馮巖　祝金

摘 要 糧食中的真菌毒素會對人類和動物的健康產(chǎn)生巨大的危害，真菌毒素的檢測技術(shù)正不斷進步?；诖耍喴榻B了真菌毒素的種類及危害，綜述了真菌毒素的主要分析檢測技術(shù)，以期為同類研究提供參考。

關(guān)鍵詞 糧食；真菌毒素；檢測技術(shù)

中圖分類號：TS210.7 文獻標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.15.080

1 真菌毒素的種類及危害

真菌毒素是指真菌在糧食和飼料里生長產(chǎn)生的有毒次級代謝產(chǎn)物，一種真菌可能會產(chǎn)生多種毒素，目前真菌毒素已知種類有400余種[1]。真菌毒素極易污染農(nóng)作物，全球每年有大約25%的農(nóng)產(chǎn)品會被真菌毒素污染，特別是小麥、大麥、玉米、大豆和花生等，真菌毒素在糧食作物生產(chǎn)期間以及加工、生產(chǎn)、貯存和運輸期間都可產(chǎn)生，人類和動物食用受污染的農(nóng)作物會對健康帶來巨大的威脅。

糧食中常見的真菌毒素主要有黃曲霉毒素（Aflatoxins）、赭曲霉毒素、單端孢霉烯族毒素（Trichothecenes），如脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、T2毒素等。目前，已有100多個國家和相關(guān)組織頒布了食品及飼料中常見真菌毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)，我國也規(guī)定了其中幾種常見真菌毒素，如黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、T2毒素等的限量值。對糧食產(chǎn)品中真菌毒素的分析技術(shù)進行研究，會對國家糧食安全和人畜健康起著極其重要的作用。

2 真菌毒素的分析檢測技術(shù)

2.1 真菌毒素分析前處理技術(shù)

真菌毒素的前處理分為提取和凈化兩個步驟，所選取的提取溶劑及凈化方法需依據(jù)待測基質(zhì)和目標(biāo)真菌毒素的理化性質(zhì)來決定[2]。由于不同真菌毒素理化性質(zhì)差異大，需要選擇適合的提取溶劑，這是前處理過程最重要的環(huán)節(jié)，對回收率的高低影響很大；對提取液進行凈化處理，可以降低基質(zhì)中色素、脂肪、蛋白等組分的干擾，降低基質(zhì)對真菌毒素離子化的影響，延長色譜柱的壽命。

目前，常用的真菌毒素分析前處理技術(shù)有液液萃取法、固相萃取法、免疫親和柱凈化法及多功能凈化柱凈化法[3]。高蓓等采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法分析測定糧食及其制品中5種真菌毒素的含量，該方法利用多功能凈化柱進行糧食樣品前處理，操作簡單高效，方便快捷，其結(jié)果可為檢測機構(gòu)和企業(yè)提供有效的技術(shù)支持。

由于有機溶劑對環(huán)境的污染程度嚴(yán)重，在實驗效能不變的情況下，為保護環(huán)境和降低成本，減少有機溶劑提取劑的用量就成為了研究人員主要研究的課題，液液萃取和固相萃取雖然能對提取液進行有效的凈化和富集，但實驗步驟復(fù)雜，有機溶劑消耗量大，對毒素的專屬選擇性差，容易造成基質(zhì)對目標(biāo)毒素離子化效率的強烈干擾。相比而言，免疫親和柱凈化法和多功能凈化柱凈化法能更有針對性地對提取液進行凈化和富集，方法簡便，試劑用量小，特異性強，目前被廣泛用于糧食中真菌毒素的含量分析。雖然免疫親和柱凈化法能大大提高檢測效率，但由于免疫技術(shù)發(fā)展的限制，用免疫親和柱凈化法處理樣品可檢測的真菌毒素種類仍然很有限，隨著檢測儀器的穩(wěn)定性、靈敏度和特異性的不斷提高，儀器方法抗干擾能力的不斷增強，有些不需要凈化的前處理方法也逐漸出現(xiàn)。真菌毒素檢測的前處理技術(shù)目前仍處于研究階段，其方法實用性和穩(wěn)定性需進一步改進。

2.2 真菌毒素分析檢測技術(shù)

目前，真菌毒素的分析檢測方法主要分為理化檢測法和快速檢測法兩大類。理化檢測法主要包括薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法及液質(zhì)聯(lián)用法等?？焖贆z測法主要包括生物傳感器法、免疫分析法、紅外光譜法等?？焖贆z測法具有簡便、快捷的優(yōu)勢，適用于樣品的現(xiàn)場檢測和快速篩查，該方法對實驗條件和實驗人員的要求不高，但其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性較差。氣相色譜和氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜具有靈敏度高和操作簡便的特點，其適用于分析易揮發(fā)、熱穩(wěn)定的化合物，但是，大多數(shù)真菌毒素?zé)岱€(wěn)定性差，這對氣相色譜儀分析的毒素種類存在很大限制。近年來，液相色譜及液質(zhì)聯(lián)用檢測技術(shù)飛速發(fā)展，其應(yīng)用于糧食產(chǎn)品中真菌毒素的檢測也日益成熟，該方法具有穩(wěn)定性好、靈敏度高的優(yōu)點，適用于大多數(shù)真菌毒素的分析研究，是目前通用的檢測方法。

鄭翠梅 等研究了液相色譜-飛行時間質(zhì)譜在真菌毒素檢測方面的應(yīng)用，樣品經(jīng)乙腈-水-乙酸混合溶劑提取，經(jīng)多功能凈化柱和強陰離子交換柱兩步凈化后，利用液相色譜-飛行質(zhì)譜進行檢測，該方法的選擇性強、靈敏度高，能夠滿足歐盟和中國等地對真菌毒素污染檢測的要求[4]。

葉金 等采用乙腈：水：乙酸（70∶29∶1，體積比）為提取劑直接提取稀釋，并結(jié)合同位素稀釋技術(shù)，以超高效液相色譜-四級桿/靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜作為分析儀器，建立了常見糧食基質(zhì)（小麥、玉米等）中16種真菌毒素的快速分析方法，16種真菌毒素的線性關(guān)系、添加回收水平和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差都得到了令人滿意的結(jié)果，該方法適用于檢測糧食中多種真菌毒素[5]。

孟娟 等采用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法對糧食及制品中6種玉米赤霉烯酮類物質(zhì)進行檢測，樣品用乙腈水提取，石墨化炭黑固相萃取柱凈化，采用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進行測定。6種目標(biāo)物線性相關(guān)系數(shù)大于0.99，檢出限0.1～0.2 μg·kg-1，加標(biāo)回收79.9%～104.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%。檢測結(jié)果符合食品樣品中痕量污染物的檢測要求[6]。

3 結(jié)語

當(dāng)前，糧食中真菌毒素污染的現(xiàn)象頻繁發(fā)生，為保護人畜的身體健康，提高真菌毒素的檢測水平是保障糧食質(zhì)量安全的迫切要求。隨著當(dāng)今社會的發(fā)展和檢測技術(shù)的進步，一些簡便快捷、穩(wěn)定高效的檢測方法不斷涌現(xiàn)，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)應(yīng)用于糧食中真菌毒素的分析領(lǐng)域，為真菌毒素的檢測提供了一個更加可靠的分析方法。只有對糧食中的真菌毒素進行準(zhǔn)確的定性定量分析及有效追蹤，才能對真菌毒素污染進行合理控制，才能為糧食食品安全提供技術(shù)支撐。

參考文獻：

[1] 李鳳琴.真菌毒素分析及質(zhì)量控制[J].國外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)分冊，2004，31（5）：265-272.

[2] 孫利，霍江蓮，崔維剛，等.糧食產(chǎn)品中真菌毒素的色譜及質(zhì)譜檢測技術(shù)研究進展[J].食品科學(xué)，2013，34（19）：367-375.

[3] 高蓓，姜德銘，楊永壇.同位素內(nèi)標(biāo)-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定糧食及其制品中的5種真菌毒素[J].色譜，2017，35（6）：601-607.

[4] 鄭翠梅，張艷，王松雪，等.液相色譜-飛行時間質(zhì)譜同時測定糧食中13種真菌毒素[J].分析測試學(xué)報，2012，31（4）：383-389.

[5] 葉金，吳宇，辛媛媛，等.超高效液相色譜-四級桿/靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜快速精準(zhǔn)測定糧食中多種真菌毒素[J].分析測試學(xué)報，2017，36（4）：449-456.

[6] 孟娟，張晶，張楠，等.固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測糧食及其制品中的玉米赤霉烯酮類真菌毒素[J].色譜，2010（6）：601-607.

（責(zé)任編輯：趙中正）