李蕾芳，李芳華

(1許昌學(xué)院醫(yī)學(xué)院，河南許昌461000；2許昌縣人民醫(yī)院)

慢性腎臟病(CKD)病情進(jìn)展較為隱匿，臨床整體預(yù)后較差[1,2]。在具有慢性腎小球疾病或者腎小管疾病病史的人群中，CKD發(fā)病率具有進(jìn)一步上升的趨勢(shì)。炎癥反應(yīng)或過(guò)氧化應(yīng)激狀態(tài)等多種因素均可參與CKD的病情進(jìn)展過(guò)程，導(dǎo)致腎小球損傷，干擾腎小管重吸收功能的修復(fù)，表現(xiàn)為腎小球?yàn)V過(guò)率(eGFR)降低。目前，臨床常用的炎性反應(yīng)指標(biāo)包括白細(xì)胞介素18(IL-18)、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、IL-6等[3,4]；丙二醛(MDA)、晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)是常見(jiàn)的過(guò)氧化指標(biāo)，超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)是還原型化合物，它們共同維持氧化還原反應(yīng)的平衡性[5]。血清Klotho是近年在腎小管上皮組織中被發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，其表達(dá)增加能夠促進(jìn)腎小管上皮組織及離子轉(zhuǎn)運(yùn)體的修復(fù)。2014年1月～2017年1月，我們檢測(cè)了97例CKD患者血清Klotho水平、微炎癥狀態(tài)、氧化應(yīng)激指標(biāo)，分析其與CKD患者腎功能的關(guān)系?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集同期許昌縣人民醫(yī)院確診的CKD患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①CKD患者的診斷、分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會(huì)制定的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；②CKD分期2～5期；③基礎(chǔ)疾病均為慢性腎小球腎炎；④未進(jìn)行透析治療；⑤研究對(duì)象簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有凝血系統(tǒng)疾??；②急慢性感染期；③甲狀腺功能疾病；④伴有上消化道潰瘍、出血疾??；⑤使用透析治療、糖皮質(zhì)激素、免疫調(diào)節(jié)劑的患者；⑥合并糖尿病、原發(fā)性高血壓；⑦伴有惡性腫瘤、腎外傷；⑧近6個(gè)月內(nèi)有促紅素使用史。共收集CKD患者97例(CKD組)，男50例、女37例，年齡(55.2±12.7)歲；K-DOQI指南診斷標(biāo)準(zhǔn)：CKD 2期21例，CKD 3期30例，CKD 4期32例，CKD 5期14例。選擇同期體檢健康者40例作為對(duì)照組，男22例、女18例，年齡(57.0±14.2)歲。本研究獲得醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，兩組性別、年齡具有可比性(P均>0.05)。

1.2 血清Klotho、微炎癥狀態(tài)、氧化應(yīng)激指標(biāo)及腎功能檢測(cè)方法 采集患者肘部靜脈血3 mL，加入抗凝劑枸櫞酸鈉2 mL，以1 000 r/min離心5 min，留取血清冰箱備用。采用ELISA法檢測(cè)Klotho及氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA、SOD、GSH-Px、AOPP，采用ASO-900系列全自動(dòng)生化檢測(cè)儀(南京伯斯金生物科技有限公司)檢測(cè)微炎癥狀態(tài)指標(biāo)IL-18、hs-CRP、IL-6及eGFR，試劑盒均購(gòu)自羅氏檢測(cè)公司。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清Klotho、IL-18、hs-CRP、IL-6水平比較 CKD組2～3期、4～5期患者血清Klotho水平均低于對(duì)照組(P均<0.05)，血清IL-18、hs-CRP、IL-6水平均高于對(duì)照組(P均<0.05)；CKD組4～5期患者血清Klotho水平低于2～3期(P<0.05)，血清IL-18、hs-CRP、IL-6水平均高于2～3期(P均<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清Klotho、IL-18、hs-CRP、IL-6水平比較

2.2 兩組血清MDA、SOD、GSH-Px、AOPP及eGFR水平比較 CKD組2～3期、4～5期患者血清SOD、GSH-Px水平及eGFR均低于對(duì)照組(P均<0.05)，血清MDA、AOPP水平均高于對(duì)照組(P均<0.05)；CKD組4～5期患者血清SOD、GSH-Px水平及eGFR均低于2～3期(P均<0.05)，血清MDA、AOPP水平高于2～3期(P均<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組血清MDA、SOD、GSH-Px、AOPP及eGFR水平比較

2.3 CKD組血清Klotho、微炎癥狀態(tài)、氧化應(yīng)激指標(biāo)與腎功能的關(guān)系 CKD組血清Klotho、SOD、GSH-Px與患者eGFR呈正相關(guān)(r分別為0.621、0.622、0.553，P均<0.05)，MDA、AOPP、IL-18、hs-CRP、IL-6與eGFR呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.416、-0.639、-0.517、-0.556、-0.485，P均<0.05)。

3 討論

CKD的長(zhǎng)期發(fā)生發(fā)展，可促進(jìn)多器官功能障礙，導(dǎo)致臨床上不良臨床結(jié)局事件的發(fā)生[6]。目前，臨床上CKD的總體治療有效率較低。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，血清IL-18、hs-CRP、IL-6上升程度與基底膜細(xì)胞的通透性或?yàn)V過(guò)功能的下降程度相關(guān)，提示微炎癥狀態(tài)在誘導(dǎo)腎臟基底膜細(xì)胞或腎小球細(xì)胞凋亡或損傷過(guò)程中發(fā)揮重要作用[7,8]。Klotho能維持腎小管遠(yuǎn)端結(jié)構(gòu)對(duì)液體的重吸收功能，并能提高腎小球基底膜的完整性，改善其濾過(guò)功能[9,10]；近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，MDA、SOD、GSH-Px等氧化應(yīng)激指標(biāo)在慢性炎癥性疾病或自身免疫性疾病發(fā)生中發(fā)揮了一定作用，但在CKD患者血清中的研究不足。部分相關(guān)研究探討了細(xì)胞炎癥因子如IL-18、hs-CRP、IL-6等在CKD中的異常變化，但缺乏對(duì)血清Klotho水平的分析，并且缺乏對(duì)于CKD不同病情中各指標(biāo)的差異性研究。

本研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組比較，CKD組患者血清Klotho水平下降，而血清IL-18、hs-CRP、IL-6水平上升；同時(shí)，與CKD早期(2～3期)患者比較，中晚期(4～5期)患者血清Klotho水平下降，而血清IL-18、hs-CRP、IL-6水平上升。血清Klotho水平降低，可失去其對(duì)腎臟間質(zhì)成分及細(xì)胞組織的保護(hù)作用，導(dǎo)致間質(zhì)成分纖維化或脂肪化等病理改變的發(fā)生；血清IL-18、hs-CRP、IL-6水平上升，則可激活瀑布炎癥反應(yīng)因子，加劇炎癥信號(hào)通路激活所致的腎臟組織炎性損傷。林書(shū)典、林文軍等[11,12]研究發(fā)現(xiàn)，終末期CKD患者血清Klotho水平均下降25%以上，且患者腎功能損傷越明顯，血清中炎癥因子指標(biāo)下降越嚴(yán)重。SOD、GSH-Px是還原型化合物，可抑制氧化反應(yīng)過(guò)程中過(guò)度的氧自由基或其他離子基團(tuán)的激活，能夠保護(hù)腎臟上皮組織細(xì)胞的完整性，增強(qiáng)患者腎臟組織的保護(hù)性作用。本研究結(jié)果顯示，CKD患者血清SOD、GSH-Px水平下降，且患者病情進(jìn)展越嚴(yán)重，血清中各指標(biāo)下降越明顯，提示SOD、GSH-Px等與CKD患者的病情密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，CKD組2～3期、4～5期患者血清MDA、AOPP均高于對(duì)照組，且4～5期患者血清MDA、AOPP高于2～3期。MDA與腎小球基底膜組織中蛋白結(jié)構(gòu)成分的改變有關(guān)[13]，而AOPP與腎小球基底膜基質(zhì)成分的增生及硬化性改變有關(guān)[14]。本研究發(fā)現(xiàn)，CKD組血清Klotho、SOD、GSH-Px與患者eGFR呈正相關(guān)，血清MDA、AOPP、IL-18、hs-CRP、IL-6與eGFR呈負(fù)相關(guān)，說(shuō)明血清Klotho、微炎癥狀態(tài)、氧化應(yīng)激指標(biāo)與腎功能具有密切關(guān)系。這提示臨床上可以通過(guò)檢測(cè)這些指標(biāo)的變化，進(jìn)而評(píng)估CKD患者的腎功能。

綜上所述，CKD患者隨著病情分級(jí)增加，其血清Klotho、抗氧化指標(biāo)及腎功能降低，微炎癥狀態(tài)、過(guò)氧化指標(biāo)升高；CKD患者血清微炎癥狀態(tài)、過(guò)氧化指標(biāo)與腎功能呈負(fù)相關(guān)，血清Klotho、抗氧化指標(biāo)與腎功能呈正相關(guān)。