關(guān)玲

摘 要：本實(shí)驗(yàn)對(duì)大柴胡顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究。含量測(cè)定方法：采用奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），甲醇-0.01%磷酸溶液（60：40）（用三乙胺調(diào)PH為3.0）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃；鑒別方法：點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G板，以氯仿-甲醇-水（80：25：2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以2%對(duì)二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置日光及紫外光燈（365nm）下檢視。結(jié)論：本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可用于大柴胡顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。

關(guān)鍵詞：大柴胡顆粒；質(zhì)量；標(biāo)準(zhǔn)

大柴胡顆粒是中藥類(lèi)型的顆粒劑，由柴胡、黃芩、大黃、枳實(shí)（炒）、白芍、生姜、姜半夏和大棗組成。大柴胡顆粒用于因少陽(yáng)不和、肝膽濕熱所致的右上腹隱痛或脹滿(mǎn)不適、口苦、舌紅苔黃膩、脈弦數(shù)或弦滑，膽囊炎見(jiàn)上述證候者。大柴胡顆粒對(duì)小鼠經(jīng)熱板法和醋酸致扭體引起的疼痛反應(yīng)有對(duì)抗作用，還可以增加正常大鼠膽汁流量、增加膽管阻塞模型大鼠膽汁流量。柴胡始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，用于感冒發(fā)熱、寒熱往來(lái)、瘧疾、肝郁氣滯、胸肋脹痛、脫肛、子宮脫落、月經(jīng)不調(diào)。柴胡具疏肝利膽、疏氣解郁、散火之功效?！度杖A子本草》記載：“補(bǔ)五勞七傷，除煩止驚，益氣力，消痰止嗽，潤(rùn)心肺，添精補(bǔ)髓，天行溫疾熱狂乏絕，胸脅氣滿(mǎn)，健忘。”柴胡含有柴胡皂苷（saikosapoins a、b、c、d）、柴胡酮醇、檸檬烯（Limonene）、月桂烯（Myrcene）、長(zhǎng)葉烯（Longi-folene）、己酸（Caproic acid）、庚酸（Heptylic acid）、辛酸（Caprylic acid）、壬酸（Pelargonic acid）、2-壬烯酸（2-Nonenic acid）、苯酚（Phenol）、γ-辛酸內(nèi)酯（γ-Decalac-tone）、瑪索依內(nèi)酯（Messoia lactone）等。本實(shí)驗(yàn)對(duì)大柴胡顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：半自動(dòng)點(diǎn)樣儀LINOMAT Ⅳ（瑞士CAMAG）；ZXTA-20雙極反滲透實(shí)驗(yàn)室超純水機(jī)（北京卓信博澳儀器有限公司）；WC-52B1精密恒溫槽（上海思爾達(dá)科學(xué)儀器有限公司）；YL9100液相色譜儀（汕頭市科毅儀器設(shè)備有限公司）；賽默飛Spectronic 200可見(jiàn)分光光度計(jì)（百道亨儀器設(shè)備（北京）有限公司）；JA&D;艾安得HR-250A經(jīng)濟(jì)型分析天平（廣州市艾安得儀器有限公司）；DTA-27多功能靜音型臺(tái)式超聲波清洗機(jī)（鼎泰（湖北）生化科技設(shè)備制造公司）；MPC-K6s 加熱制冷型恒溫水浴油?。ū本┵惷浪純x器設(shè)備有限公司）。

1.2 色譜柱：奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對(duì)照品：黃芩苷

1.4 試劑：甲醇（杭州蕭山創(chuàng)益化工儀器有限公司）、磷酸（北京索萊寶科技有限公司）、三乙胺（北京索萊寶科技有限公司）、冰醋酸（北京索萊寶科技有限公司）、正丁醇（北京索萊寶科技有限公司）、氯仿（北京索萊寶科技有限公司）。

1.5 試藥：大柴胡顆粒

2 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

2.1 性狀：本品為棕黃色顆粒，氣香，味酸，微苦。

2.2 含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件

依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[1-6]。流動(dòng)相：甲醇-0.01%磷酸溶液（60：40）（用三乙胺調(diào)PH為3.0）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm，流速：1.0ml·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取黃芩苷對(duì)照品適量，置容量瓶中，加流動(dòng)相制成每1mL含20μg的溶液，即得。

2.2.3 供試品溶液的制備

取大柴胡顆粒適量，加20毫升水超聲提取5分鐘，過(guò)濾，蒸干濾液，殘?jiān)蛹状既芙廪D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過(guò)，即得。

2.2.4 專(zhuān)屬性試驗(yàn)

取柴胡、大黃、枳實(shí)（炒）、白芍、生姜、姜半夏和大棗等藥材按樣品制備工藝制成陰性對(duì)照樣品，按上述實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)，結(jié)果陰性試驗(yàn)沒(méi)有干擾，表明本方法專(zhuān)屬性良好。

2.2.5 精密度試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液按上述色譜條件，精密吸取20μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.89%，表明本方法精密度良好。

2.2.6 對(duì)照品的線(xiàn)性考察

精密稱(chēng)取適量黃芩苷對(duì)照品，加入流動(dòng)相溶液使溶解分別配制成每毫升含10微克、20微克、30微克、40微克、50微克、60微克、120微克的溶液。分別精密上述溶 液吸取20μL，注人液相色譜儀，依照2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。結(jié)果表明，黃芩苷在10～120μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。

3 鑒別

取大柴胡顆粒適量，加水20毫升，超聲處理5分鐘，濾過(guò)，用水飽和過(guò)的正丁醇萃取3次，每次20毫升，合并正丁醇，水浴蒸干后的殘?jiān)?，再溶于甲?ml中，作為供試品溶液。取柴胡對(duì)照藥材2g，加20毫升正丁醇回流提取1小時(shí)，水浴蒸干正丁醇，殘?jiān)偃苡诩状?ml中，作為對(duì)照藥材溶液。取大黃、枳實(shí)（炒）、白芍、生姜、姜半夏和大棗等藥材按樣品制備工藝制成陰性對(duì)照樣品，按上述方法制成陰性對(duì)照樣品。吸取上述溶液，分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G板，以氯仿-甲醇-水（80：25：2）為展開(kāi)劑，置用展開(kāi)劑預(yù)飽和15分鐘的展開(kāi)缸內(nèi)，展開(kāi)，取出，晾干，噴以2%對(duì)二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置日光及紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照無(wú)干擾。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)分離效果好、方法簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確、專(zhuān)屬性好，可用于大柴胡顆粒中黃芩苷的含量測(cè)定。該鑒別方法專(zhuān)屬性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)單，可用于大柴胡顆粒中柴胡的鑒別。

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