柯昌嬌 王寶維 葛文華 張名愛 岳 斌 龍建華 刁翠萍

(青島農業(yè)大學優(yōu)質水禽研究所，國家水禽產業(yè)技術體系營養(yǎng)與飼料功能研究室，青島266109)

鋅是動物生長過程中所必需的微量元素，對動物的生長發(fā)育和機體代謝具有重要的作用，因此被稱為“生命元素”?？莶菅挎邨U菌對二價金屬離子具有吸附作用，可吸附腸道內的二價金屬離子，使其與自身產生的氨基酸等化合物形成螯合物，從而被機體吸收或排出體外，對生物體的健康生長具有促進作用。隨著我國養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，養(yǎng)殖業(yè)帶來的環(huán)境污染問題也日益嚴重。由于重金屬污染產生積累性、不可逆性和長期性等后果，這一領域的研究一直是國內外環(huán)境科學、生態(tài)科學等領域的研究熱點[1]。不能被機體吸收而被排放的鋅是重金屬污染中一個重要的污染物質。為此，開展低鋅水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌的研究具有重要的意義。

大量研究發(fā)現(xiàn)，乳酸桿菌可產生一種抗細菌物質，可以抑制腸道內菌群的腐敗產物，改善腸道環(huán)境，從而增進健康、延長壽命[2]。枯草芽孢桿菌作為微生態(tài)制劑的一種，可以有效地改善腸道菌群的組成，促進機體對營養(yǎng)物質的吸收。López等[3]研究指出，芽孢桿菌屬菌株均有強大的吸附金屬能力，這是因為金屬離子能夠與該菌細胞表面上的陰離子相互作用而被固定。Jayaraman等[4]研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌能夠抑制由產氣莢膜梭菌引起的肉仔雞壞死性腸炎，提高肉仔雞的腸道健康水平。鋅是動物體內功能最多的微量元素之一，家禽的生長、初羽和骨骼發(fā)育都離不開鋅，鋅不僅參與動物體內三大物質、核酸、維生素以及微量元素等的代謝，而且六大酶系中近300多種酶的活性都與鋅有關[5]，它是骨骼發(fā)育、生殖、免疫、凝血等生理功能所必需的。目前，關于鋅和枯草芽孢桿菌單一功能的研究較多，但是關于鋅與枯草芽孢桿菌協(xié)同作用的研究較少，尤其是枯草芽孢桿菌減少鋅添加水平方面的報道還處于空白。因此，本試驗以5～15周齡五龍鵝為動物模型，研究不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對其生長性能、屠宰性能、肉品質和養(yǎng)分利用率的影響，旨在確定添加枯草芽孢桿菌條件下的飼糧鋅適宜添加水平，為微量元素減量化使用提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及設計

選擇5周齡體況相近的五龍鵝360只，采用隨機分配編號法，隨機分為6組，每組6個重復，每個重復10只鵝(公母各占1/2)。試驗設計如表1所示，對照組在基礎飼糧中添加80 mg/kg鋅，不添加枯草芽孢桿菌；Ⅰ～Ⅴ組為試驗組，在基礎飼糧中分別添加0、20、40、60和80 mg/kg鋅，枯草芽孢桿菌添加水平均為250 mg/kg。試驗期11周。試驗鵝由青島農業(yè)大學優(yōu)質水禽研究所育種基地提供，試驗用鋅源為7個結晶水的硫酸鋅，購自浙江新維普添加劑有限公司(有效成分98%)，枯草芽孢桿菌購自江蘇遠方中匯生物科技有限公司。

表1 試驗設計

1.2 試驗飼糧

試驗用基礎飼糧以玉米和豆粕為主要原料，參照NRC(1994)家禽需要量中推薦的鵝飼糧營養(yǎng)水平設計配方，基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。采用等離子體發(fā)射光譜儀測得基礎飼糧中鋅含量為22.65 mg/kg。

1.3 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗開始前對鵝舍及器具進行沖洗和燒堿水噴霧消毒，然后用福爾馬林和高錳酸鉀(每1 m3加28 mL福爾馬林，14 g高錳酸鉀)熏蒸，密閉門窗24 h。1周后開始試驗。試驗鵝采用網床飼養(yǎng)方式，全期自由采食，自由飲水。試驗前鵝舍進行充分沖洗和嚴格消毒，試驗期內每周消毒2次。用干濕球溫度計測量鵝舍內溫度和濕度，每天記錄3次，分別為08:00、14:00和20:00。

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能指標的測定

在第15周齡末，以重復為單位分別進行空腹稱重，計算5～15周齡的平均日增重(ADG)；統(tǒng)計每日耗料量，計算平均日采食量(ADFI)；每天記錄各組死淘情況，結合三者計算料重比(F/G)[6]。

1.4.2 屠宰性能指標的測定

在第15周齡末，從每組中分別抽取12只體重接近該組平均體重的鵝，每重復2只(公母各占1/2)，共72只，禁食12 h后記錄活體重，頸靜脈放血致死，按照《家禽生產性能名詞術語和度量統(tǒng)計方法》(NY/T 823—2004)用濕法拔毛冽干水分后記錄屠體重，測定記錄屠體重、半凈膛重、全凈膛重、腹脂重、胸肌重和腿肌重，并計算屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。

表2 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

1)多維和微量元素為每千克飼糧提供 Multivitamin and trace element provided the following per kg of the diet: VD3200 IU，VA1500 mg，VE1 2.5 mg，VK31.5 mg，VB12.2 mg，VB25.0 mg，煙酸 nicotinic acid 65 mg，泛酸 pantothenate 15 mg，VB62 mg，生物素 biotin 0.2 mg，葉酸 folic acid 0.5 mg，膽堿 choline 1 000 mg，F(xiàn)e 85 mg，Mn 80 mg，Cu 20 mg，I 0.42 mg，Se 0.3 mg，Co 2.5 mg。

2)鋅為實測值，其他營養(yǎng)水平為計算值。Zn was a measured value, while other nutrient levels were calculated values.

1.4.3 肉品質指標的測定

選擇15周齡末屠宰的試驗鵝，用手術刀在鵝胸大肌中央部位采取肉樣，放置在25 ℃條件下，發(fā)色30 min后進行肌肉品質測定，用日本全自動色彩色差計測定胸肌肉色，用物性測試儀(TA-XT PLUS)測定剪切力，用便攜式酸度計(HANHA-HI9025)測定pH，用壓力計測定失水率。

1.4.4 養(yǎng)分利用率的測定

在第15周齡末，從各組隨機抽取6只鵝(公母各占1/2)移入代謝籠(專利號：200720177297)進行飼養(yǎng)，預試期4 d，禁食1 d后正式試驗，試驗期3 d，自由飲水，每天分別飼喂120 g的飼糧。在代謝籠下放置集糞盤，采用全收糞法，定時收集連續(xù)4 d的排泄物，鹽酸固氮，混合后取糞樣。

待測飼料粉碎至40 mm，低溫干燥保存。糞樣在65～75 ℃烘箱中烘干，然后用小型萬能粉碎機將干糞樣粉碎。代謝能(ME)采用氧彈法進行測定，粗蛋白質(CP)含量采用凱式半自動定氮分析儀進行測定，鋅含量采用等離子體發(fā)射光譜儀(ICP)進行測定，粗纖維(CF)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)含量采用ANKOM公司的ANKOM220 Fiber Analyzer設備進行測定，粗脂肪(EE)含量采用乙醚浸提法進行測定。

1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

采用SPSS 22.0軟件的單因素方差分析(one-way ANOVA)方法，分析飼糧不同鋅添加水平下添加枯草芽孢桿菌對各項指標的影響，對飼糧鋅水平進行線性和二次關系分析。為了檢驗枯草芽孢桿菌的添加效果，對對照組和枯草芽孢桿菌組(Ⅴ組)的結果進行配對t檢驗(2組飼糧中鋅添加水平均為80 mg/kg，對照組不添加枯草芽孢桿菌，Ⅴ組添加250 mg/kg枯草芽孢桿菌)。將數(shù)據(jù)作為最小二乘法和標準誤差(SEM)表示。P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝生長性能的影響

由表3可知，飼糧鋅添加水平對肉鵝體重、平均日增重和料重比影響極顯著(P<0.01)。Ⅲ組肉鵝的體重和平均日增重最高，顯著高于Ⅰ、Ⅴ組(P<0.05)；Ⅳ組肉鵝的料重比最低，顯著低于Ⅰ、Ⅴ組(P<0.05)。各組間平均日采食量沒有顯著差異(P>0.05)。

由表4可知，通過配對t檢驗分析，與對照組(未添加枯草芽孢桿菌)相比，Ⅴ組(添加枯草芽孢桿菌)肉鵝的體重顯著增加(P<0.05)，料重比降低(P>0.05)。

以上結果表明，在飼糧鋅添加水平相同的情況下，添加枯草芽孢桿菌能有效促進肉鵝的生長性能。

體重、平均日增重和料重比與鋅添加水平之間呈二次型曲線回歸關系(P<0.05)，對添加枯草芽孢桿菌的Ⅰ～Ⅴ組平均日增重(Y1)和料重比(Y2)分別與飼糧鋅添加水平(X)進行二次曲線擬合，建立回歸方程如下：

Y1=-0.001X2+0.095X+30.537 (R2=0.636，PQ=0.000)；Y2=0.001X2-0.030X+6.387 (R2=0.630，PQ=0.000)。

表3 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝生長性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標相同小寫字母或無字母表示差異不顯著(P>0.05)，相鄰小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相間小寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。

In the same row, values with the same small or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with adjacent small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with alternate small letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

表4 枯草芽孢桿菌對肉鵝生長性能的影響

由上述曲線回歸方程得出，飼糧中鋅添加水平為47.5 mg/kg時平均日增重最大，飼糧中鋅添加水平為15.0 mg/kg時料重比最低。從綜合效益角度分析，建議肉鵝飼糧中枯草芽孢桿菌添加水平為250 mg/kg條件下，飼糧鋅適宜添加水平為15.0～47.5 mg/kg。

2.2 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝屠宰性能的影響

由表5可知，飼糧鋅添加水平對肉鵝屠宰率影響極顯著(P<0.01)。Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組肉鵝的屠宰率顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.05)，Ⅳ組肉鵝的屠宰率最高。各組間肉鵝的半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率差異不顯著(P>0.05)，但Ⅰ組均低于其他4個試驗組。

由表6可知，通過配對t檢驗分析，Ⅴ組肉鵝的屠宰率、胸肌率、腹脂率顯著高于對照組(P<0.05)，半凈膛率、全凈膛率高于對照組(P>0.05)。

以上結果表明，枯草芽孢桿菌與鋅協(xié)同對肉鵝的屠宰性能有一定的促進作用。

對Ⅰ～Ⅴ組屠宰率(Y3)與飼糧中鋅的添加水平(X)進行二次曲線擬合，建立回歸方程如下：

Y3=76.797+0.508X-0.006X2

(R2=0.618，PQ=0.000)。

由上述曲線回歸方程得出，飼糧鋅添加水平為42.33 mg/kg時屠宰率最大。從綜合效益角度分析，建議枯草芽孢桿菌添加水平為250 mg/kg條件下，獲得最佳屠宰率的飼糧鋅添加水平為42.33 mg/kg。

他大學學經濟，是老爸喜歡的專業(yè)，他幫老爸實現(xiàn)未竟的理想。大學一畢業(yè)就眾望所歸地考上公務員，搞對外經濟貿易研究。五年了，出來進去人模狗樣，還誰都愛夸他兩句：瞧瞧人家，辦公室坐著，國家代表著，錢沒少拿，活得要多滋潤有多滋潤。

表5 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝屠宰性能的影響

表6 枯草芽孢桿菌對肉鵝屠宰性能的影響

2.3 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝肉品質的影響

由表7可知，飼糧鋅添加水平對肉鵝肌肉失水率影響極顯著(P<0.01)。Ⅱ、Ⅲ組肉鵝的肌肉失水率顯著低于Ⅳ、Ⅴ組(P<0.05)，Ⅲ組肌肉失水率最低。各組間肉鵝的肉色、剪切力和pH差異不顯著(P>0.05)。以上結果表明，飼糧中鋅添加水平超過40 mg/kg對肉品質理化性質無顯著影響。

表7 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝肉品質的影響

由表8可知，通過配對t檢驗分析，Ⅴ組肉鵝的肌肉紅度值顯著高于對照組(P<0.05)，肌肉亮度、黃度值及剪切力、pH、失水率與對照組沒有顯著差異(P>0.05)。

表8 枯草芽孢桿菌對肉鵝肉品質的影響

2.4 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝養(yǎng)分和能量利用率的影響

由表9可知，飼糧鋅添加水平對肉鵝的粗蛋白質、粗脂肪利用率影響顯著(P<0.05)，對肉鵝的粗纖維、鋅利用率影響極顯著(P<0.01)。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組肉鵝的粗蛋白質利用率顯著高于Ⅰ組(P<0.05)；Ⅳ組肉鵝的粗脂肪利用率極顯著高于Ⅱ組(P<0.01)，顯著高于Ⅴ組(P<0.05)；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組肉鵝的粗纖維利用率顯著高于Ⅰ、Ⅴ組(P<0.05)；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組肉鵝的鋅利用率顯著低于Ⅳ、Ⅴ組(P<0.05)；各組間肉鵝的中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維利用率差異不顯著(P>0.05)。Ⅳ組肉鵝的粗蛋白質、粗脂肪、粗纖維利用率均最高。

表9 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝養(yǎng)分利用率的影響

由表10可知，通過配對t檢驗分析，Ⅴ組肉鵝的粗蛋白質、中性洗滌纖維利用率顯著高于對照組(P<0.05)，而粗脂肪、粗纖維、酸性洗滌纖維和鋅利用率與對照組沒有顯著差異(P>0.05)。

表10 枯草芽孢桿菌對肉鵝養(yǎng)分利用率的影響

由表11可知，飼糧鋅添加水平對肉鵝的排泄氮、氮利用率影響顯著(P<0.05)。Ⅱ、Ⅲ組肉鵝的排泄氮顯著低于Ⅰ組(P<0.05)，與Ⅳ、Ⅴ組無顯著差異(P>0.05)；Ⅳ、Ⅴ組肉鵝的氮利用率顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組(P<0.05)。

表11 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝氮利用率的影響

由表12可知，通過配對t檢驗分析，Ⅴ組肉鵝的氮利用率顯著高于對照組(P<0.05)，食入氮、排泄氮和沉積氮與對照組沒有顯著差異(P>0.05)。

表12 枯草芽孢桿菌對肉鵝氮利用率的影響

表13 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝能量利用率的影響

表14 枯草芽孢桿菌對肉鵝能量利用率的影響

3 討 論

3.1 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝生長性能的影響

動物的生長性能是反映動物生長發(fā)育的指標，幼齡動物是生長力最旺盛的時期，其生長性能高低將直接影響其進入育成期的生長發(fā)育好壞?？莶菅挎邨U菌可促進動物對營養(yǎng)物質的吸收，提高飼料轉換率，還可以預防疾病，促進動物的生長[7]。肉仔雞飼糧中添加芽抱桿菌替代抗生素使用，可以達到促進生長發(fā)育、提高飼料效率的效果[8]。馬芳[9]研究報道，在肉仔雞生長后期，飼糧中添加80 mg/kg鋅時，生長性能較好。蘇麗娜等[10]研究了鋅對蛋雛鴨生長性能的影響，發(fā)現(xiàn)飼糧鋅水平的提高能促進蛋雛鴨生長性能，并確定蛋雛鴨適宜鋅添加水平為51.8 mg/kg。Hooge等[11]研究證實了枯草芽孢桿菌制劑對肉雞、肉鵝的促生長作用。本試驗結果表明，與對照組相比，飼糧鋅添加水平相同的情況下，添加枯草芽孢桿菌提高了肉鵝的體重。不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌的各組中，Ⅰ組的生長性能低于其他各組，且鵝群普遍出現(xiàn)缺鋅癥狀。另外，在飼糧中添加250 mg/kg枯草芽孢桿菌條件下，鋅添加水平為15.0 mg/kg時，料重比比對照組降低了13.17%；鋅添加水平為47.5 mg/kg，平均日增重比對照組提高了10.30%。這表明，枯草芽孢桿菌與鋅協(xié)同作用能夠顯著提高肉鵝的生長性能，并且有效的降低鋅添加水平。

3.2 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝屠宰性能的影響

屠宰性能是評價家禽品種優(yōu)劣、飼養(yǎng)管理水平及屠宰加工效益的重要依據(jù)，它直觀地反映出動物體組成及可食部分的比例。有研究表明，飼糧鋅水平對屠宰性能并無顯著影響[12]；Tang等[13]研究表明，飼糧添加桿菌肽鋅組北京鴨的生長性能和屠宰性能均顯著高于β-葡聚糖組和對照組。飼糧中添加500 mg/kg的枯草孢桿菌能顯著提高35日齡肉仔雞的屠宰率，對屠宰性能其他指標沒有顯著影響[14]；飼糧中添加1%的枯草芽孢桿菌能提高絲羽烏骨雞的胸肌質量[15]。本試驗結果表明，枯草芽孢桿菌組的屠宰率顯著高于對照組。在飼糧中添加枯草芽孢桿菌條件下，不同鋅添加水平有提高屠宰性能的趨勢。這說明枯草芽孢桿菌與鋅協(xié)同對肉鵝的屠宰性能有一定的促進作用，并且能有效地降低飼糧鋅添加水平。

3.3 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝肉品質的影響

目前，對于枯草芽孢桿菌與家禽胴體品質的關系研究很少。劉澤輝[16]研究了不同鋅源對肉雞肉品質的影響，結果表明肉雞飼糧中添加鋅可以促進肉雞的生長，提高胴體性能，改善肉品質。任列嬌等[17]研究發(fā)現(xiàn)，肉雞胸肌剪切力越低，肉品質越好。本試驗結果表明，飼糧添加枯草芽孢桿菌對肉品質作用不顯著，但飼糧鋅添加水平對肉鵝肌肉失水率有顯著影響。目前，關于鋅和枯草芽孢桿菌對于肉鵝肉品質影響的研究還比較少，有關機理和功能還有待于繼續(xù)研究。

3.4 不同鋅添加水平飼糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鵝養(yǎng)分和能量利用率的影響

動物生產過程中的排泄物是造成環(huán)境污染的重要因素之一，其中礦物元素尤其是微量元素大量排泄是環(huán)境污染的主要來源。微量元素排泄不僅與飼糧微量元素添加量密切相關[18]，同時也與其生物有效性存在密切關系[19]。動物養(yǎng)分利用率直接反映動物的代謝速率和生長性能[20]。Neto等[21]研究發(fā)現(xiàn)，螯合鋅能提高伊薩蛋雞糧賴氨酸的利用效率?？莶菅挎邨U菌具有很強的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等活性，能產生抗菌素，在動物腸道內具有較強的生物奪氧能力，這些特性對促進動物的消化吸收、提高動物飼料轉化率和促進生長起到重要作用[22-23]。飼糧中添250 mg/kg的枯芽孢桿菌和8 mg/kg的銅，能顯著提高鵝的粗蛋白質、粗纖維、銅和氮利用率，顯著減少糞氮，極顯著提高酸性洗滌纖維利用率[24]。本試驗結果表明，在飼糧中添加250 mg/kg枯草芽孢桿菌的條件下，飼糧鋅添加水平組對粗蛋白質、粗脂肪、粗纖維和鋅利用率均有顯著或極顯著影響；枯草芽孢桿菌各組的氮利用率也顯著高于對照組。這表明枯草芽孢桿菌的添加可促進鋅在肉鵝體內的消化吸收，提高肉鵝養(yǎng)分利用率，提高鋅的利用率，適當降低鋅添加水平，可減少鋅的排泄和氮的排放，有利于生態(tài)環(huán)境保護；另外，試驗結果也說明枯草芽孢桿菌與鋅具有協(xié)同作用。

4 結 論

飼糧中添加枯草芽孢桿菌和鋅均能夠提高生長性能、屠宰性能及粗蛋白質、粗脂肪、粗纖維、鋅利用率，減少鋅和氮排放量。在飼糧中添加250 mg/kg枯草芽孢桿菌條件下，鋅適宜添加水平為15.0～47.5 mg/kg。