李祥山

摘 要：當(dāng)前，我國的動植物產(chǎn)品大量出口到國外，也有很多產(chǎn)品從國外進口，使得我國的植物檢疫需求不斷提升。在本文中，我們將對現(xiàn)代生物技術(shù)進行簡要的介紹，并探尋其在植物檢疫中的重要作用。

關(guān)鍵詞：現(xiàn)代生物技術(shù)；植物檢疫；重要作用

引言

我國植物檢疫技術(shù)雖然經(jīng)過了一段時間的發(fā)展，但是其檢測手段過于陳舊，已經(jīng)無法滿足當(dāng)前我動植物產(chǎn)品進出口貿(mào)易的需求，因此，我們應(yīng)注重對檢疫手段的創(chuàng)新和升級。當(dāng)前，免疫學(xué)、生物學(xué)等生物技術(shù)在植物檢疫中發(fā)揮了優(yōu)秀作用，因此在下文中，我們將對這些現(xiàn)代生物技術(shù)進行介紹和分析。

一、免疫學(xué)技術(shù)在植物檢疫中的應(yīng)用

1.免疫熒光技術(shù)

免疫熒光技術(shù)主要是以抗體作為基礎(chǔ)的檢測手段，在植物檢疫中發(fā)揮了重要作用，當(dāng)前主要用在植物組織、種子和土壤中細菌和真菌的檢測當(dāng)中。通過對免疫熒光技術(shù)的使用，能夠有效檢測出導(dǎo)致菜豆發(fā)橫生能萎蔫的病菌，并且靈敏度非常高，能夠有效對假陽性反應(yīng)問題進行解決。免疫熒光技術(shù)分為直接免疫熒光法和間接免疫熒光法兩種。其中，間接免疫熒光法的應(yīng)用范圍比較廣，能夠使一抗與含有熒光色素的二抗進行結(jié)合，他們發(fā)出的熒光能夠由免疫熒光顯微進行檢測。不過，免疫熒光技術(shù)在應(yīng)用的過程中也存在著一定的局限性，對于設(shè)備的要求比較高，設(shè)備造價比較昂貴，操作所需時間比較多，并且有的時候會受到植物和土壤中熒光的干擾，從而給觀察帶來了一定的阻礙。

2.酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)

酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)自從誕生以來，廣泛應(yīng)用在植物病毒、真菌等檢測之中，例如，在病毒方面，能夠用作種子中的大豆花葉病毒、苜蓿花葉病毒、大麥條紋花葉病毒、煙草花葉病毒、黃瓜花葉病毒、煙草環(huán)斑病毒、等病毒的診斷和檢測；真菌方面，疫霉、腐霉、黑盤菌、等真菌的ELISA試劑盒已被商業(yè)化生產(chǎn)，并已廣泛應(yīng)用。

3.免疫電鏡技術(shù)

免疫電鏡技術(shù)是從上世紀六七十年代開始投入應(yīng)用的，具有快速、準確、節(jié)約材料等特點，并且保存時間比較長，還可以郵寄，因此免疫電鏡技術(shù)當(dāng)前已經(jīng)得到廣泛的應(yīng)用，尤其是在植物病原真菌、病毒等類似檢測中得到了應(yīng)用。免疫電鏡技術(shù)與酶聯(lián)免疫法相比，雖然在靈敏度上相似，但是比酶聯(lián)免疫發(fā)更加直觀和準確，對于一些難以鑒定的木本植物病毒也能夠?qū)崿F(xiàn)檢測。免疫電鏡技術(shù)可以直接檢測感染病毒的組織抽取也，處理對病毒定性之外，還能夠用在植物粗汁液中病毒粒體的定量分析中。由于免疫電鏡技術(shù)具有非常多的優(yōu)點，因此在當(dāng)前受到了歡迎，是較為理想的檢測技術(shù)之一。

二、核酸技術(shù)在植物檢疫中的作用

核算技術(shù)最開始是在上世紀八十年代至九十年代出現(xiàn)的，剛開始利用核酸雜交技術(shù)對植物病原進行檢測，并且對核酸雜交技術(shù)和免疫學(xué)技術(shù)的優(yōu)缺點進行對比，其中能夠明確得出，核酸雜交技術(shù)不管是在速度上還是靈敏度上還是在檢測率上都比免疫學(xué)方法有著大幅度的提升。尤其是PCR技術(shù)，能夠直接對病原物序列進行檢測，從而使檢測準確性大大提升。核酸技術(shù)主要包括核酸探針、RFLP技術(shù)、PCR技術(shù)等。

1.核酸技術(shù)

核酸探針是使用經(jīng)過標(biāo)志（同位素或非同位素）并用于檢測出互補核酸序列的一段寡聚核苷酸。當(dāng)前，核酸探針技術(shù)已運用于植物病害診斷和植物病原物的檢測之中。典型的核酸雜交技術(shù)是將少批的核酸注入在硝酸纖維膜或尼龍膜上，再浸入含特異性探針的雜交液中，經(jīng)過放射顯影或酶標(biāo)顏色反響檢測。核酸雜交技術(shù)雖然在檢測病原菌方面表現(xiàn)出它的優(yōu)勢，但由于其煩瑣操作以及缺少靈敏的探針標(biāo)志而限制了其普及運用。同位素標(biāo)志靈敏度高，但同位素標(biāo)志費用高、實驗條件嚴峻，且有放射性危害，標(biāo)志好的探針在幾周內(nèi)其放射活性就衰退到不能運用，因而不宜大規(guī)模推行。非放射性的生物素抑制了這些缺陷，因而非放射生物素-親和性系統(tǒng)被運用于各種病害檢測，而在類病毒的檢測上光生物素標(biāo)志探針具有與同位素標(biāo)志一樣的靈敏度。目前運用于柑桔裂皮病檢測的3種生物素：光生物素、生物素肼標(biāo)志中，DIG標(biāo)志的靈敏度最高，運用最廣，由于非同位素標(biāo)志具有同位素標(biāo)志無與倫比的優(yōu)越性；靈敏度高、費用少、對人體無害、保管時間長并且比較穩(wěn)定，非常適宜進出口檢疫技術(shù)的需求，它必將成為一種有力的檢測工具。

2.PCR技術(shù)

PCR技術(shù)的全程叫做生物學(xué)的聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)，是一種DNA體外擴增技術(shù)，能夠?qū)⒑兴钄U增的靶DNA雙鏈經(jīng)過高溫變性成為單鏈，然而在退火中加入的寡聚合核苷酸引物與DNA模板進行結(jié)合，在經(jīng)過十幾個循環(huán)之后，靶DNA的含量將特異性增長了百萬倍，因此使得DNA分子的分析能力和檢測能力得到有效提升。由于生物學(xué)的聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)能夠快速、簡便地進行檢測，因此在植物病害診斷和病原物檢測方面發(fā)揮了非常大的作用和潛力。隨著研究的不斷深入，PCR技術(shù)在應(yīng)用的過程中需要比較昂貴的儀器設(shè)備和專業(yè)化的技術(shù)支持，當(dāng)前僅僅在實驗室中才能夠操作，難以實現(xiàn)普及和推廣。

三、結(jié)語

隨著時代的不斷發(fā)展，生物技術(shù)也實現(xiàn)了不斷地創(chuàng)新和發(fā)展，在植物檢疫中得到了更加廣泛的應(yīng)用，我們應(yīng)積極對當(dāng)前快速發(fā)展的生物技術(shù)進行了解，從而提高植物檢疫的效果。

參考文獻

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