水的利用率。史雨剛等[4]研究發(fā)現(xiàn),利用PEG-6000進行種子引發(fā)可提高小麥幼苗的抗氧化物酶活性以及滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)和可溶性蛋白的含量等,增強小麥幼苗的抗鹽性。以3種活力程度不同的小麥種子為試材,研究不同引發(fā)劑對種子發(fā)芽的影響,旨為低發(fā)芽率種子的有效利用提供技術(shù)支持。
參試小麥品種為濟麥229。
供試引發(fā)劑種類4個,分別是蒸餾水(H2O)、20%聚乙二醇 (PEG-6000)[5,6]、50 mmol/L 氯化鈉(NaCl)[7]和0.05 mmol/L水楊酸(SA)[8,9]。
1.2.1 小麥種子不同級別老化程度的確定 采用人工加熱老化方法進行。取小麥種子16份,每份300粒,用紗布包好,放入事先預(yù)熱至(60±2)℃的恒溫水浴鍋中,分別處理1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、6.5、7.0、8.0、9.0、10.0、15.0、20.0、30.0、60.0 和 120.0 min,取出后在陰涼處晾干;然后,在室溫條件下進行種子發(fā)芽率試驗,并繪制老化時間與種子發(fā)芽率的關(guān)系圖[2](圖1)。每組用種100粒,3次重復(fù)。
根據(jù)發(fā)芽率,將小麥種子的老化程度劃分為3個級別:發(fā)芽率60%~80%,為輕度老化;發(fā)芽率40%~60%,為中度老化;發(fā)芽率低于40%,為重度老化。再根據(jù)老化時間與發(fā)芽率的關(guān)系圖,設(shè)定輕度、中度、重度老化種子對應(yīng)的加熱時間分別為6.0、6.5和7.0 min。
圖1 老化時間與種子發(fā)芽率的關(guān)系Fig.1 Relationship between aging time and germination rate of wheat seed
1.2.2 不同老化程度小麥種子的獲得 取15份小麥種子,每份600~700粒,均分為3組。每組加熱老化處理時間分別為6.0、6.5和7.0 min,獲得不同發(fā)芽率的試驗用種。然后,用3%的H2O2消毒10 min[5],再用蒸餾水沖洗3~5次,備用。
1.2.3 不同引發(fā)劑對小麥種子發(fā)芽的影響試驗 以不進行老化和引發(fā)劑處理的種子為對照(CK),將3種不同老化程度的種子均進行5個引發(fā)處理(表1)。引發(fā)處理方法:取1個錐形瓶,加引發(fā)劑50 mL,再放入預(yù)老化處理的種子100粒,其中,PEG-6000處理時間為8 h,SA、NaCl和H2O處理時間均為12 h[7,9,10];處理結(jié)束后放置于陰涼處,備用。以3個錐形瓶為1個處理,每處理均3次重復(fù)。然后,在室溫自然光照條件下,采用紙上發(fā)芽方法[11],將各組小麥種子均按照GB/T 3543.1~3543.7—1995[12]進行發(fā)芽培養(yǎng),在中午和晚上均向培養(yǎng)皿中添加適量水分。發(fā)芽培養(yǎng)的第8天,測定種子發(fā)芽率。每處理均隨機選取正常小麥苗10株,測定根長和芽長。
表1 種子引發(fā)試驗設(shè)計Table 1 Experimental design of seed initiators
1.2.4 數(shù)據(jù)處理 利用Microsoft Office Excel 2013軟件進行數(shù)據(jù)處理,利用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件進行方差分析和多重比較(差異顯著性水平0.05)。
不同處理對小麥種子發(fā)芽率影響顯著,但對芽長和根長無顯著影響(表2)。T0處理的種子發(fā)芽率顯著<CK,表明輕度老化處理會導(dǎo)致小麥種子發(fā)芽率明顯降低。
輕度老化條件下,不同引發(fā)劑處理的種子發(fā)芽率均<T0處理,其中,T1與T0處理差異不顯著,但明顯高于其他3個引發(fā)劑處理,而其他3個引發(fā)劑處理與T0處理差異均達(dá)到了顯著水平。表明H2O引發(fā)對輕度老化小麥種子發(fā)芽率無顯著影響,其他3種引發(fā)劑引發(fā)均對輕度老化小麥種子發(fā)芽率有明顯的抑制作用。4種引發(fā)劑處理對輕度老化小麥種子的根長和芽長影響均不明顯。
表2 不同引發(fā)劑對輕度老化小麥種子發(fā)芽的影響Table 2 Effects of different initiators on the germination of light aged wheat seed
不同處理對小麥種子發(fā)芽率和芽長影響顯著,但對根長無顯著影響(表3)。U0處理的種子發(fā)芽率和芽長均顯著<CK,表明中度老化處理會導(dǎo)致小麥種子發(fā)芽率顯著降低,芽長明顯縮短。
中度老化條件下,不同引發(fā)劑處理的種子發(fā)芽率差異不顯著,且均與U0處理差異也不顯著,其中,U1處理的發(fā)芽率略>U0處理;芽長差異不顯著,但均顯著>U0處理,其中,U1處理的芽長最大;根長均略>U0處理。表明4種引發(fā)劑引發(fā)對中度老化小麥種子的發(fā)芽率、芽長和根長影響差異均不顯著,但與不引發(fā)處理相比均能明顯促進芽長生長。
表3 不同引發(fā)劑對中度老化小麥種子發(fā)芽的影響Table 3 Effects of different initiators on the germination of moderate aged wheat seed
不同處理對小麥種子發(fā)芽率、芽長和根長均影響顯著(表4)。W0處理的種子發(fā)芽率的和芽長均顯著<CK,根長<CK但差異不顯著,表明重度老化處理會導(dǎo)致小麥種子發(fā)芽率顯著降低、芽長明顯縮短,但對根長影響不明顯。
重度老化條件下,不同引發(fā)劑處理的種子發(fā)芽率和芽長差異均不顯著,但均顯著>W(wǎng)0處理;根長均顯著>W(wǎng)0處理,其中,W1、W3和W4處理差異不顯著,但均顯著>W(wǎng)2處理。表明4種引發(fā)劑引發(fā)均可明顯促進重度老化小麥種子萌發(fā)以及芽長和根長的生長。
表4 不同引發(fā)劑對重度老化小麥種子發(fā)芽的影響Table 4 Effects of different initiators on the germination of severe aged wheat seed
以H2O、50 mmol/L NaCl、0.05 mmol/L SA和20%PEG-6000作為引發(fā)劑,分別對輕度、中度和重度老化的小麥種子進行引發(fā),研究了各引發(fā)劑對不同老化程度種子發(fā)芽的影響。結(jié)果顯示,4種引發(fā)劑引發(fā)均對重度老化種子的萌發(fā)以及芽長和根長生長具有明顯的促進作用,但對中度和輕度老化種子的發(fā)芽效果因引發(fā)劑的不同而異。其中,H2O對中度老化種子的芽長生長具有明顯的促進作用,但對中度老化種子的發(fā)芽率和根長以及輕度老化種子的發(fā)芽率、芽長和根長影響均不顯著;其他3種引發(fā)劑均對中度老化種子的芽長生長具有明顯的促進作用,對中度老化種子的發(fā)芽率和根長以及輕度老化種子的芽長和根長影響均不顯著,對輕度老化種子的發(fā)芽率有明顯的抑制作用??傮w來說,水是一種安全且性價比較高的引發(fā)劑,但其引發(fā)機理有待進一步研究;其他3種引發(fā)劑對中度和輕度老化種子的作用效果不佳,可能與選用的濃度有關(guān),今后還需設(shè)置不同的濃度梯度做進一步研究。
試驗的 4種引發(fā)劑 H2O、50 mmol/L NaCl、0.05 mmol/L SA和20%PEG-6000引發(fā)對促進重度老化種子發(fā)芽均具有明顯效果,可以在生產(chǎn)中選擇應(yīng)用。