聶黎行，張 燁，王 趙，金紅宇，戴 忠，張 毅，馬雙成

（1. 中國食品藥品檢定研究院，北京 100050；2. 鄂爾多斯市食品藥品醫(yī)療器械檢驗研究中心，內蒙古 鄂爾多斯 017000；3. 重慶市食品藥品檢驗所，重慶 401121）

輻照殺菌技術是指將物品置于適宜放射源輻射的γ射線或適宜的電子加速器發(fā)生的電子束中進行電離輻射而達到殺滅微生物的方法。60Co-γ射線輻照滅菌技術作為最常用的輻照滅菌技術，具有穿透力強、處理成本低、能耗少、殺菌效果徹底迅速、輻照劑量可任意調節(jié)、操作簡便、便于連續(xù)工作等優(yōu)點，在農業(yè)、食品、醫(yī)藥等領域均有良好的應用[1-4]。衛(wèi)生部發(fā)布的《60Co輻照中藥殺菌劑量標準》（內部試行）的通知（衛(wèi)藥發(fā)第[1997]號）規(guī)定，中藥輻照殺菌時最大吸收劑量應不大于下列數(shù)值：散劑3 kGy，片劑3 kGy，丸劑5 kGy，中藥原料粉6 kGy。允許輻照中藥材品種l98種，中成藥70種。該標準還規(guī)定：凡“通知”中未規(guī)定的中藥，原則上不允許輻照，若要輻照，則需向衛(wèi)生部藥品檢驗所報批。但實際調研結果表明，目前很多藥廠將輻射殺菌作為衛(wèi)生學不符合規(guī)定的補救措施，不考慮產品的安全性，隨意擴大輻照范圍，任意加大輻照劑量、重復輻照、操作混亂的現(xiàn)象大量存在[5-7]。

牛黃清心丸（局方）由牛黃、當歸、川芎、甘草、山藥、黃芩、炒苦杏仁、大豆黃卷、大棗、炒白術、茯苓、桔梗、防風、柴胡、阿膠、干姜、白芍、人參、六神曲（炒）、肉桂、麥冬、白蘞、蒲黃（炒）、人工麝香、冰片、水牛角濃縮粉、羚羊角、朱砂、雄黃等29味中藥材粉碎配研制成，具有清心化痰，鎮(zhèn)驚祛風的功效，用于風痰阻竅所致的頭暈目眩、痰涎壅盛、神志混亂、言語不清及驚風抽搐、癲癇[8]。該品種并非衛(wèi)藥發(fā)第[1997]號通知規(guī)定的允許輻照的品種，但處方中含熱敏性、揮發(fā)性成分，且為全原粉入藥的丸劑，若采用濕熱殺菌工藝，最終產品中有效成分可能變化較大。為控制本品微生物限度，廠家可能采用60Co-γ射線輻照滅菌。目前有關中成藥輻照前后化學成分變化的研究方興未艾[9-12]，但針對其輻照情況檢測的文獻鮮見報道。本文參照歐盟標準（EN）13751：2002[13]，采用光釋光法建立了牛黃清心丸（局方）60Co-γ輻照情況的檢測方法，以期為該藥品的質量控制和安全用藥提供參考。

1 材料

1.1 儀器

SURRC PPSL輻照食品篩查系統(tǒng)購于英國蘇格蘭大學，隨機附有直徑50 mm 的帶蓋培養(yǎng)皿（Bibby Sterilin Ltd. Stone Staffs，英國），辣椒粉陰性參照物（Mc CoRMick Ltd.，批號：SP12723，英國）、辣椒粉陽性參照物（經8.7 kGy劑量輻射，Mc CoRMick Ltd.，批號：SP12723，英國）。數(shù)據(jù)統(tǒng)計通過SPSS 16.0軟件完成。

1.2 藥品與試劑

9個廠家生產的牛黃清心丸（局方）38批次，均為2014年國家藥品監(jiān)督抽驗樣品。未經輻照的牛黃、當歸、川芎、甘草、山藥、黃芩、炒苦杏仁、大豆黃卷、大棗、炒白術、茯苓、桔梗、防風、柴胡、阿膠、干姜、白芍、人參、六神曲（炒）、肉桂、麥冬、白蘞、蒲黃（炒）、人工麝香、冰片、水牛角濃縮粉、羚羊角、朱砂、雄黃等原料藥材由被抽樣企業(yè)提供。

2 方法與結果

2.1 實驗原理[14]

中藥中大部分含有或攜帶礦物質（無機物、硅酸鹽等），當受到電離輻射（輻照）時，這些礦物質能通過束縛在結構、空隙或雜質中的載體而儲存能量。當受到激發(fā)光刺激時，儲存的能量以光子的形式釋放。光刺激后檢測到的發(fā)光量，以光子計數(shù)率（PSL）表示。光釋光法即是根據(jù)釋放光子數(shù)的多少篩查樣品是否經過電離輻射。歐盟標準（EN）13751：2002[13]規(guī)定：在采用光釋光法進行樣品篩查時，設定兩個PSL值閾值，低閾值T1=700，高閾值T2=5000。信號若低于低閾值表明樣品未經過輻照；大部分受過輻照的樣品產生很強的高于高閾值水平的信號；信號介于兩個閾值之間的中間值時，表明需進一步檢測，或用其他方法驗證。

2.2 測定參數(shù)設置和儀器校正

測量時間：60 s。分別測定暗計數(shù)、空容器、辣椒粉陰性參照物、辣椒粉陽性參照物的PSL值。暗計數(shù)應小于50，空容器和陰性參照物光子計數(shù)應小于700，陽性參照物光子計數(shù)應大于5000，以保證儀器狀態(tài)正常。

表1 樣品PSL值測定結果（n=3）

2.3 專屬性試驗

取未經輻照的原料藥材，按牛黃清心丸（局方）的處方比例，制得陰性對照樣品，平鋪于皮氏培養(yǎng)皿中，測得其PSL值僅為558，低于判定低閾值，表明處方中原料藥材本身對制劑輻照檢測無干擾。

2.4 樣品測定

取本品大蜜丸1丸，壓扁；或取水丸，研細，取約2.0 g，平鋪于皮氏皿中，依法測定。每份樣品平行制備3份供試品，測定各自PSL值并計算平均值，結果見表1。38批次樣品PSL值在282 14～272 412之間，遠大于判定高閾值5000，可初步推測所有被測樣品均經過不同程度的60Co-γ輻照滅菌處理。對所有樣品PSL測定值進行頻數(shù)分析（見圖1），結果表明，大多數(shù)樣品PSL值約90 000，近似正態(tài)分布，個別樣品PSL值大于250 000。由圖2可見，G、H、I企業(yè)樣品的PSL值明顯高于其他企業(yè)樣品，不排除上述企業(yè)采用高劑量輻照或多次輻照的可能性。

圖1 樣品PSL測定值頻數(shù)分布圖

圖2 不同生產企業(yè)樣品PSL值箱式比較圖

3 討論

光釋光法具有儀器簡單、便攜，樣品無需前處理，測定快速、廉價的優(yōu)點，但不能準確檢測樣品的輻照吸收劑量，需要加大力度，研究適合中藥的輻照情況定量檢測方法。

輻照滅菌可在常溫下消毒滅菌，不破壞易揮發(fā)成分及熱敏性物質，具有價廉、節(jié)能等優(yōu)勢。但為追逐商業(yè)利潤隨意擴大輻照范圍，任意加大輻照劑量、重復輻照，可能導致藥品化學成分發(fā)生變化，產生安全隱患。另一方面，部分企業(yè)將輻射滅菌視為衛(wèi)生學指標“過關”的最終方法，忽視凈選、清洗、炮制等生產過程的質量控制，甚至可能冒險使用霉變、劣質藥材投料，從而導致藥品質量安全風險大幅度提高。

鑒于目前中藥生產企業(yè)使用60Co-γ輻照滅菌的無序狀況，建議加強輻照對藥品安全性和有效性的影響研究，權衡利弊，完善相應的法規(guī)和藥品質量標準，加大監(jiān)管力度，避免由于濫用輻照而對患者帶來潛在的危險。