亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        入侵植物黃頂菊內(nèi)生細(xì)菌對(duì)蘋(píng)果輪紋病菌的拮抗篩選

        2018-09-13 09:19:02侯曉杰梁魁景歐陽(yáng)汝欣蘆站根
        中國(guó)森林病蟲(chóng) 2018年3期
        關(guān)鍵詞:輪紋病衡水內(nèi)生

        侯曉杰,梁魁景,歐陽(yáng)汝欣,蘆站根

        (衡水學(xué)院生命科學(xué)系,河北 衡水 053000)

        近年來(lái)蘋(píng)果輪紋病的危害日趨嚴(yán)重,發(fā)生頻率大幅增加,嚴(yán)重影響了我國(guó)蘋(píng)果品質(zhì)和產(chǎn)量,使果農(nóng)遭受巨大經(jīng)濟(jì)損失。我國(guó)華北、華東、東北等地蘋(píng)果輪紋病發(fā)生嚴(yán)重,國(guó)光、富士、金冠、紅月等都是易感品種[1]。目前,植物內(nèi)生菌在病蟲(chóng)害生物防治方面已經(jīng)應(yīng)用,植物內(nèi)生真菌、細(xì)菌、放線(xiàn)菌防治植物病害效果顯著。例如,利用大豆根瘤內(nèi)生細(xì)菌防治棉花枯萎病[2],桃樹(shù)根部?jī)?nèi)生細(xì)菌防治桃褐腐病[3],劍麻內(nèi)生細(xì)菌JM-3防治蘋(píng)果腐爛病[4],姜、蒜內(nèi)生菌防治蘋(píng)果輪紋病[5]等。

        衡水湖的外來(lái)入侵植物黃頂菊Flaveriabidentis,根莖發(fā)達(dá),適應(yīng)性強(qiáng),具較強(qiáng)的化感作用。黃頂菊入侵性如此強(qiáng)大,在其體內(nèi)的內(nèi)生菌與它互利共生,所以肯定具有協(xié)同作用[6]。菌株本身或分泌物具有抑制其他植物生長(zhǎng)的化學(xué)物質(zhì)。本研究以衡水湖外來(lái)入侵植物黃頂菊為材料,研究其組織內(nèi)可培養(yǎng)內(nèi)生菌對(duì)于蘋(píng)果輪紋病病菌Botryosphaeriadothidea是否有拮抗作用[7],期望找出能夠抑制蘋(píng)果輪紋病病菌生長(zhǎng)的菌株。

        1 材料與方法

        1.1 材料 黃頂菊,2015年10月6日采于衡水湖國(guó)家濕地公園,1 a生完整植株。蘋(píng)果輪紋病病菌,來(lái)源于衡水學(xué)院生命科學(xué)系園林植物學(xué)實(shí)驗(yàn)室。

        1.2 方法

        1.2.1 內(nèi)生細(xì)菌的分離、純化 用自來(lái)水沖洗黃頂菊3 min,去除植株表面附著的泥沙,室內(nèi)晾干。分別取根、莖、葉、花各5 g,無(wú)菌水清洗干凈,置于75%酒精溶液中浸泡30 s,轉(zhuǎn)至3.125%次氯酸鈉溶液中浸泡6 min,無(wú)菌水清洗5次。將各部分組織分別剪碎放入研缽中,加入10 mL無(wú)菌水,充分研磨,靜置備用。分別吸取50,100,150 μL研磨液,涂抹于NA平板上,每組織重復(fù)3次,28 ℃培養(yǎng)2~3 d。待菌落長(zhǎng)出后,觀察記錄菌落形態(tài)、邊緣光滑度、大小、顏色,挑取單菌落劃線(xiàn)純化,4 ℃保存。

        1.2.2 內(nèi)生細(xì)菌對(duì)蘋(píng)果輪紋病病菌的對(duì)峙培養(yǎng) 注入2 mL無(wú)菌水至純化的內(nèi)生菌培養(yǎng)皿內(nèi),玻璃刮棒輕輕刮取平板上的細(xì)菌,用移液器吸取渾濁液轉(zhuǎn)至三角瓶,密封瓶口后震蕩1min使液體混合均勻。用722分光光度計(jì)調(diào)整細(xì)菌懸濁液濃度,使其波長(zhǎng)665 nm下的OD值為1.000,密封口備用。用直徑1 cm的打孔器在復(fù)壯后的蘋(píng)果輪紋病培養(yǎng)基上打孔,挑取菌餅倒扣接種在新的PDA平板上。以菌餅為中心,周?chē)鶆蚍胖?個(gè)直徑1 cm的圓形滅菌濾紙片,濾紙片中心距培養(yǎng)皿邊緣約1.5 cm,每濾紙片分別接種50 μL細(xì)菌懸濁液,每種細(xì)菌重復(fù)3次。對(duì)照為無(wú)菌水。PDA平板置于28 ℃恒溫培養(yǎng)4~5 d。

        1.3 數(shù)據(jù)處理 用Excel軟件處理數(shù)據(jù)及作圖,用SPSS 17.0進(jìn)行方差分析,差異顯著性水平為5%(P<0.05)。

        抑菌率(%)=(對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑)/對(duì)照菌落直徑×100

        2 結(jié)果與分析

        2.1 內(nèi)生細(xì)菌的分離 由于分離培養(yǎng)時(shí)吸取的100,150 μL研磨液的NA平板上菌落密度過(guò)大,無(wú)法辨別單個(gè)菌落的特征,所以只對(duì)50 μL研磨液平板上的菌株進(jìn)行篩選。通過(guò)觀察,黃頂菊植株內(nèi)共分離到14株菌株(表1),其中根、莖、葉組織各分離到4株,花組織分離到2株。根、莖、葉器官的分離比率較高。

        表1 黃頂菊組織可培養(yǎng)內(nèi)生菌的分離結(jié)果

        2.2 對(duì)峙培養(yǎng) 除根3菌株外其余13株菌株都對(duì)蘋(píng)果輪紋病菌絲有抑制效果。菌株莖1、莖2、莖4、花1、花2抑菌效果與對(duì)照比較具有顯著性差異,但這5菌株之間抑制效果差異性不顯著。抑菌效果最好的莖4菌株,其真菌菌落直徑為(39.96±2.66) mm,抑菌率為33.21%(表2)。

        表2 黃頂菊組織內(nèi)可培養(yǎng)內(nèi)生細(xì)菌對(duì)蘋(píng)果輪紋病病菌的菌絲生長(zhǎng)抑制結(jié)果

        注:表中同列標(biāo)有不同字母表示組間差異顯著(P<0.05)。

        3 結(jié)論與討論

        黃頂菊植株各組織器官均能分離到可培養(yǎng)內(nèi)生細(xì)菌,且大部分菌株對(duì)蘋(píng)果輪紋病菌絲生長(zhǎng)具有抑制效果,其中莖、花組織內(nèi)生細(xì)菌的抑菌效果較好,抑菌率最高達(dá)33.21%,說(shuō)明黃頂菊內(nèi)生細(xì)菌是潛在的生防菌資源,可為進(jìn)一步篩選蘋(píng)果輪紋病的生防制劑奠定基礎(chǔ)。根3菌株的抑菌率為-1.34%,說(shuō)明該菌株對(duì)蘋(píng)果輪紋病菌絲生長(zhǎng)不但無(wú)效還起到了刺激其生長(zhǎng)的作用,后續(xù)實(shí)驗(yàn)有待驗(yàn)證。

        目前,黃頂菊的研究主要集中在生理、生態(tài)、基礎(chǔ)防除及生物活性和化學(xué)成份等方面[8-11],其生物成份和化學(xué)成份具有抗菌、殺蟲(chóng)活性[12]。本文對(duì)于黃頂菊內(nèi)生菌的研究將為外來(lái)入侵雜草研究提供新的方向。另外,黃頂菊組織內(nèi)不可培養(yǎng)內(nèi)生細(xì)菌是否存在,以及是否對(duì)蘋(píng)果輪紋病菌具有拮抗效果有待進(jìn)一步研究。

        蘋(píng)果輪紋病已成為我國(guó)蘋(píng)果產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的重要制約因子之一。生物防治作為新時(shí)期病害防治的研究熱點(diǎn),在蘋(píng)果輪紋病的防治上由于受到技術(shù)、經(jīng)濟(jì)等原因并未大規(guī)模投入生產(chǎn)。因此,黃頂菊內(nèi)生菌對(duì)蘋(píng)果輪紋病的拮抗篩選研究可成為篩選經(jīng)濟(jì)、高效生防制劑的一部分,具有廣闊的市場(chǎng)前景。

        猜你喜歡
        輪紋病衡水內(nèi)生
        衡水鴻昊企業(yè)有限責(zé)任公司
        蒼耳不同溶劑提取物對(duì)蘋(píng)果輪紋病菌的抑制效果
        3種中藥提取物對(duì)蘋(píng)果輪紋病菌的室內(nèi)抑制作用
        衡水專(zhuān)場(chǎng)(二)
        大眾文藝(2020年20期)2020-11-05 14:33:52
        植物內(nèi)生菌在植物病害中的生物防治
        蘋(píng)果輪紋病防治技術(shù)
        內(nèi)生微生物和其在作物管理中的潛在應(yīng)用
        “黨建+”激活鄉(xiāng)村發(fā)展內(nèi)生動(dòng)力
        授人以漁 激活脫貧內(nèi)生動(dòng)力
        蘋(píng)果輪紋病與炭疽病的區(qū)別
        加勒比hezyo黑人专区| 欧美一级鲁丝片免费一区| 青青草视频网站免费看| 亚洲av高清一区二区三| 东北女人毛多水多牲交视频| 一本色道久久99一综合| 成年毛片18成年毛片| 五月婷婷六月丁香久久综合| 亚洲a∨无码男人的天堂| 亚洲AV日韩AV永久无码电影| 亚洲美女av一区二区| 亚洲丝袜美腿在线视频| 国产女人高潮叫床免费视频| 香蕉成人啪国产精品视频综合网| 中文字幕精品人妻av在线| 亚洲综合一区二区三区天美传媒| 久久成人国产精品免费软件| 好吊妞人成免费视频观看| 亚洲天堂av大片暖暖| 日韩女同视频在线网站| 久久水蜜桃亚洲av无码精品麻豆| 日本加勒比东京热日韩| 国产区一区二区三区性色| 国产乱子轮xxx农村| 亚洲人成无码网站久久99热国产 | 日本免费一区二区三区影院| 国产中文字幕乱人伦在线观看| 久久精品无码一区二区乱片子| 九九热在线视频观看这里只有精品| 亚洲AV无码一区二区一二区教师| 全亚洲高清视频在线观看| 国产精品自在拍在线拍| 国产精品久久码一区二区| 在线视频精品少白免费观看| 久久无码字幕中文久久无码| 国产精品99久久免费| 日本中文字幕一区二区视频| 久久精品一区午夜视频| 亚洲熟女综合一区二区三区| 男人深夜影院无码观看| av网站大全免费在线观看|