龐桂芝，張趁利，婁白敏，趙鳳蓮，鮑瑞玲

(1.新鄉(xiāng)市中心血站，河南 新鄉(xiāng) 453000；2.新鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院輸血科，河南 新鄉(xiāng) 453000；3.新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院輸血科，河南 新鄉(xiāng) 453000)

紅細(xì)胞不規(guī)則抗體是引起輸血不良反應(yīng)、新生兒溶血病、血型鑒定困難及疑難配型、不明原因貧血、紅細(xì)胞輸注無效等的主要原因[1]。為了提高患者輸血的安全性、有效性，根據(jù)《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》，對(duì)于有妊娠史、輸血史及需要反復(fù)輸血治療的患者，輸血前必須進(jìn)行不規(guī)則抗體篩檢，及時(shí)發(fā)現(xiàn)有臨床意義的不規(guī)則抗體，從而選擇對(duì)應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞進(jìn)行臨床輸注，可有效避免同種免疫溶血性輸血反應(yīng)。因此，不規(guī)則抗體篩選對(duì)于安全、有效輸血具有重要的意義。本研究對(duì)新鄉(xiāng)地區(qū)反復(fù)輸血的住院患者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選，探討不規(guī)則抗體的分布情況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料選擇2015年1月至2017年12月新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院、解放軍371中心醫(yī)院、新鄉(xiāng)市第一人民等醫(yī)院收治的反復(fù)輸血住院患者618例，男363例，女255例；年齡10～83(48.6±14.5)歲。

1.2試劑與儀器不規(guī)則抗體篩選細(xì)胞、不規(guī)則抗體篩選微柱凝膠卡、Rh血型分型卡、低離子強(qiáng)度鹽溶液均購(gòu)自長(zhǎng)春博迅生物制品有限公司，抗-D血清(IgM+IgG)購(gòu)自加拿大Dominion Biologicals Limited公司，譜細(xì)胞、標(biāo)準(zhǔn)抗-A、抗-B血清購(gòu)自上海市血液生物醫(yī)藥有限公司，凝聚胺試劑、BaSo離心機(jī)購(gòu)自臺(tái)灣貝索公司，F(xiàn)YQ免疫微柱孵育器、TD-3A血型血清學(xué)離心機(jī)購(gòu)自長(zhǎng)春博研有限公司。

1.3血型血清學(xué)檢測(cè)方法采用微柱凝膠法檢測(cè)不規(guī)則抗體，對(duì)不規(guī)則抗體陽性患者的標(biāo)本采用鹽水法、抗球蛋白法、微柱凝膠法進(jìn)行抗體特異性鑒定，根據(jù)譜細(xì)胞的反應(yīng)格局鑒定抗體的特異性。并用Rh分型卡對(duì)標(biāo)本進(jìn)行Rh表型檢測(cè)，以確認(rèn)患者紅細(xì)胞上有無相應(yīng)抗原，選用無對(duì)應(yīng)抗原的獻(xiàn)血者紅細(xì)胞進(jìn)行交叉配血，嚴(yán)格按照操作規(guī)程[2]和試劑使用說明書進(jìn)行操作。不規(guī)則抗體陽性或交叉配血不合的患者，進(jìn)行不規(guī)則抗體鑒定時(shí)應(yīng)加做自身對(duì)照試驗(yàn)，自身對(duì)照陽性表示存在紅細(xì)胞自身抗體。抗體篩檢試驗(yàn)需要結(jié)合自身對(duì)照試驗(yàn)結(jié)果才更有意義。對(duì)于存在自身抗體的血清，經(jīng)過自身吸收放散試驗(yàn)處理后再重新進(jìn)行試驗(yàn)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1不規(guī)則抗體的特異性分布結(jié)果見表1。618例反復(fù)輸血患者中檢出不規(guī)則抗體陽性32例，其中檢出Rh血型系統(tǒng)抗體21例(65.63%)；MN血型系統(tǒng)、冷抗體、自身抗體各2例(6.25%)；Kidd血型系統(tǒng)、Lewis血型各1例(3.12%)；3例患者未確定抗體特異性。其中IgG性質(zhì)的抗體22例(68.75%)，IgM+IgG性質(zhì)的抗體5例(15.63%)，IgM性質(zhì)的抗體5例(15.63%)。

表1反復(fù)輸血患者不規(guī)則抗體特異性分布

Tab.1Specificdistributionofirregularantibodiesofrepeatedtransfusionpatients

血型系統(tǒng)抗體特異性抗體性質(zhì)n構(gòu)成比/%Rh系統(tǒng)抗-DIgG39.38抗-DCIgG13.13抗-EIgG721.88抗-EcIgG928.13抗-CeIgG13.13MN系統(tǒng)抗-MIgM+IgG26.25Lewis系統(tǒng)抗-LeaIgM13.13Kidd系統(tǒng)抗-JKaIgG13.13冷抗體抗-HIIgM26.25自身抗體IgM26.25未確定特異性IgM+IgG39.38合計(jì)32100

2.2不同性別患者不規(guī)則抗體陽性率比較363例男性患者中，不規(guī)則抗體陽性12例(4.56%)，255例女性患者中，不規(guī)則抗體陽性20例(7.84%)；女性患者不規(guī)則抗體陽性率高于男性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.620，P<0.05)。

2.3有輸血史和妊娠史的患者不規(guī)則抗體陽性率比較結(jié)果見表2。男性輸血史≥3次患者不規(guī)則抗體陽性率高于輸血史<3次患者，女性妊娠史和輸血史均≥3次患者不規(guī)則抗體陽性率高于輸血史<3次患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.288、3.249，P<0.05)。

表2有輸血史和妊娠史患者不規(guī)則抗體檢出率

Tab.2Positiverateofirregularantibodiesinpatientswithhistoryofpregnancyortransfusion

性別n不規(guī)則抗體陽性/例(%)男363 輸血史<3次801(1.25) 輸血史≥3次28311(3.89)a女255 輸血史<3次360(0.00) 妊娠史和輸血史均≥3次21920(9.13)a

注：與輸血史<3次比較aP<0.05。

3 討論

不規(guī)則抗體是指ABO血型系統(tǒng)以外的血型抗體，包括Rh、MN、P、kidd、kell、Duffy系統(tǒng)等抗體，多為IgG抗體，主要經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生。本研究中618例反復(fù)輸血住院患者，不規(guī)則抗體篩檢陽性患者32例(5.18%)。檢出的不規(guī)則抗體中，Rh血型系統(tǒng)21例(65.63%)，居首位；Rh血型系統(tǒng)16例(50%)，其中抗Ec抗體陽性患者9例，抗E抗體陽性患者7例。Rh血型系統(tǒng)是繼ABO血型系統(tǒng)之后最具臨床意義的血型系統(tǒng)[3]，由于目前RhD抗原檢測(cè)已成為輸血前的常規(guī)檢查項(xiàng)目，為了減少患者產(chǎn)生Rh抗D的概率，RhD陰性患者按照《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》要求紅細(xì)胞同型輸注。臨床上未要求對(duì)Rh系統(tǒng)其他抗原進(jìn)行常規(guī)檢測(cè)，但我國(guó)漢族人群中RhE陰性率為52.12%，RhE陰性患者輸入RhE抗原陽性后產(chǎn)生抗體的概率遠(yuǎn)高于RhD陰性患者，因此，反復(fù)多次輸血的患者易產(chǎn)生抗E抗體[4]，且遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于單次輸血者[5]，對(duì)需要長(zhǎng)期反復(fù)輸血的患者，提倡使用Rh血型相同的(C、c、D、E、e)紅細(xì)胞制劑[6]。

本研究中2例患者檢測(cè)出抗-M抗體，為IgM抗體，在37 ℃多無反應(yīng)，一般不會(huì)引起溶血性輸血反應(yīng)，但會(huì)引起血型鑒定困難及交叉配血不合。另1例患者檢測(cè)出抗-JKa抗體，此抗體與其他血型抗體不同，該抗體在體內(nèi)產(chǎn)生后容易消失或效價(jià)降低，不規(guī)則抗體篩檢易漏檢，如果再次輸入JKa抗原陽性的紅細(xì)胞會(huì)引起回憶反應(yīng)，導(dǎo)致嚴(yán)重的遲發(fā)型溶血性輸血反應(yīng)，因此，在輸血前核查血型不規(guī)則抗體鑒定的歷史記錄非常重要[7]。此外，本研究中2例患者檢測(cè)出冷抗體，2例患者檢測(cè)出自身抗體，3例患者未確定抗體特異性。冷抗體為IgM抗體，在37 ℃加溫后冷凝現(xiàn)象消失，輸后無不良反應(yīng)。自身抗體是由于自身免疫性疾病患者循環(huán)免疫復(fù)合物增多，產(chǎn)生不規(guī)則抗體，干擾血型鑒定及交叉配血試驗(yàn)，引起輸血困難。未確定抗體特異性可能是輸血后產(chǎn)生不規(guī)則抗體的階段，有研究指出，有些特異性不明抗體可最終發(fā)展為有臨床意義的特異抗體[8]。這些抗體反應(yīng)強(qiáng)度較弱，可能會(huì)引起臨床遲發(fā)型溶血性輸血反應(yīng)且極容易漏檢。建議不規(guī)則抗體篩檢時(shí)應(yīng)多種試驗(yàn)方法相結(jié)合(如抗人球蛋白法、微柱凝膠法、玻璃微株法等)檢測(cè)抗體的特異性，選擇抗體無對(duì)應(yīng)抗原的紅細(xì)胞輸注。

本研究結(jié)果顯示，女性患者不規(guī)則抗體陽性率明顯高于男性；妊娠史和輸血史≥3次患者不規(guī)則抗體陽性率明顯高于輸血史<3次患者。因此，不規(guī)則抗體產(chǎn)生的概率與輸血史、妊娠史有較大關(guān)系，輸血、妊娠次數(shù)越多，產(chǎn)生抗體的機(jī)會(huì)越大。妊娠或輸血等免疫刺激是造成紅細(xì)胞產(chǎn)生不規(guī)則抗體的主要原因[9-10]，該抗體可引起溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病。

綜上所述，對(duì)反復(fù)輸血的臨床患者應(yīng)在每次輸血前進(jìn)行不規(guī)則抗體篩檢，結(jié)合有無輸血史、妊娠史、既往是否已產(chǎn)生不規(guī)則抗體，選擇無對(duì)應(yīng)抗原的血液進(jìn)行輸注，避免反復(fù)輸血患者發(fā)生遲發(fā)型溶血性輸血反應(yīng)，提高輸血療效，確保臨床輸血安全、有效。