范文成 王 棚 馮 霞 劉旭明艷 何小艷 陳素瓊

血站實(shí)驗(yàn)室對(duì)于不同血液檢測(cè)設(shè)備性能進(jìn)行對(duì)比是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理與控制的基本要求。我國(guó)《血站技術(shù)操作規(guī)程(2015年版)》[1]及《美國(guó)實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)法案修正案》[2]均明確規(guī)定:在血站實(shí)驗(yàn)室使用多臺(tái)儀器對(duì)同個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)前，需對(duì)儀器分析性能進(jìn)行確認(rèn)比較，以確保不同檢測(cè)設(shè)備檢測(cè)結(jié)果的可比性與溯源性。對(duì)于新購(gòu)入的儀器設(shè)備應(yīng)根據(jù)其分析類(lèi)型，確定性能參數(shù)后與原有儀器性能進(jìn)行對(duì)比分析。國(guó)外要求對(duì)血液檢測(cè)設(shè)備性能檢測(cè)每半年進(jìn)行一次，國(guó)內(nèi)則要求一年一次[3-5]。本研究遵循上述要求，對(duì)綿陽(yáng)市紅十字中心血站實(shí)驗(yàn)室的全自動(dòng)酶免分析儀及全自動(dòng)生化儀檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行對(duì)比，旨在為血站血液檢測(cè)設(shè)備性能對(duì)比提供參考。

1 材料與方法

1.1 FAME全自動(dòng)酶免后處理系統(tǒng)比對(duì)試驗(yàn)

1.1.1 儀器設(shè)備

Xantus150型全自動(dòng)加樣儀(深圳愛(ài)康)；2臺(tái)全自動(dòng)酶免分析后處理系統(tǒng)(FAME1620簡(jiǎn)稱(chēng)FAME1、FAME2420，簡(jiǎn)稱(chēng)FAME2，瑞士HAMILTON)。

1.1.2 試劑

(1)HBsAg ELISA試劑:①試劑1，北京萬(wàn)泰，批號(hào)為B20160408，質(zhì)控品為0.2 IU/ml，北京康徹斯坦，批號(hào)為201610025；②試劑2，BIO，批號(hào)為6B0209，質(zhì)控品為0.1 IU/ml，北京康徹斯坦，批號(hào)為201612009。

(2)抗-HCV ELISA試劑:①試劑1，北京萬(wàn)泰，批號(hào)為CS20160302，質(zhì)控品為0.05 NCU/ml，北京康徹斯坦，批號(hào)為201601103；②試劑2，Murex，批號(hào)為V929020，質(zhì)控品為2 NCU/ml，北京康徹斯坦，批號(hào)為201612021。

(3)抗-TP ELISA試劑:①試劑1，北京萬(wàn)泰，批號(hào)為N20160311，質(zhì)控品為6 mIU/ml，北京康徹斯坦，批號(hào)為201612016；②試劑2，珠海麗珠，批號(hào)為2016040508，質(zhì)控品為6 mIU/ml，北京康徹斯坦，批號(hào)為201611017。

(4)抗-HIV ELISA試劑:①試劑1，北京萬(wàn)泰，批號(hào)為H20160101，質(zhì)控品為0.5 NCU/ml，北京康徹斯坦，批號(hào)為201511025；②試劑2，BIO，批號(hào)為6B0351，質(zhì)控品為4 NCU/ml，北京康徹斯坦，批號(hào)為201511013。

1.1.3 試驗(yàn)標(biāo)本

室內(nèi)質(zhì)控22份，2015年室間質(zhì)評(píng)標(biāo)本16份，獻(xiàn)血者血液標(biāo)本50份。

1.1.4 試驗(yàn)方法

參照試劑說(shuō)明書(shū)及標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，采用同一臺(tái)全自動(dòng)加樣儀(Xantus 150)加樣，分別用2臺(tái)FAME、8種ELISA試劑檢測(cè)同樣的標(biāo)本88份，其中包括室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)本22份，2015年室間質(zhì)評(píng)標(biāo)本16份，獻(xiàn)血者標(biāo)本50份。計(jì)算22份室內(nèi)質(zhì)控的均值、標(biāo)準(zhǔn)差及變異系數(shù)。室間質(zhì)評(píng)和獻(xiàn)血者標(biāo)本結(jié)果應(yīng)用Kappa檢驗(yàn)，比較2臺(tái)全自動(dòng)酶免分析后處理系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果的一致性。

1.2 全自動(dòng)生化分析儀比對(duì)試驗(yàn)

1.2.1 儀器與試劑

(1)儀器設(shè)備。C311全自動(dòng)生化分析儀(德國(guó)羅氏)；B-480全自動(dòng)生化分析儀(深圳邁瑞)。

(2)ALT測(cè)定試劑盒(批號(hào)621149)及其質(zhì)控(低值質(zhì)控品批號(hào)、高值質(zhì)控品批號(hào)174794)(德國(guó)羅氏診斷有限公司)。

1.2.2 試驗(yàn)標(biāo)本

低值和高值室內(nèi)質(zhì)控品以及24份獻(xiàn)血者血液標(biāo)本。

1.2.3 試驗(yàn)方法

(1)選用ALT低值和高值質(zhì)控進(jìn)行常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控檢測(cè)，計(jì)算6個(gè)月的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，計(jì)算比對(duì)方差，確定檢測(cè)系統(tǒng)的不精密度，驗(yàn)證兩套全自動(dòng)生化分析儀的可比性[7]。

(2)常規(guī)使用羅氏C311檢測(cè)，每周使用邁瑞B(yǎng)-480檢測(cè)1次，檢測(cè)標(biāo)本8個(gè)，分析連續(xù)3周24個(gè)標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果，采用回歸分析2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀的檢測(cè)結(jié)果。

1.2.4 質(zhì)控方法

實(shí)驗(yàn)室室溫控制在18～25 ℃，濕度30%～70%，所有試劑在使用前均經(jīng)過(guò)30 min的平衡；抽取血液標(biāo)本后采用EDTA-K2進(jìn)行抗凝處理，以3000 r/min轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心15 min。設(shè)備均在校準(zhǔn)期內(nèi)，且運(yùn)行無(wú)異常。

2 結(jié)果

2.1 全自動(dòng)酶免后處理系統(tǒng)檢測(cè)性能比對(duì)

(1)2臺(tái)全自動(dòng)酶免后處理系統(tǒng)檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果。2臺(tái)全自動(dòng)酶免后處理系統(tǒng)使用8種ELISA試劑檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)本22份，2臺(tái)儀器批內(nèi)CV值均在15%以?xún)?nèi)，其各試劑檢測(cè)值均無(wú)顯著性差異，見(jiàn)表1。

(2)選取無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本50份、室間質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)本16份，使用2臺(tái)FAME全自動(dòng)酶免分析后系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，2臺(tái)儀器檢測(cè)結(jié)果均一致，見(jiàn)表2。

2.2 全自動(dòng)生化分析儀比對(duì)

2.2.1 質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果可比性分析

(1)收集2臺(tái)儀器近6個(gè)月的質(zhì)控品檢測(cè)數(shù)據(jù)，計(jì)算出m總和CV合并，分析不精密度，見(jiàn)表3。

表1 兩臺(tái)全自動(dòng)酶免后處理系統(tǒng)8種ELISA試劑檢測(cè)22份室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果

表2 兩臺(tái)全自動(dòng)酶免后處理系統(tǒng)檢測(cè)獻(xiàn)血者血液標(biāo)本以及室間質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)本比較

表5 兩臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀樣本檢測(cè)結(jié)果分析

表3 兩臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀不精密度分析

(2)以每個(gè)質(zhì)控品濃度水平的總均值m總×(1+20%)作為樣品濃度的選擇范圍，得到低值質(zhì)控濃度范圍為39.3～59.0 U/L，高值質(zhì)控濃度范圍為99.6～149.3 U/L。依照醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)定量檢驗(yàn)結(jié)果的可比性驗(yàn)證指南[8]確定低值質(zhì)控、高值質(zhì)控檢測(cè)重復(fù)次數(shù)各為3次，見(jiàn)表4。

表4 兩臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀樣本檢測(cè)結(jié)果

(3)根據(jù)低值、高值質(zhì)控均值得出極差和比對(duì)偏差，ALT的個(gè)體內(nèi)生物學(xué)變異為18%，故實(shí)驗(yàn)室將CV1的1/3，即6%作為分析質(zhì)量要求，小于分析質(zhì)量要求，結(jié)論為通過(guò)，見(jiàn)表5[9]。

通過(guò)計(jì)算，兩個(gè)濃度樣本的比對(duì)偏差分別為2.4%和1.74%，均在6%以?xún)?nèi)，故認(rèn)為2臺(tái)設(shè)備檢測(cè)結(jié)果符合檢測(cè)系統(tǒng)要求。

2.2.2 獻(xiàn)血者血液標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果對(duì)比

每周同時(shí)使用2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)8個(gè)標(biāo)本，連續(xù)3周共24個(gè)標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果，分析2臺(tái)設(shè)備的一致性，見(jiàn)表6。

以羅氏C311檢測(cè)結(jié)果為y，邁瑞B(yǎng)480檢測(cè)結(jié)果為x，做線性回歸計(jì)算，得出回歸方程 ，如圖1所示。

圖1 兩臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)24份獻(xiàn)血者ALT結(jié)果的回歸線性圖

3 討論

目前，全國(guó)大部分的血站實(shí)驗(yàn)室仍使用多套設(shè)備對(duì)輸血相關(guān)傳染病血清學(xué)標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)，且不同設(shè)備間?；閭溆肹10]。血站實(shí)驗(yàn)室工作強(qiáng)度大，設(shè)備長(zhǎng)時(shí)間的運(yùn)行其各部件老化程度不同，設(shè)備之間可能會(huì)出現(xiàn)差別，而導(dǎo)致不同設(shè)備之間檢測(cè)一致性不高，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性[11]。因此，在校準(zhǔn)周期內(nèi)對(duì)設(shè)備性能進(jìn)行確認(rèn)，同時(shí)進(jìn)行設(shè)備間性能對(duì)比是血站血液檢測(cè)質(zhì)量管理的重點(diǎn)。保證并保持實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測(cè)作用相同的自動(dòng)化設(shè)備性能的一致，是提高血液檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量的重要手段。

表6 兩臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)24份獻(xiàn)血者標(biāo)本的結(jié)果

根據(jù)上述質(zhì)控要求結(jié)合自身情況，本研究對(duì)2臺(tái)全自動(dòng)酶免分析后處理系統(tǒng)與2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀設(shè)計(jì)了定性與定量對(duì)比分析。設(shè)備性能是否一致主要通過(guò)檢測(cè)結(jié)果的一致性分析結(jié)果來(lái)體現(xiàn)，檢測(cè)結(jié)果的一致性主要受檢測(cè)設(shè)備、試劑、質(zhì)控品、試驗(yàn)標(biāo)本等的影響。全自動(dòng)酶免分析后處理系統(tǒng)性能對(duì)比，選取室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)本22份，結(jié)果顯示:2臺(tái)設(shè)備用室內(nèi)質(zhì)控做重復(fù)性檢測(cè)，均值接近，批內(nèi)變異系數(shù)均在15%以?xún)?nèi)，經(jīng)x2檢驗(yàn)，8種ELISA試劑的t值分別為:1.746、-1.903、2.113、0.816、2.273、-2.538、1.793以及1.442，P值均＞0.05，2臺(tái)FAME檢測(cè)的精密度好。16份已知檢測(cè)結(jié)果的室間質(zhì)評(píng)標(biāo)本，正確率均100%，做常規(guī)已知獻(xiàn)血者血液標(biāo)本的檢測(cè)時(shí)，2臺(tái)FAME的檢測(cè)結(jié)果一致，表明2臺(tái)設(shè)備用同一試劑的檢測(cè)性能一致。對(duì)于全自動(dòng)生化分析儀選擇6個(gè)月以上的室內(nèi)質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果對(duì)不精密度和檢測(cè)均值進(jìn)行分析，結(jié)果分別為2.4%和1.74%，均低于分析質(zhì)量要求(6%)，2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀均通過(guò)，24份獻(xiàn)血者標(biāo)本在2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀上的檢測(cè)結(jié)果經(jīng)回歸分析，兩者一致性為優(yōu)，可以認(rèn)為2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)ALT的結(jié)果符合檢測(cè)系統(tǒng)要求。

血站血液檢測(cè)設(shè)備性能對(duì)比應(yīng)注意的問(wèn)題:①設(shè)備應(yīng)處于校準(zhǔn)期內(nèi)且可正常運(yùn)行，試驗(yàn)過(guò)程中需要使用的器具應(yīng)保持清潔；②有適宜的質(zhì)控品。本研究所涉及的設(shè)備各2臺(tái)，故采用室間質(zhì)評(píng)標(biāo)本，若設(shè)備較多標(biāo)本量不夠時(shí)可選擇血清盤(pán)標(biāo)本作為質(zhì)控品[12]。

4 結(jié)語(yǔ)

設(shè)備間性能對(duì)比是一項(xiàng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鳎谠囼?yàn)方案設(shè)計(jì)、結(jié)果判斷及結(jié)論定論方面均需要有足夠的理論依據(jù)與數(shù)據(jù)支撐。通過(guò)對(duì)全自動(dòng)檢測(cè)設(shè)備性能對(duì)比，可有效保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，維護(hù)獻(xiàn)血者利益，保證患者用血安全，同時(shí)也為實(shí)驗(yàn)室間檢驗(yàn)結(jié)果互認(rèn)提供了可靠依據(jù)[13]。然而，本次開(kāi)展的設(shè)備間性能比對(duì)研究還有許多需要完善的地方。