楊文超

摘 要：為了解繁昌縣規(guī)模禽場H7N9重組禽流感病毒二價(jià)滅活疫苗（H5+H7）的免疫抗體水平，于2018年4—6月應(yīng)用HI方法對繁昌縣的家禽養(yǎng)殖場、活禽交易市場及散養(yǎng)村的1470份血樣進(jìn)行了調(diào)查分析。結(jié)果顯示，種禽場、肉蛋兼用養(yǎng)禽場、蛋雞場H7N9抗體合格率明顯高于肉禽場，家禽養(yǎng)殖場H7抗體合格率高于活禽交易市場和散養(yǎng)村。

關(guān)鍵詞：繁昌縣；家禽H7N9流感；血清學(xué)

中圖分類號(hào) S855.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2018）12-0102-2

H7N9流感是一種新型禽流感，2013年3月，人感染H7N9流感病例首次在上海市、安徽省被發(fā)現(xiàn)，隨后給公共衛(wèi)生和養(yǎng)禽業(yè)帶來了嚴(yán)重影響。近年來，人感染H7N9流感病例仍以散發(fā)形式存在。目前，H7N9流感在家禽間呈擴(kuò)散態(tài)勢，分布范圍已擴(kuò)大到20多個(gè)省份。2017年5月，農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局批準(zhǔn)10家企業(yè)生產(chǎn)H7N9禽用疫苗，并在當(dāng)年用于全國秋季集中免疫。通過采取免疫等綜合防治措施，全國家禽H7N9流感病原學(xué)陽性率顯著下降。但是，H7N9流感污染面仍然較廣，低致病性與高致病性毒株并存。

繁昌縣家禽種類眾多、養(yǎng)殖量大；活禽交易量大、跨省調(diào)運(yùn)頻繁；水網(wǎng)湖泊眾多，野鳥數(shù)量多、遷徙范圍大，病毒感染家禽和跨區(qū)域傳播風(fēng)險(xiǎn)依然高，防控壓力較大。為了解繁昌縣規(guī)模禽場H7N9重組禽流感病毒二價(jià)滅活疫苗的免疫抗體水平，繁昌縣動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心組織相關(guān)人員于2018年4—6月應(yīng)用HI方法對繁昌縣的家禽養(yǎng)殖場、活禽交易市場及散養(yǎng)村的1470份血樣進(jìn)行了調(diào)查分析，掌握了繁昌縣家禽養(yǎng)殖、流通環(huán)節(jié)H7N9流感病毒的流行率，以期為繁昌縣家禽H7N9流感防控提供幫助。

1 材料與方法

1.1 樣品采集 2018年4—6月，從繁昌縣六鎮(zhèn)、縣經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)33個(gè)規(guī)模禽場、2個(gè)活禽交易市場和7個(gè)散養(yǎng)村采集血液樣品，每個(gè)場地采集35份血液樣品，共采集樣品1470份，每只禽通過翅靜脈采血2～3mL，冷藏條件下送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。

1.2 樣品的制備 將采集的血液樣品于3000r/min條件下離心5min，取上清液于1.5mL滅菌離心管中，-20℃保存?zhèn)溆么龣z。

1.3 檢測試劑及主要儀器設(shè)備 禽流感病毒H7亞型（H7N9株）血凝抑制試驗(yàn)診斷抗原（批號(hào)2017010）和禽流感H7亞型陰、陽性血清（批號(hào)2017004），購自哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司，阿氏液、PBS液、1%紅細(xì)胞懸液等根據(jù)試驗(yàn)需要在實(shí)驗(yàn)室自配。TD4臺(tái)式低速離心機(jī)（長沙易達(dá)儀器有限公司）；Finnpipette 5～50μL單道移液器及5～50μL多道移液器（Thermo Fishier Scientific公司）。

1.4 方法 血凝-血凝抑制試驗(yàn)（HA-HI試驗(yàn)，微量法）。按照高致病性禽流感診斷技術(shù)[1]和高致病性禽流感免疫技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，結(jié)果判定時(shí)按照高致病性禽流感免疫技術(shù)規(guī)范[2]要求進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 繁昌縣家禽H7N9流感抗體總體檢測結(jié)果 繁昌縣家禽H7N9流感抗體總體檢測情況結(jié)果見表1。

2.2 繁昌縣不同禽類H7N9抗體水平檢測結(jié)果 繁昌縣不同禽類H7N9抗體水平檢測結(jié)果見表2。

3 討論

（1）本次調(diào)查共檢測了42個(gè)場點(diǎn)，覆蓋了繁昌縣的家禽養(yǎng)殖場、活禽交易市場和散養(yǎng)村，基本上能夠反映繁昌縣家禽的整體狀況。本次調(diào)查檢測涵蓋種禽場、肉蛋兼用養(yǎng)禽場、蛋雞場、肉禽場能代表繁昌縣不同種類免疫家禽的H7N9抗體水平情況。結(jié)果表明，種禽場、肉蛋兼用養(yǎng)禽場、蛋禽場H7N9抗體合格率明顯高于肉禽場，家禽養(yǎng)殖場H7N9抗體合格率高于活禽交易市場和散養(yǎng)村。

（2）種禽場、肉蛋兼用養(yǎng)禽場、蛋禽場H7N9抗體合格率比肉禽場HI抗體合格率高。分析主要是因?yàn)檫@幾種的飼養(yǎng)時(shí)間較長，普遍為種禽群進(jìn)行多次免疫；而肉禽場由于飼養(yǎng)期短， 基本上都只進(jìn)行1次免疫。由此可以證明，經(jīng)2次及以上禽流感疫苗免疫的禽只的免疫應(yīng)答較好， 產(chǎn)生的抗體效價(jià)也較高，能有效提高機(jī)體抗病能力[3]。另外，良好的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件也有助于免疫工作正常開展，減少疫病傳入機(jī)會(huì)，降低禽流感疫情發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。

（3）家禽養(yǎng)殖場H7N9抗體合格率高于活禽交易市場和散養(yǎng)村。規(guī)模養(yǎng)殖禽的抗體水平高于散養(yǎng)的主要原因，可能是由于規(guī)模養(yǎng)殖戶的飼養(yǎng)量比較大，對動(dòng)物防疫很重視，積極進(jìn)行防疫，各項(xiàng)防疫措施得到較好的落實(shí)，散養(yǎng)戶大部分是沿用傳統(tǒng)的養(yǎng)殖模式，飼養(yǎng)量少，防疫意識(shí)比較淡薄，有的甚至拒絕村級(jí)防疫員免費(fèi)的強(qiáng)制免疫疫病的免疫注射，散養(yǎng)的粗放飼養(yǎng)方式易導(dǎo)致部分禽營養(yǎng)不良，這也影響了散養(yǎng)禽的免疫應(yīng)答，從而影響了免疫效果[3]。活禽市場的家禽免疫抗體合格率低下，免疫情況不清，可能與免疫期超過6個(gè)月、漏免或免疫未產(chǎn)生應(yīng)答等原因有關(guān)[4-5]。

參考文獻(xiàn)

[1]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB/T18936-2003 高致病性禽流感診斷技術(shù)[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2003.

[2]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部.NY/T769-2004 高致病性禽流感免疫技術(shù)規(guī)范[S].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2004.

[3]楊其明，肖仁榮，陳仕平，等.禽流感免疫抗體監(jiān)測分析評(píng)估[J].畜牧與飼料科學(xué)，2009（6）：72-73.

[4]蘭玲，盛卓君.新疆地區(qū)高致病性禽流感的免疫抗體監(jiān)測[J].中國動(dòng)物檢疫，2007，2（48）：35-36.

[5]陸桂麗，汪萍，沙依蘭古麗，等.2009-2010年新疆地區(qū)活禽市場肉雞禽流感H5抗體監(jiān)測與分析[J].中國動(dòng)物檢疫，2012，29（4）：48-50.

（責(zé)編：張宏民）