周巍

[摘要] 目的 通過檢測(cè)尿液中的核基質(zhì)蛋白22，探討其在膀胱癌篩查中的臨床應(yīng)用價(jià)值。 方法 收集2017年6～12月在我院就診的189例可疑膀胱癌患者的尿液標(biāo)本，對(duì)其進(jìn)行尿液核基質(zhì)蛋白22檢測(cè)與尿液脫落細(xì)胞學(xué)檢查，比較這兩種檢查方法對(duì)膀胱癌的診斷結(jié)果。 結(jié)果 尿液核基質(zhì)蛋白22和脫落細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的敏感性分別為80.0%和57.6%，特異性分別為40.4%和94.2%，兩組敏感性和特異性比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。且兩種檢查方法對(duì)膀胱癌的陽性預(yù)測(cè)率分別為68.8%和29.1%，兩者比較差異顯著。 結(jié)論 尿液核基質(zhì)蛋白22作為新的標(biāo)記物在臨床應(yīng)用中對(duì)患者創(chuàng)傷性較小、敏感度較高，在膀胱癌的診斷中與尿脫落細(xì)胞結(jié)合篩查可作為首選方法。

[關(guān)鍵詞] 膀胱癌；尿液核基質(zhì)蛋白22；脫落細(xì)胞學(xué)；敏感性；特異性

[中圖分類號(hào)] R737.14 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2018）16-0132-03

[Abstract] Objective To investigate the clinical value of detecting nuclear matrix protein 22 in urine in the screening of bladder cancer. Methods Urine samples of 189 suspected bladder cancer patients who were treated in our hospital from June 2017 to December 2017 were collected. We performed urinary nuclear matrix protein 22 test and urine exfoliated cytology test to the urine samples. The diagnostic results of bladder cancer of the two tests were compared. Results The sensitivities of urinary nuclear matrix protein 22 and exfoliative cytology were 80.0% and 57.6%， and the specificities were 40.4% and 94.2%， respectively. There were significant differences in sensitivity and specificity between the two groups（P<0.05）. The positive predictive rates of the two methods for bladder cancer were 68.8% and 29.1%， respectively， with significant difference between the two methods. Conclusion Urine nuclear matrix protein 22 as a new marker is less invasive and has high sensitivity in the diagnosis of bladder cancer. Urine nuclear matrix protein 22 combined with exfoliative cytology may be the preferred method in clinic.

[Key words] Bladder cancer； Urine nuclear matrix protein 22； Exfoliative cytology； Sensitivity； Specificity

膀胱癌是指發(fā)生在膀胱黏膜上的惡性腫瘤，是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，也是全身十大常見腫瘤之一，占我國(guó)泌尿生殖系腫瘤發(fā)病率的第一位[1，2]。我國(guó)膀胱癌年齡標(biāo)準(zhǔn)化發(fā)病率男性為3.8/10萬，女性為1.8/10萬。近年來，我國(guó)部分城市腫瘤發(fā)病率報(bào)告顯示膀胱癌發(fā)病率有增高趨勢(shì)。膀胱癌男性發(fā)病率為女性的3～4倍。膀胱癌的發(fā)生是復(fù)雜、多因素、多步驟的病理變化過程，既有內(nèi)在的遺傳因素，又有外在的環(huán)境因素。

目前臨床上篩查膀胱癌的方法較多，包括常規(guī)檢查、尿脫落細(xì)胞檢查、X造影檢查、膀胱鏡以及B超檢查[3]。膀胱鏡檢查是常用的可靠方法，可明確膀胱腫瘤的數(shù)目、大小、形態(tài)等。但存在尿道狹窄或膀胱有活動(dòng)性出血不能進(jìn)行膀胱鏡檢查，在出血或炎癥情況下準(zhǔn)確性降低，另外在原位癌與正常組織難以區(qū)別。而尿液脫落細(xì)胞學(xué)檢查雖然快速與簡(jiǎn)便，但敏感性略低[4]。尿液核基質(zhì)蛋白22（NMP22）診斷試劑盒能簡(jiǎn)便、快速對(duì)可疑尿液標(biāo)本進(jìn)行篩查[5]。本研究分別采用尿脫落細(xì)胞學(xué)與NMP22試劑盒檢測(cè)了2017年6～12月就診的189例可疑膀胱癌患者的尿液標(biāo)本，通過檢測(cè)結(jié)果比較來探討NMP22在膀胱癌篩查中的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年6～12月在我院泌尿外科收治的189例可疑膀胱癌患者為研究對(duì)象。其中男121例，女68例，年齡37～81歲，平均（59.6±3.2）歲。后經(jīng)手術(shù)病理或膀胱鏡活檢確診膀胱癌患者85例，其他泌尿系疾病患者104例。排除標(biāo)準(zhǔn)：泌尿系器械留置，合并有其他泌尿系惡性腫瘤者。

1.2 診斷方法

所有研究對(duì)象留取新鮮尿液標(biāo)本100 mL送檢，在2 h內(nèi)對(duì)送檢標(biāo)本進(jìn)行脫落細(xì)胞學(xué)分級(jí)檢查和NMP22膠體金法定性檢查。尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查將涂片中的細(xì)胞變化用四級(jí)分級(jí)方法表示，分為陰性、核異質(zhì)，可疑和陽性四級(jí)[6]。尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查能夠客觀地反映細(xì)胞學(xué)所見。所有操作由同一具有副高職稱的人員進(jìn)行，并對(duì)分級(jí)結(jié)果進(jìn)行陰性和陽性統(tǒng)計(jì)。NMP22膠體金檢測(cè)嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作，所有標(biāo)本在2 h內(nèi)檢測(cè)完成。該試劑盒利用裝在塑料盒中的橫流免疫層析條帶定性檢測(cè)患者尿樣中的核基質(zhì)蛋白。試驗(yàn)使用了兩種不同的單克隆抗體：一種是捕獲抗體，另一種是報(bào)告抗體。將未經(jīng)處理的尿樣加4滴到塑料盒的樣品孔中，反應(yīng)30 min后讀取定性結(jié)果。陽性結(jié)果：仔細(xì)觀察檢測(cè)板的檢測(cè)（T）區(qū)。在對(duì)照（C）線存在時(shí)，檢測(cè)（T）區(qū)的任何完整線，均表示結(jié)果陽性。陰性結(jié)果：仔細(xì)觀察檢測(cè)板的檢測(cè)（T）區(qū)。如果存在對(duì)照（C）線，而在檢測(cè)（T）區(qū)無任何顏色線條出現(xiàn)，即表示結(jié)果為陰性。無效結(jié)果：如果程式對(duì)照（C）區(qū)無條帶出現(xiàn)，或檢測(cè)（T）線涂抹不清或不完整，試驗(yàn)無效，必須用新檢測(cè)板重測(cè)。無效結(jié)果的最常見原因是未能向加樣孔加足4大滴尿樣或尿液中有氣泡[7]。

1.3評(píng)價(jià)指標(biāo)

分別計(jì)算NMP22檢測(cè)、尿脫落細(xì)胞檢查兩種方法對(duì)膀胱癌的檢出率。最終以患者的組織病理學(xué)診斷結(jié)果作為判斷依據(jù)，分別對(duì)NMP22與尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查診斷膀胱癌的敏感度、特異性、準(zhǔn)確度進(jìn)行計(jì)算。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSSl7.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多樣本均數(shù)比較采用方差分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

研究結(jié)果顯示，NMP22檢測(cè)和尿脫落細(xì)胞檢查兩種方法對(duì)膀胱癌的檢測(cè)陽性率分別為68.8%（130/189）和29.1%（55/189）。以組織病理學(xué)診斷結(jié)果為依據(jù)，則其檢測(cè)敏感度分別為80.0%（68/85）、57.6%（49/85），特異性分別為40.4%（42/104）、94.2%（98/104），準(zhǔn)確度分別為58.2%（110/189）、77.8%（147/189）。可見NMP22檢測(cè)在陽性率和敏感度方面要顯著高于尿脫落細(xì)胞檢查，而在特異性和準(zhǔn)確度方面低于尿脫落細(xì)胞檢查，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1、表2。

3 討論

早期診斷膀胱癌并給予相應(yīng)的治療對(duì)改善患者預(yù)后有著十分重要的意義[8]。為了提高無創(chuàng)檢測(cè)膀胱癌的水平，尿液膀胱癌標(biāo)記物的研究受到了很大的關(guān)注，美國(guó)FDA已經(jīng)批準(zhǔn)NMP22、FISH等用于膀胱癌的檢測(cè)，其中NMP22是受關(guān)注較多的一種，在檢測(cè)膀胱癌的臨床研究中顯示了較高的性能。NMP22是參與維持細(xì)胞核功能的一種三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)蛋白，參與構(gòu)成細(xì)胞核內(nèi)部框架，并與DNA復(fù)制、RNA合成、激素合成有關(guān)。進(jìn)一步研究表明核基質(zhì)蛋白參與了基因表達(dá)的調(diào)節(jié)和協(xié)調(diào)[9，10]。核有絲分裂器蛋白在核基質(zhì)蛋白中占有很大的比例，在腫瘤細(xì)胞內(nèi)，核有絲分裂器蛋白的升高與惡性細(xì)胞的細(xì)胞核結(jié)構(gòu)/形態(tài)改變相符合。由于細(xì)胞死亡（如凋亡），該蛋白從細(xì)胞內(nèi)釋放出來并達(dá)到可檢測(cè)的水平。據(jù)報(bào)道，膀胱癌上皮細(xì)胞內(nèi)NMP22的表達(dá)量是正常的25倍之多，所以NMP22可能作為膀胱癌特有的標(biāo)記物[11-13]。利用膠體金法可以快速檢測(cè)尿液中的NMP22含量，且具有較高的敏感度和特異性，在早期膀胱癌的篩查中具有很好的應(yīng)用價(jià)值[14]。

楊青等[15]的研究表明，尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)膀胱癌診斷的敏感性為42.6%，特異性為86.7%。在本研究中分別采用尿脫落細(xì)胞檢查和NMP22檢測(cè)兩種方法對(duì)189例可疑膀胱癌患者尿液標(biāo)本進(jìn)行了檢查，結(jié)果表明NMP22檢測(cè)在陽性率和敏感度上均相對(duì)較高，證明NMP22可以作為膀胱癌檢測(cè)的敏感指標(biāo)。因此可將NMP22列入體檢項(xiàng)目中，可以排除高危人群，對(duì)出現(xiàn)血尿或疑似膀胱癌患者，NMP22檢測(cè)能快速輔助醫(yī)生進(jìn)行診斷。NMP22也可適用于長(zhǎng)期吸煙史、化工職業(yè)等高危因素人群篩查、有臨床血尿的患者以及中低危非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌患者術(shù)后的隨診。但NMP22的檢測(cè)結(jié)果特異性比較低，僅為40.4%，因此不能作為確診膀胱癌的唯一手段。任何可以導(dǎo)致核基質(zhì)蛋白在尿液中出現(xiàn)的疾病均可以產(chǎn)生陽性結(jié)果。陽性結(jié)果也可見于某些患泌尿道良性疾病，前列腺癌和活動(dòng)癌癥治療期的患者。單獨(dú)使用NMP22檢測(cè)試劑盒（膠體金法）的結(jié)果不能被看作是膀胱惡性疾病有或無的證據(jù)。在疾病診斷和患者護(hù)理中要綜合考慮其他臨床認(rèn)可的試驗(yàn)和檢查手段。

尿脫落細(xì)胞學(xué)作為常用傳統(tǒng)方法，其對(duì)分級(jí)低的膀胱癌敏感性較低，一方面是由于腫瘤細(xì)胞分化較好，其特征與正常細(xì)胞相似，不易鑒別。另一方面由于癌細(xì)胞之間粘結(jié)相對(duì)緊密，無足夠多的癌細(xì)胞脫落到尿中而被檢測(cè)到，所以尿細(xì)胞學(xué)陰性并不能排除低級(jí)別尿路上皮癌的存在。但細(xì)胞脫落學(xué)檢查特異性高達(dá)94.2%，可與NMP22聯(lián)合檢測(cè)，提高檢出率和特異性的同時(shí)減少膀胱鏡有創(chuàng)檢測(cè)給患者帶來的痛苦。

總之，尿NMP22檢測(cè)在膀胱癌的篩查中具有較高的敏感度，可以將其作為膀胱癌的首選篩查方法，在臨床上可聯(lián)合細(xì)胞脫落學(xué)檢查，減少漏診，做到早發(fā)現(xiàn)、早治療。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Niegisch G，Hoffmann MJ，Koutsogiannouli EA，et a1.Epigeneties in urothelial cancer：Pathogenesis，improving diagnostics and devetoping novel treatment options[J].Urologe A，2015，54（4）：526-532.

[2] Chen W，Zheng R，Baede PD，et al.Cancer statistics in China，2015[J].Ca Cancer J Clin，2016，66（2）：115-132.

[3] 李紅企，唐穎.尿液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合腫瘤標(biāo)志物對(duì)膀胱癌診斷價(jià)值的研究[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2014，20（35）：19-20.

[4] Witjes JA，Comperat E，Cowan NC，et a1.EAU guidelines on muscle invasive and metastatic bladder cancer：Summary of the 2013 guidelines[J].Eur Urol，2014，65（4）：778-792.

[5] 李輝英.尿核基質(zhì)蛋白-22和液基細(xì)胞學(xué)在血尿患者膀胱癌篩查中的應(yīng)用[J].廣東微量元素科學(xué)，2016，23（7）：42-44.

[6] 丁麗麗，黃玲莎，葉儉，等.尿膀胱腫瘤抗原在膀胱癌中的表達(dá)及意義[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2017，27（6）：106-109.

[7] 裴發(fā)軍，邊家盛，鄒本奎，等.尿核基質(zhì)蛋白22對(duì)膀胱癌的診斷價(jià)值[J].山東醫(yī)藥，2016，56（18）：55-56.

[8] 何安仁，宋洪飛，史濤坪.腹腔鏡與開放性根治術(shù)治療膀胱癌的療效比較[J].山西醫(yī)藥雜志，2018，47（2）：174-176.

[9] 吳靜，方克偉.尿液中核基質(zhì)蛋白22聯(lián)合端粒酶活性檢測(cè)診斷膀胱癌的實(shí)驗(yàn)研究[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2013， 21（3）：595-598.

[10] 徐子程，蔡宏宙，喻彬，等.膀胱腫瘤相關(guān)抗原在中國(guó)人群膀胱尿路上皮癌診斷中的應(yīng)用[J].臨床泌尿外科雜志，2016，31（10）：900-902.

[11] Keesee SK，Briggman JV，Thill G，et a1.Utilization of nuclear matrix proteins for cancer diagnosis[J].Crit Rev Eukaryot GencExpr，1996，6（2-3）：189-214.

[12] He H，Han C，Hao L，et al.Immuno Cyt test compared to cytology in the diagnosis of bladder cancer：A meta-analysis[J].Oncol Lett，2016，12（1）：83-88.

[13] Yafi FA，Brimo F，Steinberg J，et a1.Prospective analysis of sensitivity and specificity of urinary cytology and other urinary biomarkers for bladder cancer[J].Urol Oncol，2015， 33（2）：25-31.

[14] Todenhofer T，Hennenlotter J，Guttenberg P，et a1.Prognostic relevance of positive urine markep3 in pafients with negative cystoscoPY during surveillance of bladder cancer[J].BMC Cancer，2015，（2015）：155.

[15] 楊青，李俊.膀胱癌尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查與尿液腫瘤標(biāo)志物研究進(jìn)展[J].安徽醫(yī)藥，2012，16（4）：528-529.

（收稿日期：2018-02-05）