閆敢，李明，周蓓蓓

盱眙縣人民醫(yī)院病理科，江蘇盱眙 211700

正常情況下，人體胸腹腔臟器間存在少量液體發(fā)揮潤滑作用，但受疾病因素影響，胸腹腔液體增多或臟層膜吸收液體速率下降，即可導(dǎo)致胸腹腔液體積存，形成胸腹水[1]。依據(jù)病因不同，胸腹水可分為良性和惡性兩種，不同病理類型的胸腹水臨床治療及預(yù)后存在差異，因此，準確鑒別胸腹水性質(zhì)，對臨床制定治療方案、評價療效具有重要指導(dǎo)意義[2]。薄層液基細胞學檢測（TCT）是近年婦科臨床廣泛應(yīng)用的細胞學診斷技術(shù)，標本滿意度高，但在非婦科領(lǐng)域的應(yīng)用尚存在爭議。胸腹水脫落細胞具有確診意義，為薄層液基細胞學檢測的應(yīng)用提供了可能[3]。文章現(xiàn)以2017年1月—2018年1月該院605份胸腹水標本為例，對薄層液基細胞技術(shù)診斷胸腹水癌細胞的臨床效果進行分析探討，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以該院臨床科室送檢的605份可疑惡性胸腹水標本為研究對象。納入標準：①同時以液基細胞涂片和傳統(tǒng)涂片進行細胞組織學檢查的胸腹水標本；②陽性病例有內(nèi)窺鏡、穿刺活檢或手術(shù)病理對照；③患者知情同意；④倫理委員會批準同意。排除標準：標本對應(yīng)臨床及病理資料不全。胸腹水標本類型：胸水標本377例，腹水標本228例。標本來源：主要來自腫瘤科、呼吸科、消化科、胸外科、婦科具有胸腹水癥狀的患者。

1.2 方法

1.2.1 標本采集與處理 全部患者均基于超聲引導(dǎo)技術(shù)行腹腔或胸腔穿刺，負壓吸引抽取胸腹水標本。標本保存于專用清潔容器內(nèi)，一般標本量在200 mL以上。為防止細胞變性凝結(jié)或細菌破壞溶解，樣本獲取后加入EDTA抗凝，即刻送檢實驗室。實驗室收到標本后，立即采集細胞，進行細胞學檢查。

1.2.2 液基薄層涂片細胞學檢查 實驗室內(nèi)，將新鮮的胸腹水充分振蕩，取15 mL標本置于試管中，上機離心5 min，離心速率2 000 r/min。去上清液，加入約細胞團體積3倍的液基細胞保存液（備案號:鄂孝械備 20140008 號/執(zhí)行標準:YZB/鄂孝 0231-2010），充分振蕩混勻。從試管中吸取適量細胞懸液，于載玻片偏右側(cè)端垂直滴1～2滴，以推片用30°夾角將玻片上檢液向左推，完成涂片制備，涂片直徑約為1.5 cm。待涂片自然干燥后，95%乙醇固定30 min，以保持細胞自然形態(tài)，隨后常規(guī)HE染色，中性樹膠封固，顯微鏡下觀察。

1.2.3 傳涂片細胞學檢查 實驗室內(nèi)，將新鮮的胸腹水充分振蕩，取20 mL標本置于離心管內(nèi)，上機離心10 min，離心速率2 000 r/min。去上清液，取沉淀物直接涂抹于干凈載玻片上，95%乙醇固定后HE染色，常規(guī)光鏡診斷。

1.3 觀察指標與評價標準

由同一組細胞學專家對兩種涂片進行鏡下觀察，對比觀察兩種涂片胸腹水癌細胞的檢出情況。結(jié)果判定采用三級診斷法，具體如下：①陽性表達（確診惡性）：10%以上靶細胞可見棕褐色或黃褐色顆粒，定位清晰；②陰性表達（確診良性）：細胞完全不著色；③可疑陽性（可疑惡性）：細胞著色，但效果未至陽性表達，介于兩者之間。

1.4 統(tǒng)計方法

以SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率（%）表示，行 χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

統(tǒng)計結(jié)果顯示，605份胸腹水標本液基薄層涂片細胞學檢查檢出癌細胞96份，檢出率15.86%，傳統(tǒng)涂片細胞學檢查檢出癌細胞77份，檢出率12.73%，比較差異有統(tǒng)計學意義，見表1。胸腹水液基薄層涂片與傳統(tǒng)涂片陽性表達見圖1、圖2。

表1 兩種標本涂片胸腹水癌細胞檢出情況比較[n（%）]

圖1 胸腹水液基薄層涂片鏡下陽性表達

圖2 胸腹水傳統(tǒng)涂片鏡下陽性表達

3 討論

超薄液基細胞技術(shù)是一種改良細胞學制片技術(shù)，能通過技術(shù)處理去除涂片上的雜質(zhì)，直接制成清晰可觀的薄層涂片，使觀察更容易，既往廣泛用于宮頸病變臨床篩查中，普遍獲得比傳統(tǒng)涂片理想的診斷效果[4]。

近年來，薄層液基細胞技術(shù)開始用于尿液、痰液、胸腹水等非婦科領(lǐng)域脫落細胞的臨床診斷中，在疾病定性診斷中發(fā)揮了重要作用[5]。既往，臨床診斷胸腹水采用傳統(tǒng)涂片，其應(yīng)用雖具有排列方式及背景的優(yōu)勢，但樣本內(nèi)?；煲源罅垦仔詽B出物、紅細胞及粘液等，且標本薄厚不一，鏡下觀察細胞多層重疊嚴重，陽性細胞常被覆蓋，導(dǎo)致結(jié)構(gòu)不清，在很大程度增加了閱片的困難度，影響診斷準確性[6-7]。液基薄層涂片操作簡單、快捷，細胞收集率高，一次標本收集可制成多張涂片，重復(fù)性高[8]，而且試劑盒中固定液能去除標本中紅細胞碎片及其他雜質(zhì)成分，經(jīng)HE染色后，無紅細胞干擾，背景清晰，細胞結(jié)構(gòu)完整，染色鮮艷，能有效克服傳統(tǒng)涂片細胞不均、偶然性強的不足，有助于單個細胞鏡下觀察，提高診斷準確率[9]。該次臨床研究結(jié)果顯示，液基薄層涂片細胞學檢查癌細胞檢出率（15.86%）高于傳統(tǒng)涂片（12.73%），與文獻報道的液基薄層涂片惡性胸腹水檢出率（14.76%）高于普通涂片（10.82%）的研究結(jié)論一致[10]，肯定了薄層涂片用于胸腹水定性診斷中的作用優(yōu)勢。

但值得注意的是，液基薄層涂片對腫瘤細胞較少或存在反應(yīng)性間皮細胞等疑難病例較難確診，雖然可行免疫細胞化學染色，但非特異性著色較多，陽性區(qū)域不易確定[11]。另外，液基薄層涂片制作過程中振蕩、離心、混勻等步驟會破壞原有癌細胞團的細胞排列方式，故在肝腹水癌細胞原發(fā)部位推斷方面存在一定局限性[12]。由此可見，兩種涂片各有優(yōu)勢及不足，建議臨床檢測胸腹水癌細胞時，兩種同時制片，對于液基薄層涂片陽性表達而傳統(tǒng)涂片未見典型癌細胞者，則重留標本，復(fù)查傳統(tǒng)涂片，以進一步明確診斷。

綜上所述，超薄液基細胞技術(shù)是檢測胸腹水癌細胞的有效手段，薄層涂片能獲得優(yōu)于傳統(tǒng)涂片的診斷效果，但仍有不足，建議聯(lián)合應(yīng)用以提高癌細胞檢出率，更好的為臨床提供指導(dǎo)。