劉昶 李寧 李鎮(zhèn)宏

【摘 要】根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》2003版，通過GC-FID進(jìn)行測定，對大蒜素的測定項(xiàng)目進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)、精密度試驗(yàn)、檢測限、定量限、線性關(guān)系與線性范圍考察、重復(fù)性試驗(yàn)、準(zhǔn)確度試驗(yàn)（加樣回收試驗(yàn)）的驗(yàn)證，通過重復(fù)性試驗(yàn)和回收率試驗(yàn)驗(yàn)證檢驗(yàn)過程的回收率和重現(xiàn)性，并確定大蒜素的線性范圍、定量限，用以確定GC-FID法的適用性及可控性。

【關(guān)鍵詞】保健食品、大蒜素、方法學(xué)驗(yàn)證

引言

大蒜素（大蒜新素、garlicin）為三硫代烯丙醚類化合物，天然存在于百合科植物大蒜的鱗莖中。對多種革蘭氏陽性和陰性菌均有抗菌作用，對骨髓移植者并發(fā)巨細(xì)胞病毒感染有明顯防治作用。尚有降低血膽固醇、甘油三酯和脂蛋白以及抗血小板凝集、抗腫瘤作用，成為近年來較受關(guān)注的保健食品功效性成分和特征成分。因此，對于第三方檢測機(jī)構(gòu)，以大蒜素等功效成分為例的保健食品的檢測中蘊(yùn)藏著大量的商機(jī)。

1 試驗(yàn)方法

1.1 色譜條件

HP-5柱（30m*250μm*0.25μm），程序升溫：初始溫度為50℃，以30℃/min的速率升至160℃，保持3分鐘，以100℃/min的速率升至230℃，保持3分鐘。進(jìn)樣口溫度180℃，分流比10：1；檢測器溫度180℃。

1.2 大蒜素標(biāo)準(zhǔn)液

（1）儲備液：準(zhǔn)確稱取大蒜素標(biāo)準(zhǔn)品適量，用正己烷稀釋，使得溶液濃度為10mg/mL。

（2）工作曲線：取標(biāo)準(zhǔn)儲備液，用正己烷配制稀釋成濃度為0.02，0.05，0.10，0.50，1.00，2.00，3.00，5.00mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.3 供試品溶液

稱取1.0g樣品（以大蒜軟膠囊為例），于10mL量瓶中，加入5mL正己烷，超聲提取30min，用正己烷定容，振搖后靜置，經(jīng)0.45μm濾膜過濾后待測。

2 結(jié)果與討論

2.1 精密度試驗(yàn)

分別精密吸取大蒜素標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的最高點(diǎn)和最低點(diǎn)各1μL，按測定方法重復(fù)進(jìn)樣6次，測定峰面積值。對各次測得的峰面積值求相對標(biāo)準(zhǔn)偏差值，用以說明儀器精密度情況，其RSD為0.53%，說明儀器精密度良好。

2.2 線性關(guān)系與線性范圍考察

按照2.2所述配制大蒜素標(biāo)準(zhǔn)儲備液，分別取該工作溶液1μL注入氣相色譜儀，以峰面積為縱坐標(biāo)，以大蒜素濃度為橫坐標(biāo)作線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線為598.2x-5.3，R2=0.99999。

2.3 檢測限的確定

配制濃度為0.009mg/mL的對照品溶液，按上述色譜條件進(jìn)行測定，測得信噪比為4.6：1，滿足信噪比3：1為最低檢測限的要求，因此該方法中由儀器檢出限所推到得到的大蒜素檢出限為0.009%。

2.4定量限的確定

配制濃度為0.9mg/mL的對照品溶液，按上述色譜條件進(jìn)行測定，測得信噪比為10.7：1，滿足信噪比10：1為最低檢測限的要求，因此該方法中由儀器定量限所推到得到的大蒜素定量限為0.02%。

2.5 重復(fù)性試驗(yàn)：

取樣品6份進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)，RSD為1.0%，重復(fù)性良好。

2.6 加標(biāo)回收率試驗(yàn)（準(zhǔn)確度試驗(yàn)）

采取全程加樣法。取6份已知含量的保健食品2.0g，精密稱定，按照1：1的大蒜素量加標(biāo)，依法測定，并計(jì)算出保健食品中大蒜素的含量。以下式計(jì)算回收率。

試驗(yàn)結(jié)果：平均回收率為96.0%（RSD=1.4%）。結(jié)果較滿意，表明本法適用于本實(shí)驗(yàn)室。

3 結(jié)論

根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》2003版，通過GC-FID進(jìn)行測定，對大蒜素的測定項(xiàng)目進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)、特異性試驗(yàn)、精密度試驗(yàn)、線性關(guān)系與線性范圍考察、檢測限、定量限、重復(fù)性試驗(yàn)、準(zhǔn)確度試驗(yàn)（加樣回收試驗(yàn)），各項(xiàng)試驗(yàn)測試結(jié)果均能滿足要求，儀器性能穩(wěn)定，質(zhì)控結(jié)果滿意。從以上數(shù)據(jù)可以看出用該方法檢測牙膏中的大蒜素的含量，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，該方法中大蒜素的方法檢出限為0.009%，定量限為0.02%，大蒜素的線性范圍為0.01mg/mL～4.5mg/mL。