杜長春 方向麗 錢一華

摘 要：建立一種應用氣相色譜串聯(lián)質譜法對蔬菜、水果中多種農藥殘留進行分析測定的方法。樣品采用QuEChERS方法進行前處理，用1%乙酸的乙腈溶液提取后，凈化包（內含PSA、C18、GCB、MgSO4）凈化，應用全掃描模式（Full Scan）對30種農藥進行定性，選擇反應監(jiān)測模式（SRM）定量，外標法計算結果。通過對樣品前處理方法的優(yōu)化，減小了本底值，使定量的準確度得到了提高，在0～0.20mg/kg線性范圍內呈良好的線性關系，相關系數(shù)大于0.99，添加濃度為0.05～0.20mg/kg，回收率為74%～114%。本文研究為蔬菜水果中多種農藥殘留的分析測定提供了可靠依據(jù)。

關鍵詞：氣相色譜串聯(lián)質譜；農藥殘留；QuEChERS；全掃描；選擇反應監(jiān)測

中圖分類號 TS207.53 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2018）13-0108-04

農藥化學品的使用，極大地促進了人類社會的進步和生產力的發(fā)展，但隨著人們不合理地過量使用農藥及高毒、難降解農藥的使用，所造成的農藥殘留問題不僅危害人體健康，而且影響到農產品質量、安全性以及國際農產品進出口貿易，因此，農藥殘留分析引起了人們的重視和關注。目前，蔬菜和水果中農藥殘留的應用較多的分析方法有氣相色譜法、液相色譜法、超臨界流體色譜和快速檢測法等[1]。氣相色譜串聯(lián)質譜因其較強的分離能力、較高的靈敏度、較快的分析速度及較廣的分析范圍而得到廣泛應用[2]。本文以甘藍、黃瓜、番茄、白菜、桃子、蘋果等日常食用的蔬菜和水果為試驗材料，通過氣相色譜串聯(lián)質譜法建立了檢測30個農藥殘留定性與定量分析方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑 乙腈、正己烷：色譜純，美國TEDIA；乙酸：分析純，上海天臣化工有限公司；丙酮：分析純，上海聚泰特種試劑公司；無水乙酸鈉、無水硫酸鎂、乙二胺-N丙基烷（PSA）、C18、石墨化炭黑（GCB）：博納艾杰爾有限公司；30種農藥標準物質（1000μg/mL）：農業(yè)部環(huán)境質量監(jiān)督檢驗測試中心（天津）。

1.2 儀器與設備 氣相色譜串聯(lián)三重四極桿質譜儀（TSQ 8000 Evo GC-MS/MS）：美國Thermo Fisher；氮吹儀（N-EVAP-12）：美國Organomation；旋轉蒸發(fā)儀（RV8）、勻漿機（T18）：德國IKA；離心機（ST8）：美國Thermo Fisher；微型旋渦混合儀（QT-1）：上海琪特有限公司；電子天平（TD）：余姚市金諾天平儀器有限公司；萬能粉碎機（AH-200）：上海嘉定糧油檢測儀器廠；超聲波清洗機（SCQ-8201B）：上海聲彥超聲儀器有限公司；移液槍：美國Thermo Fisher。

1.3 樣品處理

1.3.1 樣品提取 取甘藍、黃瓜、番茄、白菜、桃子、蘋果等蔬菜、水果樣品，除去枯葉和根，切碎，在粉碎機中粉碎，裝入樣品盒待用。稱取10g均質樣品到50mL離心管中，放入3顆玻璃彈珠和15mL1%乙酸的乙腈溶液，渦旋振蕩提取2min；將其放入-20℃冰箱中冷藏10min；從冰箱中取出后，加入混合萃取填料1g無水乙酸鈉+4g無水硫酸鎂，迅速手搖振蕩30s至充分混勻；然后離心機以3800r/min轉速離心3min，待凈化。

1.3.2 樣品凈化 樣品基質與相應的凈化包見表1。

準確吸取6mL上清液至純化管中，渦旋30s，以3800r/min轉速離心3min后，分別各吸取1.5mL至玻璃試管中，55℃水浴氮吹至近干，待定容。用1mL正己烷+丙酮（9+1）溶解玻璃試管中的殘渣，過0.22μmPTFE濾膜后，待氣質聯(lián)用儀檢測。

1.4 儀器測定

1.4.1 測定條件 色譜柱：TG-5MS（30m×0.25mm×0.25μm）毛細管色譜柱；進樣口溫度：270℃，柱溫：40℃保持1.5min，25℃/min升溫至90℃，保持1.5min，25℃/min升溫至180℃，5℃/min升溫至280℃，10℃/min升溫至300℃，保持5min；不分流進樣，1min后打開閥，進樣量：1μL；載氣：氦氣，純度，99.999%，流速1.2mL/min；離子源模式：EI，離子源溫度：280℃，傳輸線溫度：300℃；掃描模式：全掃描（SCAN）/選擇離子（SRM），定量分析用外標法。

1.4.2 定性測定 采用全掃描模式（Full Scan）對30種農藥進行定性監(jiān)測，掃描的離子范圍為50～500，溶劑延遲時間為5min，得到如圖1所示的總離子流圖（TIC）和表2所示各農藥的保留時間。從圖1可以看出，各農藥間分離效果良好。

1.4.3 定量測定 應用選擇反應監(jiān)測模式（SRM）進行定量監(jiān)測，根據(jù)1.4.1的儀器工作條件進行SRM檢測模式下母離子、子離子以及CE碰撞能的優(yōu)化，得到表2中30種農藥的SRM條件。按照表2所示的SRM條件設置質譜參數(shù)，得到如圖2所示的總離子流圖（TIC）。

2 結果與分析

2.1 樣品前處理方法的優(yōu)化 QuEChERS方法在樣品提取時，加入萃取劑1g無水乙酸鈉+4g無水硫酸鎂時，會釋放一定的熱量，造成部分不穩(wěn)定農藥的轉化或分解[3]，對比冷藏前后及冷藏時間的實驗結果，發(fā)現(xiàn)冷藏一定時間（根據(jù)室溫而定）更能減少農藥的轉化或分解。凈化包中PSA的作用是吸附劑，可去除基質中碳水化合物、酚類、各種極性有機酸、少量色素、糖類和脂肪酸，而C18能有效除去脂肪等非極性雜質，無水MgSO4是除去樣品組分中的水分，GCB是為了除去色素、甾醇類和非極性雜質[4]。且不同量的PSA、C18、GCB、MgSO4配比凈化效果及回收率各有不同[5]。綜合以上因素考慮，根據(jù)蔬菜水果顏色的深淺，經過多次實驗，添加如表1所示的各物質的比例，可提高凈化效果，滿足回收率的要求。

2.2 標準工作曲線和檢出限

2.2.1 標準儲備溶液的配制 從農藥標準品（1000μg/mL）中移取0.5mL至5mL容量瓶中，加入正己烷稀釋并定容（100μg/mL），置于冰箱0～4℃避保存[6]。

2.2.2 混合標準溶液的配制 準確移取30種標準儲備溶液（100μg/mL）0.5mL至25mL容量瓶中，加入正己烷稀釋并定容，混合溶液的濃度為2.0μg/mL。以2.0μg/mL的混合溶液為母液，用蘋果、甘藍空白基質定容，依次稀釋至0.02μg/mL、0.04μg/mL、0.1μg/mL、0.2μg/mL。用不同濃度的混合標準溶液按選擇反應監(jiān)測模式進行測定，以濃度為橫坐標，所得到的響應值峰面積為縱坐標，得到30種農藥的標準曲線。各農藥的線性回歸方程及相關系數(shù)、檢出限如表3所示。

2.3 添加回收率和精密度 取甘藍、蘋果均質樣品各10g，加標濃度分別為0.05mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg，平行測定3份，按照1.3中樣品的處理方法及1.4中儀器的工作條件測定，扣除本底后結果見表4。從表4可以看出，30種農藥的回收率范圍為74%～114%，其相對標準偏差（RSD）為1.0%～11.0%。由此可知，該方法滿足蔬菜水果中農藥多殘留分析的質量控制要求。

3 結論

通過對樣品前處理的優(yōu)化，對30種農藥殘留進樣定性和定量測定，標準曲線呈良好的線性關系，相關系數(shù)大于0.99，檢出限1.25～5μg/kg，回收率為74%～114%，其相對標準偏差（RSD）為1.0%～11.0%。結果表明，該方法具有較高的靈敏度高和準確度、較好的重復性和再現(xiàn)性，保證了方法的可靠性，可以為蔬菜水果中農藥多殘留分析提供可靠參考。

參考文獻

[1]高堯華，劉冰，滕爽，等.氣質質聯(lián)用法測定水產品中50種農藥殘留量[J].食品研究與開發(fā)，2018，39（2）：132-138.

[2]劉建慧，孫鑫，劉希光，等.果蔬中農藥殘留現(xiàn)狀及檢測技術的研究進展[J].食品研究與開發(fā)，2014，35（5）：119-122.

[3]孫大利，鄭奠濤，葉火春，等.氯吡脲在葡萄中的殘留分析方法及消解動態(tài)[J].農藥，2011，50（10）：751-753.

[4]高陽，徐應明，孫揚，等.QuEChERS提取法在農產品農藥殘留檢測中的應用進展[J].農業(yè)資源與環(huán)境學報，2014，31（2）：110-117.

[5]曹凱，孫國泉，唐駿，等.QuEChERS-氣質聯(lián)用法同時測定土壤中16種農藥殘留[J].農藥，2016，55（7）：507-509.

[6]水果和蔬菜中500種農藥及相關化學品殘留量的測定 氣相色譜-質譜法》：GB23200.8-2016[S].北京：中國標準出版社，2016.

（責編：張宏民）