顏林 方旻 黃梓為 李海濤 謝新藝

（廣東省醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所 廣州 510663）

在臨床治療過程中，某些藥物需要在避光的條件下進(jìn)行輸注，一次性使用避光輸液器即是針對(duì)輸注過程中需避光的藥物而設(shè)計(jì)制造的專用輸液器[1]。

一次性使用避光輸液器的結(jié)構(gòu)形式目前主要有兩種，第一種為可避光的管材多層結(jié)構(gòu)，如內(nèi)層為常規(guī)輸液器材料，外層為含色母粒的材料，采用共擠工藝形成雙層避光輸液器。第二種為以含避光色母粒的高分子材料為原料擠塑成型加工成可避光的均質(zhì)管材，用此種管材再加工成一次性使用避光輸液器。

顏料黃83，又稱永固黃，C36H32Cl4N6O8，化學(xué)名為 2,2'-(3,3'-二氯-1,1'-聯(lián)苯-4,4'-雙偶氮)雙[N-(4-氯-2,5-二甲氧基苯基)-3-氧代-丁酰胺]，CAS號(hào)5567-15-7是一種中高檔且?guī)Ъt光的黃色顏料，耐熱性、耐光性、耐水性和耐堿性較好[2,3]。

避光輸液器中添加的著色劑不論是雙層材質(zhì)還是均質(zhì)材質(zhì)都會(huì)可能在臨床輸注時(shí)遷移到藥物制劑中，從而引發(fā)安全問題。本試驗(yàn)采用的輸液器為雙層結(jié)構(gòu)，其中外層為PVC材質(zhì)，添加了著色劑顏料黃83。提取溶劑選用了3種極端溶劑，分別為0.1mol/L鹽酸溶液、0.1mol/L氫氧化鈉溶液及65%乙醇溶液。提取條件模擬臨床輸注情況，由于物質(zhì)在高溫狀態(tài)下的遷移速度要高于常溫或低溫狀態(tài)，本實(shí)驗(yàn)考察了在常溫（25℃±1℃）及40℃±1℃溫度條件下的遷移溶出情況[4]。

1. 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

LC-20A高效液相色譜儀（日本島津公司）。

顏料黃 83，2,2'-(3,3'-二氯-1,1''-聯(lián)苯-4,4'-雙偶氮)雙[N-(4-氯-2,5-二甲氧苯基)-3-氧代-丁酰胺]，江萊生物，CAS：6697-15-7，批號(hào)：JL160311004。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品制備方法

分別將500ml 0.1mol/L鹽酸溶液、0.1mol/L氫氧化鈉溶液和65%乙醇溶液灌入空的玻璃輸液瓶中，再在輸液瓶上接上輸液器，上端連接的注射液針頭插入輸液瓶?jī)?nèi)，下端流入燒杯，分別在25℃±1℃、40℃±1℃下控制滴速在30-40滴/分鐘下輸注8h，收集所有流出的液體，作為0.1mol/L鹽酸遷移液、0.1mol/L氫氧化鈉遷移液和65%乙醇遷移液。取1ml遷移液至于100ml容量瓶中，使用流動(dòng)相定容，制得供試液[5]。。

1.2.2 對(duì)照溶液制備

對(duì)照儲(chǔ)備液：取顏料黃83標(biāo)準(zhǔn)品10.0mg，溶于100ml二甲亞砜中，作為對(duì)照儲(chǔ)備液。

專屬性對(duì)照液：取對(duì)照儲(chǔ)備液用流動(dòng)相定量稀釋至濃度為100ng/ml，作為專屬性對(duì)照液。

1.2.3 液相色譜條件

色譜柱：Inertsil?ODS-SP，5μm，4.6mm×250mm。

流動(dòng)相：乙腈：0.1%磷酸=70:30。

流速：1.0ml/min。

進(jìn)樣量：80μl。

波長(zhǎng)：433nm。

2. 檢測(cè)方法的建立

2.1 專屬性試驗(yàn)

在該色譜條件下取0.1mol/L鹽酸溶液、0.1mol/L氫氧化鈉溶液和和 65%乙醇溶液空白樣品、專屬性對(duì)照液、0.1mol/L鹽酸溶液、0.1mol/L氫氧化鈉溶液和65%乙醇溶液加標(biāo)樣品進(jìn)高效液相色譜儀20μl。顏料黃83的保留時(shí)間11.0min。0.1mol/L鹽酸溶液、0.1mol/L氫氧化鈉溶液和65%乙醇溶液空白樣品圖譜中均上未發(fā)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照液圖譜中待測(cè)物質(zhì)的峰。0.1mol/L鹽酸溶液、0.1mol/L氫氧化鈉溶液和65%乙醇溶液加標(biāo)樣品中待測(cè)物質(zhì)的峰與其他均峰無干擾。

圖1 顏料黃83的對(duì)照品色譜圖

2.2 線性試驗(yàn)

將顏料黃83溶解稀釋至40.6、61.0、81.3、101.6、121.9ng/ml濃度，分別進(jìn)樣 80μl，進(jìn)行HPLC測(cè)定，每個(gè)濃度測(cè) 3次。線性方程為 Y=6.457×10-3X-8.207×10-1（R2=0.9987），表明顏料黃 83在40.6～121.9ng/ml范圍內(nèi)線性良好。

2.3 精密度試驗(yàn)

重復(fù)性：平行制備6份0.1mol/L鹽酸加標(biāo)樣品、0.1mol/L氫氧化鈉加標(biāo)樣品加和65%乙醇加標(biāo)樣品，供試液經(jīng) 0.45μm濾膜過濾后依次注入液相色譜儀，相應(yīng)的RSD分別為3.47%、4.71%、2.47%。

中間精密度：在不同天由不同分析人員平行制備6份0.1mol/L鹽酸加標(biāo)樣品、0.1mol/L氫氧化鈉加標(biāo)樣品和 65%乙醇加標(biāo)樣品，供試液經(jīng)0.45μm濾膜過濾后依次注入液相色譜儀，相應(yīng)的RSD分別為4.17%、5.63%、2.13%。結(jié)果表明該方法精密度良好。

2.4 檢測(cè)限試驗(yàn)

分別稱取抗氧劑 168和 1010適量，逐步稀釋。信噪比為3:1，方法檢測(cè)限為 100ng/ml。

2.5 定量限試驗(yàn)

分別稱取抗氧劑 168和 1010適量，逐步稀釋。信噪比為10:1，方法檢測(cè)限為 406ng/ml。

2.6 回收率試驗(yàn)

照0.1mol/L鹽酸溶液、0.1mol/L氫氧化鈉溶液和65%乙醇溶液加標(biāo)樣品制備，每個(gè)濃度平行制備三份，計(jì)算回收率。目標(biāo)物在0.1mol/L鹽酸溶液、0.1mol/L氫氧化鈉溶液和65%乙醇溶液中的平均回收率分別為102.39%、99.33%、97.88%。說明該方法的回收率良好。。

3. 結(jié)果與討論

取連續(xù)生產(chǎn)的3批避光輸液器按照1.2.1項(xiàng)下的制備方法進(jìn)行試驗(yàn)，制得供試液，用高效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，在兩個(gè)溫度下（25℃±1℃、40℃±1℃），三種遷移液中均未檢出顏料黃83，遷移液中顏料黃83濃度小于100ng/ml。

圖2 顏料黃83在65%乙醇溶液中的含量檢測(cè)圖譜（遷移實(shí)驗(yàn)條件：40oC）

圖3 顏料黃83在堿性模擬液中的含量檢測(cè)圖譜（遷移實(shí)驗(yàn)條件：40oC）

圖4 顏料黃83在酸性模擬液中的含量檢測(cè)圖譜（遷移實(shí)驗(yàn)條件：40oC）

本次實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的三張模擬溶劑分別代表了酸性、堿性和脂溶性藥物，結(jié)果顯示輸液器中的顏料黃 83在這三種模擬液中均未檢出，說明顏料黃在本次輸液器中不易發(fā)生遷移溶出，溫度對(duì)其溶出影響不大，說明對(duì)于雙層結(jié)構(gòu)避光輸液器，外層的著色劑與藥物無直接接觸，在幾類不同性質(zhì)的模擬液中均難以遷移出來。

值得注意的是，本次選用的模擬溶劑雖然性質(zhì)較為極端，但無法代表所有臨床藥物，同時(shí)并沒有與真實(shí)藥物制劑建立直接的關(guān)系，在面對(duì)特殊藥物制劑時(shí)，特別是含較多增溶劑的藥物制劑，還是應(yīng)該針對(duì)實(shí)際藥物制劑對(duì)著色劑的溶出進(jìn)行驗(yàn)證。