黃有群，王振奮，周衛(wèi)平

海南省人民醫(yī)院胃腸外二科，?？?70311

結(jié)直腸癌是臨床常見的惡性腫瘤之一，其遠(yuǎn)期生存預(yù)后較差，嚴(yán)重危及患者的生命健康。流行病學(xué)研究顯示，結(jié)直腸癌的發(fā)病率可達(dá)（233～455）/10萬[1]，尤其在有家族性腸息肉等的人群中，結(jié)直腸癌的發(fā)病率可進一步上升[2]。細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素（interleukin，IL）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）等與腫瘤細(xì)胞的增殖、分化及腫瘤新生血管的形成等密切相關(guān)，對腫瘤患者的病情進展具有重要影響。IL-6、TNF-α、C反應(yīng)蛋白（C-reaction protein，CRP）作為細(xì)胞因子的重要成員，均能抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡，促使腫瘤細(xì)胞由G1期向S期進展，提高腫瘤病灶的血流灌注速度，進而促進消化道腫瘤的病情進展[3]。為了進一步揭示IL-6、TNF-α、CRP與結(jié)直腸癌的關(guān)系，為臨床上結(jié)直腸癌高危人群治療后臨床轉(zhuǎn)歸的評估、隨訪等提供參考，本研究探討了結(jié)直腸癌患者的IL-6、TNF-α、CRP水平變化及其與患者臨床特征的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2015年1月至2017年1月海南省人民醫(yī)院收治的160例結(jié)直腸癌患者為結(jié)直腸癌組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥50歲；②均經(jīng)病理診斷確診為原發(fā)性結(jié)直腸癌；③未合并其他原發(fā)腫瘤。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病者；②結(jié)直腸轉(zhuǎn)移癌者；③拒絕參與本項研究者。另外，選取同期于本院體檢的健康體檢者160例為健康對照組。其中結(jié)直腸癌組男95例，女65例；年齡52～78歲，平均（66.32±5.37）歲；直腸癌55例，左、右半結(jié)腸及乙狀結(jié)腸癌105例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移50例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移110例；組織學(xué)分型：管腺癌28例，黏液腺癌132例；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期110例，Ⅲ～Ⅳ期50例；腫瘤直徑：＜5 cm 42例，≥5 cm 118例。健康對照組男100例，女60例；年齡55～78歲，平均（66.35±4.98）歲。兩組研究對象的性別、年齡等基線資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本項研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會評審?fù)ㄟ^，所有入選對象均對本研究知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

于入院后8 h內(nèi)和體檢當(dāng)日分別采集結(jié)直腸癌患者和健康體檢者的空腹靜脈血約5 ml，分成2管。一管自然抗凝后3000 r/min離心10 min，取上清液。采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清中IL-6水平，檢測試劑盒購自北京中杉金橋生物有限公司，具體檢測步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行操作；另一管置于枸櫞酸鈉抗凝管內(nèi)，加入TNF-α和CRP檢測試劑盒后，利用膠體金法檢測TNF-α和CRP水平，試劑盒購自上海奧普生物醫(yī)藥有限公司，具體檢測步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。

1.3 觀察指標(biāo)

比較兩組IL-6、TNF-α、CRP水平的差異，觀察IL-6、TNF-α、CRP水平與結(jié)直腸癌患者臨床特征的關(guān)系，分析影響結(jié)直腸癌患者IL-6、TNF-α、CRP水平的因素。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 11.5軟件對數(shù)據(jù)進行分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；采用多重逐步回歸分析法分析影響結(jié)直腸癌患者IL-6、TNF-α、CRP水平的因素。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IL- 6、TNF- α、CRP水平的比較

結(jié)直腸癌組的IL-6、TNF-α、CRP水平均明顯高于健康對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。（表1）

表1 結(jié)直腸癌組和健康對照組IL- 6、TNF-α 、CRP水平的比較（±s）

表1 結(jié)直腸癌組和健康對照組IL- 6、TNF-α 、CRP水平的比較（±s）

組別健康對照組（n=160）結(jié)直腸癌組（n=160）t值P值CRP（mg/L）7.65±1.21 25.87±2.59 80.619＜0.01 IL-6（mg/L）8.18±1.35 32.28±3.26 86.395＜0.01 TNF-α（pg/ml）10.42±2.24 35.47±3.35 78.627＜0.01

2.2 結(jié)直腸癌患者IL- 6、TNF- α、CRP水平影響因素的單因素分析

CRP水平與結(jié)直腸癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、組織學(xué)分型、TNM分期、腫瘤直徑有關(guān)（t=23.82、22.90、19.39、23.49，P＜0.01）；IL-6水平與結(jié)直腸癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、組織學(xué)分型、TNM分期、腫瘤直徑有 關(guān)（t=7.65、12.50、11.13、8.67，P＜0.01）；TNF-α水平與結(jié)直腸癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、組織學(xué)分型、TNM分期、腫瘤直徑有關(guān)（t=13.02、8.62、8.91、6.88，P＜0.01）。CRP、IL-6、TNF-α水平均與結(jié)直腸癌患者的年齡、性別、腫瘤部位無關(guān)（P＞0.05）。（表2）

表2 不同臨床特征結(jié)直腸癌患者IL- 6、TNF-α 、CRP的表達(dá)水平（ n=160）

2.3 結(jié)直腸癌患者IL- 6、TNF- α、CRP水平影響因素的多因素分析

將單因素分析有意義的4個因素（淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、組織學(xué)分型、TNM分期、腫瘤直徑）作為自變量，以結(jié)直腸癌患者的IL-6、TNF-α、CRP表達(dá)作為因變量，進行多重逐步回歸分析，結(jié)果顯示：淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期均是影響結(jié)直腸癌患者IL-6、TNF-α、CRP水平的獨立危險因素（P＜0.01）。（表3～表5）

表3 結(jié)直腸癌患者IL- 6水平影響因素的多因素分析（ n=160）

表4 結(jié)直腸癌患者TNF-α 水平影響因素的多因素分析（ n=160）

表5 結(jié)直腸癌患者CRP水平影響因素的多因素分析（ n=160）

3 討論

目前，臨床治療結(jié)直腸癌的總體有效率不足25%，手術(shù)治療或聯(lián)合放化療等綜合性治療的臨床緩解率均較低[4]。目前，臨床對于結(jié)直腸癌的早期發(fā)病過程缺乏有效的篩查指標(biāo)，雖然癌胚抗原、糖類抗原125等上皮腫瘤糖蛋白能夠在一定程度上提高結(jié)直腸癌的診斷效率，但其篩查的靈敏度、特異度等均不夠理想，因此仍存在較為明顯的局限性。本研究對IL-6、TNF-α、CRP的研究，旨在為結(jié)直腸癌的分子診斷學(xué)提供新的研究方向，為揭示結(jié)直腸癌的發(fā)病原因提供參考，為后續(xù)臨床藥理學(xué)實驗提供治療靶點。

IL-6、TNF-α、CRP等細(xì)胞因子不僅能夠參與感染性疾病、自身免疫性疾病的發(fā)生過程，同時還可以通過多種病理學(xué)效應(yīng)影響惡性腫瘤的發(fā)生。相關(guān)研究表明，IL-6表達(dá)水平的升高，能夠通過誘導(dǎo)下游腫瘤相關(guān)信號通路如絲蘇氨酸蛋白激酶（serine-threonine kinase，AKT）信號通路或 Notch信號通路的激活，提高腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄活性，進而促進腫瘤細(xì)胞的增殖[5]。TNF-α對核糖體C端[用于生化]具有修飾作用，可以提高染色體DNA的錯配風(fēng)險，抑制錯配修復(fù)因子CYC的活性。同時，TNF-α還能夠通過抑制腫瘤細(xì)胞的分化，增加腫瘤細(xì)胞的惡性程度，提高腫瘤細(xì)胞對血管內(nèi)皮或淋巴管內(nèi)皮的黏附能力，增加腫瘤細(xì)胞通過淋巴管或血行進行轉(zhuǎn)移的風(fēng)險[6-7]。CRP能夠影響腸道上皮細(xì)胞核分裂象的發(fā)生，促進腫瘤細(xì)胞對基底膜的浸潤，提高腫瘤組織突破基底膜的風(fēng)險，加重腫瘤的臨床分期，增加治療后的復(fù)發(fā)風(fēng)險[8]。

本研究結(jié)果顯示，結(jié)直腸癌組IL-6、TNF-α、CRP水平均明顯高于健康對照組（P＜0.01），提示以上指標(biāo)可能參與了惡性腫瘤的病情進展過程，分析其原因可能為：高表達(dá)的IL-6、TNF-α和CRP可以通過改變腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄活性，促進腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特征的變化等，進而影響結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展。本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期較晚的結(jié)直腸癌患者的IL-6、TNF-α、CRP水平較高，這主要考慮與IL-6、TNF-α和CRP能夠提高腫瘤細(xì)胞對腸道黏膜肌層或皮下組織的浸潤等有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤直徑較大的結(jié)直腸癌患者中，相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)水平明顯上升，但關(guān)于細(xì)胞因子對腫瘤直徑的影響，還需要后續(xù)研究的進一步探討[9-10]，而有研究認(rèn)為，其可能的機制為細(xì)胞因子影響了新生血管的形成，進而影響局部腫瘤病灶的血流灌注有關(guān)[11]，但本組研究尚未證實，仍有待進一步的研究。危險因素分析也可以發(fā)現(xiàn)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期與IL-6、TNF-α和CRP的關(guān)系為密切，進一步提示了IL-6、TNF-α和CRP與結(jié)直腸癌患者的病情密切相關(guān)。

綜上所述，結(jié)直腸癌患者的IL-6、TNF-α、CRP水平較高，且與患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期密切相關(guān)。本研究的前景在于能夠為臨床上結(jié)直腸癌患者的臨床預(yù)后評估提供新的參考指標(biāo)。