裴河歡 ，謝練武 ，朱開(kāi)昕 ，蘇本偉 ，趙明惠 ，張美鳳

（1.廣西壯族自治區(qū)欽州市中醫(yī)藥研究所，廣西 欽州 535000； 2.廣西壯族自治區(qū)欽州市中醫(yī)醫(yī)院，廣西 欽州535000； 3.廣西壯族自治區(qū)欽州市第一人民醫(yī)院，廣西 欽州 535000）

桑寄生是我國(guó)傳統(tǒng)常用中藥材，藥材原植物為桑寄生科鈍果寄生屬?gòu)V寄生Taxillus chinensis（DC.）Danser的帶葉莖枝[1]，具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕、安胎元的功用，用于風(fēng)濕痹痛、腰膝酸軟、筋骨無(wú)力、崩漏經(jīng)多、妊娠漏血、胎動(dòng)不安、高血壓等癥。廣寄生屬半寄生性植物，在野生狀態(tài)下，廣寄生與桑寄生科其他植物一樣主要以鳥(niǎo)媒進(jìn)行傳播[2－3]。種子是農(nóng)業(yè)最基本、最重要的生產(chǎn)資料[4]。隨著對(duì)外貿(mào)易的快速增長(zhǎng)及桑寄生臨床治療制劑開(kāi)發(fā)范圍的擴(kuò)大，人們對(duì)桑寄生的需求日益增大，而野生桑寄生越來(lái)越難以滿(mǎn)足人們醫(yī)療保健的需要。加上國(guó)內(nèi)對(duì)桑寄生的野生資源保護(hù)不夠重視，其被過(guò)度采伐，致使資源快速枯竭，分布面積越來(lái)越少，故有必要開(kāi)展人工繁育與種植，以填補(bǔ)桑寄生藥材的大量缺口。種子是所有植物生產(chǎn)的物質(zhì)基礎(chǔ)[5]，桑寄生人工繁育與種植都是依靠種子繁殖，桑寄生種子質(zhì)量的好壞是影響其種子萌發(fā)、生子發(fā)育及其藥材質(zhì)量的重要因素。目前對(duì)桑寄生化學(xué)成分、藥理、臨床作用及相關(guān)臨床治療制劑開(kāi)發(fā)等方面已有不少研究，在此通過(guò)對(duì)桑寄生種子的研究進(jìn)行綜述，為桑寄生的人工栽培提供理論參考。

1 生物學(xué)特征

桑寄生科植物為半寄生性被子植物，有葉綠素，通過(guò)吸器與寄主植物連接，除了從寄主植物吸取水分與無(wú)機(jī)鹽等物質(zhì)外，自身能進(jìn)行光合作用，合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供桑寄生生長(zhǎng)[6－8]。吸器是聯(lián)系寄生植物與寄主的重要器官，圍繞吸器的組織形態(tài)、功能作用等進(jìn)行了大量研究[9－13]。吸器在組織結(jié)構(gòu)上由薄壁細(xì)胞和螺紋導(dǎo)管組成，除了執(zhí)行物質(zhì)的運(yùn)輸作用外，還具有旺盛的物質(zhì)合成功能。

桑寄生種子屬頑拗型植物種子[14]，具有不耐干燥、不耐低溫、壽命短暫等特征。種子無(wú)休眠期，一經(jīng)成熟即可萌發(fā)、生長(zhǎng)[15]。

桑寄生為多年生常綠小灌木，嫩枝、葉密被銹色星狀毛，老枝、葉無(wú)毛；小枝灰褐色，具細(xì)小皮孔。葉對(duì)生或近對(duì)生，厚紙質(zhì)，卵形至長(zhǎng)卵形，長(zhǎng)3～8 cm，寬2～5 cm，先端鈍圓，基部楔形或闊楔形，全緣，葉柄長(zhǎng)8～10 mm。傘形花序，1～2個(gè)腋生或生于小枝已落葉的腋部；具花1～4朵，通常2朵，花序和花被星狀毛，總花梗長(zhǎng)2～4 mm，花梗長(zhǎng) 6～7 mm；苞片鱗片狀，長(zhǎng)約 0.5 mm；花褐色，花托橢圓狀或卵球形，長(zhǎng)2 mm；副萼環(huán)狀；花冠花蕾時(shí)管狀，長(zhǎng)約3 mm，稍彎曲，小半部膨脹，頂部卵球形，裂片4枚，反折，匙型；雄蕊4，花絲長(zhǎng)約1 mm，花藥長(zhǎng)3 mm，藥室具橫隔；花柱線(xiàn)狀，柱頭頭狀，子房下位，1室。漿果，橢圓狀或近球形，表皮密生瘤狀突起，成熟果皮黃色，長(zhǎng) 8～10 mm，直徑 5～6 mm，果皮變平滑[15]。

2 資源分布及道地產(chǎn)區(qū)

桑寄生屬半寄生性植物，在我國(guó)主要分布于廣西、廣東、海南及福建南部，在廣西主要分布于桂南、桂中、桂東地區(qū)。筆者調(diào)查發(fā)現(xiàn)，桑寄生分布的海拔高度可高達(dá) 800 m[16]，與《中國(guó)植物志》[17]《中藥大辭典》[18]描述的分布于“海拔20～400米平原或低山常綠闊葉林中”有差異，可能與當(dāng)時(shí)的交通狀況較差有關(guān)，影響了其調(diào)查的廣度與深度，或者是桑寄生植物不斷擴(kuò)散的原因造成[16]。

桑寄生為廣西道地藥材[19]，藥用植物的道地性對(duì)藥用植物至關(guān)重要。道地藥材如果離開(kāi)了其原有的生長(zhǎng)環(huán)境，即使能生長(zhǎng)，長(zhǎng)成后其外形雖無(wú)明顯變化，但其內(nèi)在的有效含量即特有藥效比原來(lái)大大降低[20]。

3 采收與貯藏

當(dāng)漿果果皮呈現(xiàn)桑寄生果實(shí)成熟特有的黃色時(shí)，可分批采收。要求桑寄生種子當(dāng)天采集當(dāng)天接種[21]。對(duì)無(wú)法當(dāng)天接種完的種子，以果實(shí)形式貯藏，將果實(shí)平攤在竹制簸箕上，貯藏室內(nèi)溫度25℃，相對(duì)濕度85%以上，防止果實(shí)水分揮發(fā)，貯藏時(shí)間不宜超過(guò)4 d。

4 形態(tài)與結(jié)構(gòu)

成熟廣寄生種子呈長(zhǎng)橢圓形，長(zhǎng)約6 mm，最寬處直徑3 mm。顏色為淡綠色或淺褐色。由種皮、胚與胚乳3個(gè)部分構(gòu)成，種皮由外種皮與內(nèi)種皮構(gòu)成，內(nèi)種皮緊貼胚乳，外種皮骨質(zhì)化呈鱗片狀對(duì)內(nèi)種皮成半包裹狀態(tài)。胚乳乳白色，占種子體積的4/5，細(xì)胞內(nèi)充填大量的著色顆粒，可能為淀粉等一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，為胚的發(fā)育與種子萌發(fā)提供營(yíng)養(yǎng)。胚由分化成型的胚芽與呈圓球狀的“類(lèi)胚根”器官構(gòu)成，“類(lèi)胚根”為綠色，是分化形成廣寄生初生吸器的細(xì)胞組織。種孔直徑約0.3 mm[14]。

5 休眠與萌發(fā)

廣寄生種子屬頑拗性種子（recalcitrant seeds）類(lèi)型，具有不耐干燥、不耐低溫與壽命短暫等頑拗性種子的典型特征[22]。廣寄生種子不具休眠期，種子一經(jīng)成熟即可萌發(fā)。與肖來(lái)云等[23]報(bào)道的桑寄生科其他多種寄生植物種子無(wú)休眠期試驗(yàn)結(jié)果一致。廣寄生種子可不依賴(lài)寄主而獨(dú)立萌發(fā)，與肉蓯蓉等一些專(zhuān)寄性被子寄生植物種子需要來(lái)自寄主外感物質(zhì)誘導(dǎo)萌發(fā)的特性具有明顯區(qū)別[24－25]，這可能也是廣寄生具有廣寄生性特點(diǎn)的重要原因。在對(duì)廣西境內(nèi)廣寄生寄主分布狀況的調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，廣寄生涉及36個(gè)科150多種寄主植物[26]。種子培養(yǎng)溫度25℃，相對(duì)濕度90%，光照強(qiáng)度3 500 lx條件下，種子萌發(fā)時(shí)間約45 d。種子萌發(fā)時(shí)首先見(jiàn)“類(lèi)胚根”器官逐漸膨大從種孔“露頭”出來(lái)，“類(lèi)胚根”顏色為綠色，呈圓球狀，隨著“類(lèi)胚根”的進(jìn)一步膨大，初生吸器逐漸分化形成，同時(shí)芽也從種孔生長(zhǎng)出來(lái)[13]。正常性種子的萌發(fā)和休眠均取決于外界環(huán)境因子與種子本身特有的結(jié)構(gòu)、植物生長(zhǎng)激素和遺傳信息等[27]，此外，種子的萌發(fā)還與其內(nèi)部活性氧自由基（ROS）的含量和ROS清除系統(tǒng)的活性密切相關(guān)[28]。

6 種子健康

隨著國(guó)際市場(chǎng)的擴(kuò)大，種子攜帶病蟲(chóng)傳播和蔓延的機(jī)會(huì)也相應(yīng)增多；種子一旦傳入新區(qū)，將會(huì)給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成重大損失和災(zāi)難。因此，種子健康測(cè)定日益得到重視。很多國(guó)家種子檢驗(yàn)室開(kāi)展了種子健康測(cè)定，以滿(mǎn)足各國(guó)種子貿(mào)易的需要。種子健康測(cè)定是有效控制種子病蟲(chóng)害，提高種子產(chǎn)量和質(zhì)量的必要手段，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義[29]。廣寄生種植的主要蟲(chóng)害是桑天牛和桑寄生灰碟、紅肩粉碟幼蟲(chóng)等，其中桑天牛主要是對(duì)寄主桑樹(shù)產(chǎn)生危害，桑寄生灰碟和紅肩粉碟幼蟲(chóng)則是對(duì)廣寄生產(chǎn)生危害。對(duì)桑寄生主要采用人工捕捉或夜晚采用燈光誘捕，對(duì)桑寄生灰碟和紅肩粉碟，則視蟲(chóng)害狀況用40%樂(lè)果乳劑700～1 000倍液或80%敵敵畏1 000倍液交替噴殺[21]。

7 質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

桑寄生的人工種植是以種子為繁殖材料，但目前由于缺乏種子檢驗(yàn)規(guī)程和有效的管理，種子交易中劣質(zhì)種子坑農(nóng)事件時(shí)有發(fā)生，給藥農(nóng)帶來(lái)很大損失[30]。桑寄生生產(chǎn)一直面臨種質(zhì)混亂及由導(dǎo)致的藥材質(zhì)量和質(zhì)量參差不齊、穩(wěn)定性差等問(wèn)題。參照《國(guó)際種子檢驗(yàn)規(guī)程》（ISTA1996）[31]和 GB/T3543－1995 農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程，結(jié)合桑寄生種子的生理特性及不同來(lái)源種子的差異，對(duì)桑寄生種子的檢驗(yàn)方法及質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)種子的含水量是種子萌發(fā)影響關(guān)鍵因素，以新鮮度、萌發(fā)率、凈度、千粒重作為桑寄生種子分級(jí)的主要參考指標(biāo)，其中采摘后0～48 h，萌發(fā)率≥90%，凈度≥98%，千粒重≥40.0 g為一級(jí)。使用K聚類(lèi)分析方法，以?xún)舳?、發(fā)芽率、千粒重、鮮度指標(biāo)為劃分種子質(zhì)量級(jí)別的依據(jù)。凈度、發(fā)芽率、百粒重、鮮度各定1個(gè)指標(biāo)，得到桑寄生種子的2個(gè)等級(jí)的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，詳見(jiàn)表1。以此分得的等級(jí)比例合適，且能真實(shí)反映桑寄生種子的內(nèi)在品質(zhì)。其中，一項(xiàng)達(dá)不到一級(jí)指標(biāo)的降為二級(jí)，一項(xiàng)達(dá)不到二級(jí)指標(biāo)的即為不合格種子，詳見(jiàn)表2。

表1 桑寄生種子的質(zhì)量指標(biāo)

表2 桑寄生種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

8 繁育技術(shù)

8.1 果實(shí)的選擇及要求

選擇優(yōu)質(zhì)種源的成熟、新鮮、飽滿(mǎn)、無(wú)病蟲(chóng)害果實(shí)，盡量要求做到當(dāng)天采摘當(dāng)天接種，以保持種子的新鮮度和果膠黏性，接種前去果皮，保留果膠，利用果膠黏性對(duì)寄主進(jìn)行粘貼接種。

8.2 種子接種

接種種子的寄主枝（干）年限：寄主的生長(zhǎng)年限對(duì)桑寄生種子萌發(fā)率與成活率影響表現(xiàn)為隨著接種的寄主枝干的生長(zhǎng)年限的增長(zhǎng)桑寄生種子萌發(fā)率與成活率都明顯下降，以每組100粒種子作為試驗(yàn)，在1年生寄主枝（干）接種的桑寄生種子成活率為88%，萌發(fā)率為96%；在2年生寄主枝（干）接種的桑寄生種子成活率為70%，萌發(fā)率為81%。成活率的明顯差異可能與寄主枝干年限增長(zhǎng)枝干表皮老化栓皮層增厚而影響桑寄生種子吸器寄入直接相關(guān)。

接種部位：接種部位對(duì)桑寄生種子萌發(fā)率和成活率也存在影響，其中成活率影響明顯。接種在節(jié)間的種子（50粒）成活率和萌發(fā)率分別為84%和95%，要高于接種在節(jié)上（50粒）的21%和86%。節(jié)上接種種子成活率低可能與節(jié)處寄主表皮增厚木質(zhì)部結(jié)構(gòu)復(fù)雜有關(guān)，影響桑寄生吸器的寄入及吸器與寄主木質(zhì)部維管束的銜接。

接種方法：不同的接種方法對(duì)桑寄生種子的萌發(fā)率和成活率無(wú)明顯影響，但種孔朝上的萌發(fā)平均時(shí)間比種孔朝下的萌發(fā)平均時(shí)間要短，這可能與種子萌發(fā)早期種子萌出所接受到的光照有關(guān)，詳見(jiàn)表3。單棵寄主接種多粒桑寄生種子，要求種子間距離達(dá)30 cm以上。

接種數(shù)量：在桑寄生種苗繁育階段寄主桑同屬苗期，確保接種的桑寄生生長(zhǎng)發(fā)育的同時(shí)，將桑寄生生長(zhǎng)對(duì)寄主影響降至最低，以保證桑寄生生長(zhǎng)的同時(shí)，寄主保持旺盛長(zhǎng)勢(shì)是桑寄生種苗繁育成功與否的技術(shù)關(guān)鍵。因此，要求接種寄主具備一定的個(gè)體大小外，接種桑寄生種子數(shù)量亦不能超越寄主桑苗的承受負(fù)荷，造成寄主在種苗階段產(chǎn)生明顯弱勢(shì)，而接種桑寄生種子數(shù)量過(guò)少也影響桑寄生種植早期產(chǎn)量。對(duì)接種桑寄生種子不同數(shù)量對(duì)寄主桑苗生長(zhǎng)影響，以桑苗生長(zhǎng)高度為觀察指標(biāo)，選擇高度基本一致的桑苗為試驗(yàn)對(duì)象，接種后6個(gè)月對(duì)不同種子粒數(shù)桑苗高度進(jìn)行測(cè)量，并與沒(méi)接種任何桑寄生種子的桑苗進(jìn)行比較，結(jié)果見(jiàn)表4?？梢?jiàn)，單棵桑苗接種桑寄生種子數(shù)隨著粒數(shù)的增加，桑苗高度呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，單棵寄主接種桑寄生種子3粒以?xún)?nèi)為宜，超過(guò)4粒對(duì)寄主生長(zhǎng)將產(chǎn)生明顯影響。

表3 接種方法對(duì)桑寄生種子萌發(fā)的影響（n=30）

表4 接種不同數(shù)量的桑寄生種子對(duì)寄主桑苗生長(zhǎng)的影響

8.3 環(huán)境因子控制

環(huán)境因子中溫度、濕度是桑寄生大田育苗過(guò)程中對(duì)桑寄生種子萌發(fā)與成活率影響的敏感因子，特別是環(huán)境濕度，在秋季環(huán)境里氣候干燥，濕度較低。觀察采用塑料大棚調(diào)控溫、濕度與不加任何調(diào)控的自然狀態(tài)下的桑寄生種子萌發(fā)率與成活率狀況，大棚組溫度25～35℃、相對(duì)濕度85% ～90%，自然組溫度20～33℃、相對(duì)濕度75% ～85%，試驗(yàn)設(shè)計(jì)兩組寄主各350株，接種桑寄生種子兩組各1 000粒，結(jié)果大棚內(nèi)桑寄生種子萌發(fā)率為96%，種苗成活率為81%，而自然組桑寄生種子萌發(fā)率為68%，種苗成活率為60%。

9 展望

近年來(lái)，對(duì)桑寄生種子的研究雖已取得了一系列研究成果，但很多方面的研究并不是很清楚。頑拗性種子是種子科學(xué)研究領(lǐng)域的重要課題，目前仍存在眾多尚未攻克的難題[32]。因此，未來(lái)的工作將圍繞以下幾個(gè)方面進(jìn)行深入研究：桑寄生種子室溫保存最適含水量的研究；不同活力的桑寄生種子貯藏過(guò)程中活力變化規(guī)律；室溫貯藏、干燥器貯藏、冰箱貯藏過(guò)程中不同時(shí)期桑寄生種子活力變化規(guī)律；不同溫度貯藏過(guò)程中桑寄生種子萌芽率、呼吸率、電導(dǎo)率的變化規(guī)律；不同超干燥處理對(duì)桑寄生種子活力的影響；桑寄生種子超干燥處理及低溫保存技術(shù)研究。通過(guò)以上幾方面的系統(tǒng)研究，將揭示桑寄生種子容易失活的內(nèi)在規(guī)律，進(jìn)而擬訂桑寄生種子保存技術(shù)規(guī)程，為桑寄生優(yōu)良種質(zhì)及種源的保存提供技術(shù)支持，以保障桑寄生產(chǎn)業(yè)化發(fā)展所需的優(yōu)良種質(zhì)及種源，同時(shí)也為含有果膠的種子且不耐貯藏的一類(lèi)藥材品種的種子研究提供經(jīng)驗(yàn)借鑒，為有效的種質(zhì)資源保存提供理論指導(dǎo)，促進(jìn)桑寄生種子資源的國(guó)際交流和引種技術(shù)研究。