李春艷

（合肥市第二人民醫(yī)院輸血科，安徽 合肥 230011）

新生兒溶血?。℉DN）是由于母嬰血型不合而引發(fā)的一種同族免疫性溶血性疾病。此病患兒可出現(xiàn)不同程度的黃疸、貧血和肝脾腫大等癥狀甚至發(fā)生死亡。據(jù)調(diào)查，在HDN患兒中，ABO-HDN患兒占85.3%[1]。研究發(fā)現(xiàn)，O型血孕婦血清IgG抗(A)B抗體的效價(jià)與ABO-HDN的發(fā)病率之間具有相關(guān)性。為了進(jìn)一步探討O型血孕婦血清IgG抗(A)B抗體的效價(jià)與ABO-HDN發(fā)病率的相關(guān)性，筆者進(jìn)行了本次研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究的對象是2015年6月至2017年6月期間合肥市第二人民醫(yī)院收治的400例O型血Rh陽性孕婦。這些孕婦丈夫的血型均非O型。這些孕婦的年齡為22～35歲，平均年齡為(26.83±6.21)歲；其孕周為35～41周，平均孕周為(38.79±2.58)周。

1.2 檢測方法

這些孕婦入院后，均采用微柱凝膠法檢測其血清IgG抗(A)B抗體的效價(jià)。具體的檢測方法是：分別在孕早期、孕中期、孕晚期采集這些孕婦3ml的空腹肘靜脈血。將采集到的靜脈血樣本放到37℃的環(huán)境中靜置30min。同時(shí)采集這些孕婦的丈夫2ml的空腹肘靜脈血，對采集到的靜脈血樣本進(jìn)行抗凝處理后，將其靜脈血樣本放到37℃的環(huán)境中保存以備用。將這些孕婦及其丈夫的血液樣本放到離心機(jī)中進(jìn)行3min的離心處理。離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為3000 r／min，離心半徑為8 cm。分別取這些孕婦150ml的血清樣本，在這些血清樣本中分別加入150ml濃度為18%的一巰基乙醇溶液，然后將這些血清樣本放到免疫微柱孵育器中孵育40min。使用生理鹽水對這些血清樣本進(jìn)行倍比稀釋。將這些孕婦的血清樣本混合液與生理鹽水制備成＜1∶64、1∶64、1∶128、1∶256及≥1∶512的稀釋液。嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作。取這些孕婦丈夫50ml的血清樣本，對其血清樣本進(jìn)行紅細(xì)胞沉淀處理。在得到的紅細(xì)胞中加入5ml的生理鹽水，制成5ml濃度為1%的紅細(xì)胞懸液。分別取這些孕婦丈夫的50ml濃度為1%的紅細(xì)胞懸液，將這些紅細(xì)胞懸液分別加入到凝膠卡中。分別取這些孕婦50ml不同稀釋濃度的血清倍比稀釋液。將這些血清倍比稀釋液加入到凝膠卡中，然后放到卡式孵育器(溫度為37℃)中孵育15min。先使用離心機(jī)對凝膠卡中的血清倍比稀釋液進(jìn)行離心處理170s（離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為900 r／min，離心半徑為8 cm），再以1500 r／min的速度對凝膠卡中的血清倍比稀釋液進(jìn)行離心處理3min。以有凝集現(xiàn)象的最高稀釋度為O型血孕婦血清IgG抗A(B)抗體的效價(jià)。

1.3 觀察指標(biāo)及診斷標(biāo)準(zhǔn)

1）統(tǒng)計(jì)這些孕婦血清IgG抗A(B)抗體的效價(jià)及其新生兒ABO-HDN的發(fā)病率。2）ABO-HDN陽性的診斷標(biāo)準(zhǔn)是：進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)、熱放散試驗(yàn)和游離抗體試驗(yàn)的結(jié)果中有兩項(xiàng)試驗(yàn)的結(jié)果呈陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件對本次研究中的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

檢測的結(jié)果顯示，在這些孕婦中，血清IgG抗A(B)抗體的效價(jià)＜1∶64孕婦的新生兒ABO-HDN的發(fā)病率最低（P＜0.05），血清IgG抗A(B)抗體的效價(jià)≥1∶512孕婦的新生兒ABO-HDN的發(fā)病率最高（P＜0.05）。詳情見表1。

表1 不同血清IgG抗(A)B抗體效價(jià)的O型血孕婦的新生兒ABO-HDN發(fā)病率的比較

3 討論

HDN是一種免疫性疾病。該病的發(fā)生可嚴(yán)重威脅新生兒的生命。當(dāng)母嬰出現(xiàn)ABO血型不合的情況時(shí)，胎兒體內(nèi)的紅細(xì)胞在進(jìn)入母體時(shí)，母體會(huì)產(chǎn)生抗胎兒紅細(xì)胞的抗體。這些抗體可經(jīng)過胎盤進(jìn)入到胎兒的體內(nèi)，從而破壞胎兒體內(nèi)的紅細(xì)胞，最終導(dǎo)致ABO-HDN的發(fā)生[2]。

IgM和IgG是兩個(gè)同種的免疫球蛋白。IgM抗體是人體自然產(chǎn)生的完全性抗體。該抗體無法通過胎盤進(jìn)入到胎兒的體內(nèi)。IgG抗體屬于不完全抗體。部分IgG抗體可經(jīng)過輸血和妊娠免疫刺激而生成。IgG抗體能夠通過胎盤進(jìn)入到胎兒的體內(nèi)，參與到胎兒機(jī)體的血液循環(huán)中，并可與胎兒血液中的紅細(xì)胞相結(jié)合，可破壞其血液中的紅細(xì)胞，從而誘發(fā)HDN[3]。當(dāng)孕婦血清IgG抗(A)B抗體的效價(jià)≥1∶64時(shí)，其新生兒HDN的發(fā)病率可顯著升高[4]。有研究者認(rèn)為，對于母體與胎兒出現(xiàn)ABO血型不合的情況但未引發(fā)HDN的孕婦，其體內(nèi)血清IgG抗A(B)抗體的效價(jià)較低，這些血型抗體難以通過胎盤進(jìn)入到胎兒的血液系統(tǒng)中，因此不會(huì)使胎兒機(jī)體出現(xiàn)溶血性損傷。但是，當(dāng)孕周＞20周的孕婦血清IgG抗A(B)抗體的效價(jià)＞1∶64時(shí)，臨床上應(yīng)予以高度的重視，督促此類孕婦定期接受相關(guān)檢查。當(dāng)O型血孕婦血清IgG抗A(B)抗體的效價(jià)＞1：256時(shí)，應(yīng)為其靜脈滴注維生素C、讓其服用茵陳蒿湯，必要時(shí)可對其進(jìn)行血漿置換治療，以防其新生兒罹患ABO-HDN[5]。

本次研究的結(jié)果證實(shí)，0型血孕婦血清IgG抗A(B)抗體的效價(jià)與ABO-HDN的發(fā)病率呈正相關(guān)。