南 灃，王 影，張 丹，米 欣

（陜西省商洛市藥品檢驗(yàn)所，陜西 商洛 726000）

在藥品檢驗(yàn)中，一般要對(duì)固體制劑進(jìn)行預(yù)處理，即將藥品待測(cè)成分溶解出來(lái)，處理中常常提到“振搖使溶解”[1]，表述含糊不清。不同的實(shí)驗(yàn)人員會(huì)選擇不同的溶解方法，通常采用超聲處理、手動(dòng)振搖與調(diào)速震蕩3種方法[2－5]。超聲處理法（1 法）是指用頻率為 20～50 kHz的電磁波處理樣品，能讓樣品和溶劑產(chǎn)生聲波空化作用，在氣泡形成、體積增大且破裂的過程中，樣品能充分?jǐn)U散到溶劑中，均勻分布，從而達(dá)到充分溶解樣品的作用，且不影響大多數(shù)藥物有效成分的生理活性[6－11]。調(diào)速震蕩法（2法）是振蕩頻率為0～320 r/min，振幅為20 mm，電機(jī)功率為60 W，具有受力均勻、節(jié)省能源、操作簡(jiǎn)便、噪音小的優(yōu)點(diǎn)。手動(dòng)振搖法（3法）是指通過用手的振動(dòng)充分搖勻，能使樣品充分溶解而不破壞樣品，使有效成分分離出來(lái)的溶解方法。本研究中探討了藥品檢驗(yàn)時(shí)3種藥物溶解方法對(duì)樣品含量測(cè)定結(jié)果的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UV－2600型紫外分光光度計(jì)（日本島津有限公司）；BT125D型電子分析天平（賽多利斯科學(xué)儀器公司）；AS7240A型超聲溶解儀（天津奧特賽恩斯儀器有限公司）；HY－2型調(diào)速多用振動(dòng)儀（國(guó)華電器有限公司）；1260型高效液相色譜儀（安捷倫科技有限公司）；1HP－10－H型實(shí)驗(yàn)用超純水機(jī)（重慶力德高端水處理設(shè)備研發(fā)有限公司）。

1.2 試藥

鹽酸二甲雙胍對(duì)照品（批號(hào)為1000664－201203，含量 100.0%），硝苯地平對(duì)照品（批號(hào)為 100338－201104，含 量 99.9% ），氫 氯 噻 嗪對(duì) 照 品 （批 號(hào) 為100309 －201204，含量 99.7%），均購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院；鹽酸二甲雙胍片（規(guī)格為每片0.25 g），維生素B1片（規(guī)格為每片10 mg），硝苯地平片（規(guī)格為每片10 mg），氫氯噻嗪片（規(guī)格為每片25 mg），廠家與批號(hào)見表 1；甲醇（色譜純，批號(hào)為 34860－4L－R），乙腈（色譜純，批號(hào)為 34851－4L），均購(gòu)于 Sigma－Aldrich公司；鹽酸（分析純，四川西隴化工有限公司，批號(hào)為150608）；水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品處理及含量測(cè)定方法[1]

鹽酸二甲雙胍片：精密稱取樣品（批號(hào)分別為C0120160510，C0120151219，160326），分別置 100 mL容量瓶中，加水適量，超聲使鹽酸二甲雙胍溶解，用水稀釋至刻度，精密量取續(xù)濾液1 mL，置200 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液A。另精密稱取鹽酸二甲雙胍對(duì)照品，加水溶解并定量稀釋成每1 mL約含5 μg的對(duì)照品溶液。照紫外－可見分光光度法（藥典通則0401），在233 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。

維生素B1片：精密稱取樣品（批號(hào)分別為170305，G161101，170102），分別置 100 mL 容量瓶中，加鹽酸溶液（9→1 000）約 70 mL，使溶解，精密量取 5 mL，置100 mL容量瓶中，用上述溶液稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液B。照紫外－可見分光光度法（藥典通則0401）在246 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按C12H17ClN4OS·HCl的吸收系數(shù)為421計(jì)算。

硝苯地平片：避光操作，精密稱取樣品（批號(hào)分別為120803，C120903，130403），分別置 50 mL 容量瓶中，加甲醇適量，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取5 mL置50 mL容量瓶，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液C。另取硝苯地平對(duì)照品，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋成每1 mL約含20 μg的對(duì)照品溶液。照高效液相色譜法（藥典通則0512）測(cè)定硝苯地平含量。

氫氯噻嗪片：精密稱取樣品（批號(hào)分別為B130304，13011412，130301），分別置100 mL容量瓶中，加甲醇－乙腈（1 ∶1）5 mL，振搖，加流動(dòng)相 20 mL，超聲使溶解，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取續(xù)濾液5 mL，置20 mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液D。另取氫氯噻嗪對(duì)照品，同法制備對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。照高效液相色譜法（藥典通則0512）測(cè)定氫氯噻嗪含量。

2.2 高效液相色譜法色譜條件

2.2.1 硝苯地平片

色譜柱：C18柱（250 mm ×4.6 mm，10 nm/5 μm）；流動(dòng)相：甲醇 －水（60 ∶40）；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：235nm；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：20 μL。色譜圖見圖 1。

2.2.2 氫氯噻嗪片

色譜柱：C18柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：0.1 mol/L磷酸鈉二氫鈉（用磷酸調(diào)節(jié)pH至3.0）－乙腈（9 ∶1）；流速：1.5 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：271 nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL。色譜圖見圖 1。

2.3 藥物溶解時(shí)間

本試驗(yàn)對(duì)前處理時(shí)間進(jìn)行了考察。供試品溶液A和供試品溶液B經(jīng)3種方法各處理溶解15 min，供試品溶液C經(jīng)3種方法各處理溶解10min，供試品溶液D經(jīng)3種方法各處理溶解5min。

2.4 含量測(cè)定結(jié)果

結(jié)果見表1。其中，鹽酸二甲雙胍片、維生素B1片、硝苯地平片、氫氯噻嗪片標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定含量分別為95.0%～105.0%，90.0% ～110.0%，90.0% ～110.0%，93.0% ～107.0%。

3 討論

3.1 溶解因素分析

試驗(yàn)結(jié)果表明，溶解樣品方法的選擇對(duì)含量測(cè)定結(jié)果有一定影響，鹽酸二甲雙胍片和維生素B1片采用紫外可見分光光度法，氫氯噻嗪片和硝苯地平片采用高效液相色譜法，結(jié)果含量測(cè)定結(jié)果為1法＞2法＞3法，表明超聲處理法溶解樣品效果最好，含量測(cè)定結(jié)果較高。

圖1 高效液相色譜圖

表1 3種方法含量測(cè)定結(jié)果（%）

3.2 溶解方法比較[4-15]

超聲處理法是利用超聲波，將原本是大分子的藥物通過物理方法將其打散，然后再將藥物聚在一起，使其成為小顆粒，比表面積呈幾何倍數(shù)增大，溶解速率較快，純物理方法不會(huì)改變?cè)瓉?lái)的溶解度，只是加速溶解，可縮短幾倍甚至幾十倍的時(shí)間。調(diào)速振動(dòng)法是通過調(diào)節(jié)調(diào)速震蕩儀的速度和頻率在連續(xù)往復(fù)振蕩工作中平穩(wěn)可靠，上下振蕩、左右振蕩、回旋振蕩使樣品充分溶解并混合均勻，具有操作簡(jiǎn)便、噪音小、受力均勻，節(jié)省能源的優(yōu)點(diǎn)。手動(dòng)振搖法是通過手動(dòng)振搖將藥物溶解，雖操作簡(jiǎn)單，但對(duì)于本身較難溶解的藥物，溶出量相對(duì)有限，存在費(fèi)時(shí)費(fèi)力、溶解效率低、易漏液、振搖速度不均勻等缺點(diǎn)。

3.3 建議

超聲處理法作為樣品檢測(cè)前處理方法，可大大加快溶出速率，使溶液在短時(shí)間內(nèi)達(dá)到飽和，不僅提高了藥物有效成分的提取率，更能均勻地溶解待測(cè)樣品，具有安全高效、溶解快速、混合均勻的特點(diǎn)。故建議，若無(wú)特殊規(guī)定，可采用超聲處理法進(jìn)行樣品溶解。