河南省信陽市中心醫(yī)院病理科(河南 信陽 464000)

楊長俊

肺癌是臨床最常見惡性腫瘤之一，發(fā)病率及死亡率均居于所有惡性腫瘤之首，且呈逐年增高趨勢[1]。研究顯示，I期肺癌術(shù)后10年生存率超過90%，因此，早期診斷及治療是提高患者生存率之關(guān)鍵[2]。小細胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)雖僅占肺癌的15%～20%，但其細胞分化差、轉(zhuǎn)移早、惡性程度高，較之非小細胞肺癌(no-small cell lung cancer,NSCLC)，病情進展更為迅速，預(yù)后更差，受到越來越多關(guān)注[3]。目前，CT是肺癌診斷的常用影像學(xué)檢查方法，但其易受檢查者主觀因素影響，存在較高假陽性率、假陰性率。近年來，神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物對臨床診斷的價值引起臨床廣泛重視。研究顯示，突觸素(synaptophysin,Syn)、嗜鉻蛋白(chromogranin A,CgA)在SCLC中有著較高表達[4]。本研究采用免疫組化法檢測檢測Syn、CgA在SCLC、NSCLC中的表達，探討其聯(lián)合CT診斷SCLC的臨床價值，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集2015年3月～2017年3月在我院接受手術(shù)切除治療并經(jīng)術(shù)后病理證實的95例肺癌患者臨床資料，其中SCLC45例，男31例，女14例；年齡31～82歲，平均(61.25±17.62)；臨床分期：I～II期16例，III～IV期29例；有吸煙史35例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移27例；NSCLC50例，男36例，女14例；年齡30～80歲，平均(60.87±15.28)歲；臨床分期：I～II期18例，III～IV期32例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例。兩組性別比例、年齡、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。所有患者術(shù)前均未行任何抗腫瘤治療，均完成CT檢查，術(shù)后均采集癌組織。本研究取得醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者對研究知情同意。

1.2 方法

1.2.1 CT檢查

1.2.1.1 檢查方法：采用德國西門子公司SOMATOM Definition 128層多排螺旋CT機及MEDRAD VISRON CT高壓注射器，行胸腹部聯(lián)合掃描。檢查時，患者取仰臥位，雙手抱頭，深吸氣后屏氣，掃描參數(shù)：管電壓120kV，管電流自動匹配，層厚為5mm，層距為5mm，螺距為5mm，掃描范圍由肺尖部至恥骨聯(lián)合水平。增強掃描：經(jīng)肘靜脈注入80～100ml非離子造影劑(300mg I/ml)，注射速率為2.5～3.0ms/s，動脈期、靜脈期于一次性屏氣后完成，必要時延遲2～3s行肝臟、腹腔掃描。

1.2.1.2 圖像處理：將掃描圖像上傳至ADW4.4工作站，由2名副主任以上影像醫(yī)師采用盲法進行獨立分析，觀察圖像，記錄病灶部位、大小、形態(tài)、密度、邊緣、胸腔積液、胸膜轉(zhuǎn)移、縱膈大血管受侵及淋巴結(jié)、遠處轉(zhuǎn)移等情況，診斷意見出現(xiàn)分歧時，經(jīng)討論取得一致。

1.2.2 癌組織及癌旁組織Syn、CgA檢測

1.2.2.1 試劑與儀器EscelsiorTMES組織脫水機(賽默飛世爾科技有限公司)，ESHistostar組織包埋機(賽默飛世爾科技有限公司)，F(xiàn)inesse ME全自動石蠟切片機(賽默飛世爾科技有限公司)，Qp.B型切片漂烘儀(安徽電子研究所)，S-P超敏免疫組織化學(xué)試劑盒(福州邁新生物技術(shù)有限公司)，3,3二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色試劑盒(合肥康源生物科技研究所)，Leica光學(xué)顯微鏡(德國Leica公司)；兔抗人Syn單克隆抗體(福建邁新生物技術(shù)有限公司)，鼠抗人CgA單克隆抗體(福建邁新生物技術(shù)有限公司)。

1.2.2.2 標(biāo)本采集：取所有患者肺癌組織標(biāo)本，均以10%福爾馬林溶液固定，常規(guī)石蠟包埋，4μm厚切片，連續(xù)切5張，切片后采用免疫組化SP法檢測Syn、CgA表達。免疫組化結(jié)果由2名經(jīng)驗豐富的病理醫(yī)師獨立閱片分別記錄。

1.2.2.3 結(jié)果判定：陽性染色標(biāo)準(zhǔn)：Syn、CgA均以細胞膜/細胞漿彌漫有藍色或深藍色顆粒。400倍顯微鏡下隨機選取5個視野，每個視野計數(shù)100個癌細胞，按染色程度與染色細胞比例分別計分進行綜合評價。染色情況評分：基本不著色，0分；淺藍色，1分，較明顯藍色，2分；深藍色，3分。染色細胞比例評分：陽性染色細胞比例在5%及以下，0分；陽性染色細胞比例為6%～25%，1分；陽性染色細胞比例為26%～50%，2分；陽性染色細胞比例在51%～75%為3分，陽性染色細胞比例在75%以上為4分。將每個視野染色程度與染色細胞比例評分相乘，并求單個視野評分，再按以下標(biāo)準(zhǔn)評價表達情況：1分，為陰性(-)；2～3分，弱陽性(+)；4～7分，陽性(++)；8分及以上，強陽性(+++)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS19.0軟件處理研究數(shù)據(jù)，計數(shù)資料采用例和百分率進行描述，組間比較采用χ2檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 SCLC與NSCLC的CT征象分析SCLC組胸腔積液(圖1)、縱膈淋巴結(jié)融合(圖2)等CT征像等出現(xiàn)比例明顯高于NSCLC組(P＜0.05)，而阻塞征象、支氣管截斷征(圖3)出現(xiàn)比例明顯低于NSCLC組(P＜0.05)。而兩組心包積液、胸膜轉(zhuǎn)移等其他CT征象出現(xiàn)比例無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。見表1。

2.2 Syn、CgA在SCLC、NSCLC中表達Syn、CgA在SCLC中陽性表達率分別為86.67%(39/45)、53.33%(24/45)，在NSCLC中陽性表達率分別為16.00%(8/50)、4.00%(2/50)，Syn、CgA在SCLC中陽性表達率均明顯高于它們在NSCLC中陽性表達率(χ2=47.315、28.998,P＜0.05)。

2.3 CT與Syn聯(lián)合應(yīng)用對SCLC的診斷價值在肺癌診斷中，與單一CT、Syn檢查或CgA比較，二者聯(lián)合明顯提高對SCLC診斷的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度(P＜0.05)。見表2。

3 討 論

多層螺旋CT由于掃描速度快、檢查時間短、范圍廣泛及后處理功能強大，已成為肺癌最常用的影像手段。其能夠清晰呈現(xiàn)病灶形態(tài)、大小、部位、密度、強化程度等特點，并能夠顯示由肺部腫塊引起的支氣管截斷征、阻塞征象等，對肺癌有著重要診斷價值[5]。除肺癌自身形態(tài)學(xué)特征之外，應(yīng)用薄層重組技術(shù)，CT還能夠顯示病灶與周圍組織之間關(guān)系，尤其對胸膜、大血管、心包、縱隔及肺門淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等征象的檢出有著重要作用[6]。此外，通過廣泛掃描還可觀察、判斷遠處轉(zhuǎn)移情況，并可綜合病灶形態(tài)、密度、內(nèi)部情況及周圍侵犯等表現(xiàn)對病理分型作出一定判斷[7]。本研究中95例肺癌CT圖像可很好地顯示腫瘤生物學(xué)特征，良好呈現(xiàn)了病灶各種征象和其周圍組織結(jié)構(gòu)關(guān)系，對肺癌診斷表現(xiàn)出巨大優(yōu)勢。腫瘤CT表現(xiàn)與其生物學(xué)特征密切相關(guān)。本研究顯示，SCLC胸腔積液、縱膈淋巴結(jié)融合等CT征像出現(xiàn)比例明顯高于NSCLC，而阻塞征象、支氣管截斷征出現(xiàn)比例明顯低于NSCLC，這與相關(guān)報道[8]一致。NSCLC多起源于支氣管上皮，腫瘤細胞傾向于朝氣管腔內(nèi)外生長，可致支氣管截斷、阻塞性改變。而SCLC是一種神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，起源于支氣管黏膜上皮細胞，腫瘤細胞傾向于朝官腔外生長，極少朝腔內(nèi)生長，腫塊生長方向與支氣管長軸保持一致，氣管通暢，雖亦可能出現(xiàn)阻塞征象、支氣管截斷征，但往往較晚。此外，SCLC惡性程度高，早期即出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，縱隔淋巴結(jié)相互融合而使組織分界不清[9]。因此，上述征象在鑒別SCLC與NSCLC上有一定幫助，當(dāng)出現(xiàn)胸腔積液、縱膈淋巴結(jié)征象時應(yīng)考慮SCLC的可能。

表1 SCLC與NSCLC的CT征象分析

表2 CT與Syn聯(lián)合應(yīng)用對SCLC的診斷價值

腫瘤標(biāo)志物反映著腫瘤的生物學(xué)特性，對肺癌早期診斷有著重要意義。Syn是一種與突觸功能有著緊密聯(lián)系的膜蛋白，在腦、脊髓、視網(wǎng)膜等神經(jīng)組織中均有分布[10]。CgA是一種由439個氨基酸組成的酸性可溶蛋白，多儲存于神經(jīng)內(nèi)分泌細胞的致密核心顆粒中。作為經(jīng)典的神經(jīng)內(nèi)分泌免疫標(biāo)記物，兩者常應(yīng)用于神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷中[11]。SCLC有著明顯的神經(jīng)內(nèi)分泌分化特征，亦屬于神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤范疇，多種神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物在SCLC中有較高表達[12]。有報道顯示，Syn在SCLC中陽性表達率為73%，CgA在在SCLC中陽性表達率為53%[13]。本研究結(jié)果顯示，Syn、CgA在SCLC中陽性表達率分別為86.67%、53.33%，明顯高于它們在NSCLC中陽性表達率(16.00%、4.00%)，這與既往報道[14]相符。這提示Syn、CgA在SCLC中表達有著較高特異性，對SCLC與NSCLC鑒別診斷有重要作用。CT是目前診斷肺癌的主要影像學(xué)手段，但其局限于形態(tài)學(xué)方面的分析，診斷效能不高，而聯(lián)合腫瘤標(biāo)記物檢查，能夠彌補其在肺癌診斷中定性困難的不足，提高鑒別診斷水平。本研究結(jié)果顯示，CT聯(lián)合Syn、CgA檢查鑒別SCLC的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度分別為93.33%、94.00%、93.68%，均明顯優(yōu)于各單項檢查。

綜上所述，SCLC與NSCLC具有不同CT表現(xiàn)，且Syn、CgA表達差異顯著；CT掃描聯(lián)合Syn、CgA檢查能夠提高SCLC的鑒別診斷能力。