楊莉，李丕軍，朱蓮，左建琴，周建華

(1.四川省林業(yè)科學(xué)研究院森林病蟲害防治研究所，四川 成都 610081； 2.四川省林業(yè)科學(xué)研究院林木遺傳育種室，四川 成都 610081；3.資陽市林業(yè)局，四川 資陽 641300； 4.安岳縣石羊林業(yè)工作站，四川 安岳 642357)

核桃營養(yǎng)豐富，含有大量不飽和脂肪酸、蛋白質(zhì)和多種微量元素，深得消費者喜愛。截止2015年底,四川省核桃Juglansregia種植規(guī)模達82萬hm2，居全國各省(直轄市、自治區(qū))第二位，核桃年產(chǎn)量40.8萬t，居全國第三，核桃種植產(chǎn)業(yè)成為農(nóng)民脫貧致富的重要產(chǎn)業(yè)之一[1]。

核桃褐斑病造成核桃果實提前落果、爛果，嚴重阻礙了核桃產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。在國外Belisario 等[2-4]分離鑒定鏈格孢菌Alternariaalternata是核桃褐色頂端壞死的病原之一，國內(nèi)曲文文 等[5-6]也報道了鏈格孢菌是核桃褐斑病的病原，而韓敏 等[7]鑒定了新疆地區(qū)核桃葉斑病病原菌為鏈格孢菌，楊莉 等[8]首次鑒定了四川省核桃褐斑病的病原菌是鏈格孢菌。目前，四川地區(qū)核桃褐斑病的防治研究還是空白。作者首次調(diào)查分析四川省核桃主要栽種品種對鏈格孢菌引起的核桃褐斑病的抗性，并且通過室內(nèi)和田間防治試驗篩選防治褐斑病的化學(xué)藥劑，以期為核桃褐斑病害的有效防治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試植物 在四川省廣元市朝天區(qū)面積3 000 hm2的核桃品種園，選擇目前四川地區(qū)種植的11個核桃主要品種：西扶2號、遼核1號、香玲、清香、中林5號、新疆核桃、魯光、碩星、夏早、川核1號、川核2號。核桃株行距4 m×5 m，樹齡10 a。

1.1.2 供試藥劑 50%異菌脲可濕性粉劑(WP)，江西禾益化工有限公司；80%多菌靈WP，江蘇蘇中農(nóng)藥化工廠；25%丙環(huán)唑乳油(EC)，青島金爾農(nóng)化研制開發(fā)有限公司；25%咪酰胺EC，四川國光農(nóng)化股份有限公司；80%代森錳鋅WP，四川國光農(nóng)化股份有限公司。

1.2 抗病性調(diào)查方法 選擇在核桃褐斑病發(fā)病高峰期的7月中旬調(diào)查核桃不同品種抗病性。每個品種隨機調(diào)查10株，每株核桃樹隨機選擇3個大枝調(diào)查核桃果實，記錄發(fā)病的嚴重程度，并計算各品種的發(fā)病率、病情指數(shù)。

病情分級標準[9]見表1，以發(fā)病最嚴重的中林核桃作為對照，計算各核桃品種的相對抗病指數(shù)。為了直觀看出各核桃品種的抗病性，根據(jù)表2將相對抗病指數(shù)轉(zhuǎn)換成抗病性。

病情指數(shù)=∑(各級發(fā)病數(shù)×級數(shù))/(調(diào)查總數(shù)×最高級數(shù)) ×100

發(fā)病率(%)=∑各級發(fā)病數(shù)/調(diào)查總數(shù)×100

相對抗病指數(shù)=(中林5號病情指數(shù)-某種(品種)病情指數(shù))×100/中林5號病情指數(shù)

表1 核桃褐斑病病情分級標準

表2 核桃對褐斑病抗性分級

1.3 化學(xué)藥劑篩選方法

1.3.1 平皿抑菌試驗 采用生長速率測定法，測定5種化學(xué)藥劑對核桃褐斑病病原抑制能力。將5種藥劑分別配置成3種濃度梯度，80%多菌靈WP 1 000，1 500，2 000倍液，80%代森錳鋅WP 1 000，1 500，2 000倍液，25%咪酰胺EC 500，1 000，1 500倍液，50%異菌脲WP 600，1 200，1 800倍液，25%丙環(huán)唑EC 500，1 000，1 500倍液；配制好的藥劑吸取1 mL，加入49 mL滅菌且冷卻至45 ℃的PDA培養(yǎng)基中制成平板，不含藥劑的PDA平板為空白對照。將病原菌在PDA培養(yǎng)基上28 ℃下培養(yǎng)5 d后，用5 mm打孔器打孔，菌餅接種于含藥平板上，置于28 ℃恒溫培養(yǎng)，每個處理重復(fù)3次，5 d測定菌絲生長速率，根據(jù)公式計算抑菌率，比較不同藥劑不同濃度對病原菌的毒力。

抑菌率(%)=(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/對照菌落直徑×100

1.3.2 田間防治試驗 將所選5種藥劑進行復(fù)配。18種復(fù)配藥劑中，9種以25%咪酰胺EC 1 000倍液為基礎(chǔ)，9種以25丙環(huán)唑EC 1 000倍液為基礎(chǔ)(表5)。采用機器高壓噴霧施藥。不噴藥為對照。每種處理選擇50 hm2核桃果樹進行噴施，果實成熟后統(tǒng)計防治區(qū)域和對照區(qū)域的病情指數(shù)，并計算防治率。

防治率(%)=(對照病情指數(shù)-處理病情指數(shù))/對照病情指數(shù)×100

1.3.3 數(shù)據(jù)處理分析 試驗數(shù)據(jù)用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行單因素方差統(tǒng)計分析。運用Duncan′s多重比較進行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 核桃不同品種對褐斑病的抗病性差異 調(diào)查的11個核桃品種中，感病最輕的是遼核1號和魯光，病情指數(shù)分別為8.53和3.67，相對抗病指數(shù)高達88.14和94.89，是高抗品種；清香核桃病情指數(shù)為19.15，是中抗核桃；而感病最嚴重的是中林5號和夏早核桃，病情指數(shù)分別高達71.94和56.00，屬于高感品種；香玲、新疆核桃、川核1號則是中感品種，而西扶2號、碩星、川核2號是低抗品種(表3)。

表3 核桃不同品種對褐斑病的抗病性

2.2 藥劑室內(nèi)抑菌作用 室內(nèi)平皿抑菌試驗表明，試驗所選5種藥劑對核桃褐斑病病原菌都有抑制作用。50%異菌脲WP效果最好，其600倍液對鏈格孢菌的抑菌率高達84.42%，但該藥劑不同濃度間抑菌效果差異并不顯著。其次是25%咪酰胺EC，500倍液抑菌率可達81.03%，不同濃度間抑菌效果差異顯著。80%多菌靈WP、80%代森錳鋅WP、25%丙環(huán)唑EC對鏈格孢菌的抑制效果不如50%異菌脲WP和25%咪酰胺EC(表4)。

2.3 田間防治試驗效果 18種復(fù)配藥劑田間防治鏈格孢菌引起的核桃褐斑病均有防治效果(表5)。25%咪酰胺EC 1 000倍液+50%異菌脲WP 600倍液防治效果最好，其次是25%咪酰胺EC 1 000倍液+80%多菌靈WP 1 000倍液、25%咪酰胺EC 1 000倍液+80%代森錳鋅WP 1 000倍液和25%丙環(huán)唑EC 1 000倍液+80%多菌靈WP 1 000倍液。

表4 5種藥劑對核桃褐斑病菌平皿抑菌試驗效果

注：采用Duncan′s多重比較。同列不同小寫字母表示不同處理間差異顯著 (P<0.05)，相同小寫字母表示不同處理間差異不顯著(P>0.05)。

表5 5種藥劑不同復(fù)配組合防治核桃褐斑病田間試驗效果

注：表中A代表25%咪酰胺EC 1 000倍液，B代表25%丙環(huán)唑EC 1 000倍液。采用Duncan′s多重比較；同列不同小寫字母表示不同處理間差異顯著(P<0.05)，相同小寫字母表示不同處理間差異不顯著(P>0.05)。

3 結(jié)論與討論

核桃是四川省重要的經(jīng)濟林樹種，作者調(diào)查發(fā)現(xiàn)四川地區(qū)主要栽培的11個核桃品種對褐斑病的抗病性差異較大，在實際生產(chǎn)中應(yīng)該選擇對褐斑病高抗的遼核1號和魯光，避免選擇夏早、中林這類高感或其他低抗品種，這也是有效防治核桃褐斑病的重要途徑之一。

平皿抑菌試驗發(fā)現(xiàn)5種化學(xué)藥劑對褐斑病病原菌均有抑制作用，但50%異菌脲WP 600倍液抑菌效果明顯優(yōu)于其他4種藥劑。田間防治試驗將所選5種藥劑進行復(fù)配后噴施，結(jié)果表明，25%咪酰胺EC 1 000倍液+50%異菌脲WP 600倍液防效最好。室內(nèi)平皿抑菌試驗和田間藥劑防治試驗結(jié)果一致，說明異菌脲對核桃褐斑病病原菌鏈格孢菌有較好的抑制作用。曲文文 等[10]對95%咪酰胺原藥、97%戊唑醇原藥、98%多菌靈原藥、95%異菌脲原藥4種殺菌劑對鏈格孢菌的防治做了研究，認為咪酰胺、異菌脲對鏈格孢的防治效果最好，本研究結(jié)果與之吻合。黃雄 等[11]報道異菌脲對核桃炭疽病和黑斑病有一定的防治效果，但并未對鏈格孢菌引起的核桃病害進行研究。此外，本研究所用藥劑濃度較高，但后續(xù)調(diào)查并未發(fā)現(xiàn)造成藥害，且經(jīng)過化學(xué)農(nóng)殘檢測，核桃果仁農(nóng)殘并未超過國家標準。

栽種抗性品種、噴施化學(xué)藥劑防治，對核桃褐斑病有一定的控制作用。但要達到防治核桃褐斑病的理想效果，還應(yīng)該根據(jù)果園實際情況，進行綜合防治，比如合理調(diào)整果樹栽種的密度，果園秋收后嚴格修枝清園等。