程 延，趙曉蕓，全 健△，冉 磊，楊 健，竇群立，昝 強(qiáng)

1.陜西省中醫(yī)醫(yī)院骨傷二科(西安710003)，2.陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院骨傷科(咸陽(yáng)712000)

主題詞 股骨頭壞死 @祛瘀生新方 血液流變學(xué) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 兔

股骨頭缺血性壞死(Ischemic necrosis of the femoral head，INFH)是骨科常見(jiàn)的疾病之一，病因病機(jī)復(fù)雜，起病隱匿、緩慢且病程長(zhǎng)，該病引起關(guān)節(jié)疼痛和負(fù)重行走活動(dòng)受限，甚至導(dǎo)致殘廢，嚴(yán)重影響患者的工作和生活質(zhì)量。資料表明，非創(chuàng)傷性INFH病程中存在著血液流變學(xué)異常[1]和脂質(zhì)代謝紊亂[2]。祛瘀生新方是我院治療INFH的經(jīng)驗(yàn)方，具有破血行氣，散結(jié)止痛的功效，臨床應(yīng)用多年，療效顯著。本文通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察祛瘀生新方對(duì)家兔INFH血液流變學(xué)、血脂的影響，探討其治療INFH的作用機(jī)制。

材料與方法

1 藥物制備 祛瘀生新方由黃芪、桂枝、三棱、莪術(shù)、土貝母、制馬錢(qián)子等組成。水煎煮提取2次，第1次加 10 倍量水煎煮1 h，第2次加8倍量水煎煮1 h，合并2次煎出液，濃縮至所需濃度(1 ml藥液中含1 g生藥)作為供試樣品，密封備用。由陜西省中醫(yī)醫(yī)院中藥房、制劑中心提供，藥監(jiān)合格。

2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、造模及給藥 健康家兔36只，雌雄不分，體重為(2.5±0.25)kg，由陜西中醫(yī)藥大學(xué)提供。采用抽簽法將36只家兔隨機(jī)分為3組：空白對(duì)照組(A組)、模型組(B組)、祛瘀生新方組(C組)，每組12只，每次實(shí)驗(yàn)前均稱(chēng)重。各組動(dòng)物在同一條件下單籠飼養(yǎng)，普通飼料喂養(yǎng)，自由飲水，自然光照，定期逐個(gè)清潔籠具，室溫19℃～24℃，相對(duì)濕度約40%。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后造模。

A組不造模，作為對(duì)照。B組、C組采用高根德[3]等給家兔臀部肌肉注射醋酸潑尼松龍注射液的方法造模，每次12.25 mg/kg，每周1次，共8周，同時(shí)肌注青霉素8萬(wàn)U/只，每周1次，以預(yù)防感染。8周后B、C組隨機(jī)處死1只，取材做病理切片顯示造模成功后，第9周開(kāi)始，A組和B組以生理鹽水5 ml/kg體重灌胃飼養(yǎng)，C組以祛瘀生新方(每ml藥液含1 g生藥)5 mg/kg體重灌胃喂養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)持續(xù)12周。

3 指標(biāo)檢測(cè) 治療前和治療后第4周、8周、12周，靜脈取血，按要求進(jìn)行血液流變學(xué)(LBV、HBV、PV、HCT、AI)檢測(cè)；按50 U/kg自耳緣靜脈肝素鈉稀釋液，15 min后自耳緣靜脈取血5 ml，離心15 min，取上清液檢測(cè)血脂(TG、TC、LDL、HDL)含量。操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有資料采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理。數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

造模后用藥前，與A組比較，B、C組家兔血液流變學(xué)指標(biāo)、血脂(TG、TC、LDL)含量均升高，HDL含量降低(P<0.01)，但B、C組間比較，以上指標(biāo)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，B組較A組家兔血液流變學(xué)指標(biāo)、血脂(TG、TC、LDL)含量均明顯升高(P<0.05)，HDL含量減少(P<0.05)；C組較B組家兔血液流變學(xué)指標(biāo)、血脂(TG、TC、LDL)含量均降低(P<0.05)，HDL含量增高(P<0.05)，而B(niǎo)組與A組比較，差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表明祛瘀生新方有改善血液流變學(xué)狀態(tài)、調(diào)節(jié)血脂的作用(表1～4)。

表1 造模后給藥前各組家兔血液流變學(xué)檢測(cè)

注：與A組比較，*P<0. 01；與B組比較，△P<0.05

表2 給藥后4周各組家兔血液流變學(xué)檢測(cè)

注：與A組比較，*P<0. 01，△P<0.05；與B組比較，#P<0.05

表3 給藥第8周各組家兔血液流變學(xué)檢測(cè)

注：與A組比較，*P<0. 01，△P<0.05；與B組比較，#P<0.05

表4 給藥12周各組家兔血液流變學(xué)檢測(cè)

注：與A組比較:*P<0. 01，△P<0.05；與B組比較:#P<0.05

討 論

INFH屬中醫(yī)“骨痹”、“骨蝕”等病癥范疇，研究表明，其基本病理過(guò)程是骨內(nèi)循環(huán)障礙，辨證屬“血瘀”，同時(shí)伴有骨質(zhì)疏松改變，所以腎氣衰微、寒從中生也是其病機(jī)的重要方面[4]?！夺t(yī)林改錯(cuò)》說(shuō)：“元?dú)饧忍?，秘不能達(dá)于血管，血管無(wú)氣，必停留為瘀”，說(shuō)明“腎虛”與“血瘀”關(guān)系密切，證屬虛實(shí)夾雜，治療應(yīng)以“補(bǔ)虛泄實(shí)”為準(zhǔn)則。以此為依據(jù)，我們用三棱、莪術(shù)、土貝母、制馬錢(qián)子“破血散結(jié)為攻”，以黃芪、桂枝“補(bǔ)氣溫經(jīng)為補(bǔ)”，組祛瘀生新方，臨床應(yīng)用20余年，療效顯著?，F(xiàn)代藥理研究顯示，方中三棱含有黃酮類(lèi)、揮發(fā)油類(lèi)等成分，具有較強(qiáng)的抗血小板聚集、抗血栓和鎮(zhèn)痛等作用；馬錢(qián)子可誘導(dǎo)骨折局部骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)合成，使BMP 峰值提前，促進(jìn)骨折愈合，提高愈合質(zhì)量，有引導(dǎo)藥物的“靶向”作用；三棱、莪術(shù)相須為用，與黃芪、桂枝配合，亦攻亦補(bǔ)，共奏“破血行氣、散結(jié)止痛”之功效。

資料證實(shí)，血液流變學(xué)改變?cè)诠莻萍膊“l(fā)生、發(fā)展和治療中起重要作用[5]。INFH病程中存在血脂代謝紊亂，在激素性INFH尤為明顯[6-7]。因血液流變學(xué)和血脂異常導(dǎo)致的高黏滯血癥等使血小板聚集，紅細(xì)胞變形性下降，形成微小血栓，加重瘀滯，股骨頭局部缺血、缺氧，最終股骨頭壞死[8]。研究表明，通過(guò)應(yīng)用破瘀通絡(luò)[9]、益腎活血化瘀[1，4，10]中藥及回醫(yī)烙灸療法[11]而改善和調(diào)整異常的血液流變學(xué)和血脂狀態(tài)，對(duì)抑制INFH發(fā)生和發(fā)展有一定的治療和預(yù)防作用。HL是體內(nèi)脂質(zhì)代謝的關(guān)鍵酶之一，對(duì)控制TG、TC含量，維持HDL正常水平起重要作用[12-13]。INFH的產(chǎn)生可能與機(jī)體內(nèi)HL活性下調(diào)有關(guān)，即HL活性下降出現(xiàn)血脂代謝紊亂，骨壞死改變明顯；活性上調(diào)則這種改變減輕。給予HL活性增強(qiáng)劑可以改善血脂紊亂狀態(tài)，并可以改善骨壞死的程度，延緩其進(jìn)程。但HL活性增高對(duì)生理狀態(tài)下正常血脂含量不起作用[14-15]。

本研究顯示，與空白對(duì)照組(A組)和模型組(B組)比較，祛瘀生新方組(C組)能使血液流變學(xué)指標(biāo)及血脂中甘油三脂、總膽固醇、低密度脂蛋白含量均降低，高密度脂蛋白含量增高(P<0.05)，說(shuō)明該方可降低全血黏度和血漿黏度，降低血脂中甘油三脂、總膽固醇、低密度脂蛋白含量，提高高密度脂蛋白含量，進(jìn)而增加血流速度、血流量，改善微循環(huán)，糾正脂質(zhì)代謝紊亂，減少血管壁損傷和動(dòng)脈硬化等，為壞死骨吸收及新骨生成、修復(fù)提供良好條件。祛瘀生新方治療INFH的機(jī)制可能與改善血液流變學(xué)狀態(tài)、調(diào)節(jié)血脂有關(guān)。