逄 飛，周新尚，肖景惠，張慶芳，竇少華*

（1.大連大學(xué) 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，遼寧 大連 116622；2.遼寧省海洋微生物生物工程技術(shù)研究中心，遼寧 大連 116622）

尿酸氧化酶（urate oxidase）EC 1.7.3.3是參與生物體內(nèi)核酸代謝的一種重要的氧化酶。尿酸的嘌呤環(huán)能被尿酸氧化酶催化開(kāi)放，使尿酸被分解為尿囊素、二氧化碳和過(guò)氧化氫。尿酸的溶解度是尿囊素的1/10～1/5，尿酸被分解為尿囊素從而排出體外。該酶存在于哺乳動(dòng)物，昆蟲(chóng)，植物，微生物中[1-4]。但是，人類和其他高等靈長(zhǎng)類動(dòng)物由于相關(guān)基因缺失而不能產(chǎn)生尿酸氧化酶[5]。因此，尿酸才是人類和某些猿類嘌呤代謝的終產(chǎn)物。尿酸氧化酶的來(lái)源非常廣泛，尿酸氧化酶最早被SCHITTENHELM發(fā)現(xiàn)，他從牛的腎臟中提純了此酶[6]。隨著生命科學(xué)和化學(xué)的不斷發(fā)展，極大豐富了尿酸氧化酶的來(lái)源，并對(duì)尿酸氧化酶的性質(zhì)進(jìn)行研究[7]。其中，從微生物中發(fā)現(xiàn)尿酸氧化酶是尿酸氧化酶研究的重要進(jìn)步。20世紀(jì)70年代，BONGAERTS G P等[8]發(fā)現(xiàn)苛求芽孢桿菌（Bacillus fastidious）能產(chǎn)生尿酸氧化酶，并且其能把尿酸作為唯一碳源。此后，不同微生物來(lái)源的尿酸氧化酶不斷被發(fā)現(xiàn)，已經(jīng)研究了許多產(chǎn)生尿酸酶的微生物，例如枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）、銅綠假單胞菌（Pseudomona aeruginosa）、黃曲霉（Aspergillus flavus）和產(chǎn)朊假絲酵母（Candida utilis），其生產(chǎn)尿酸氧化酶的能力已經(jīng)被研究[6]。從微生物中分離出的尿酸氧化酶絕大多數(shù)都是胞內(nèi)酶。大多數(shù)的尿酸氧化酶菌株都是從土壤樣品中篩選得到的[4，9-10]，降解物著色法、水解圈法及透明圈法[11]等是較為常用的篩選方法。現(xiàn)在報(bào)道比較多的尿酸氧化酶的產(chǎn)生菌主要有芽孢桿菌、真菌、酵母等[11]，但是篩選方法大都是選擇的透明圈法，因?yàn)檫@種篩選的方法操作簡(jiǎn)單。從海洋中篩選尿酸氧化酶菌株少見(jiàn)報(bào)道。因此，本研究從大連黃海海泥中分離出一株尿酸氧化酶高產(chǎn)菌苛求芽孢桿菌（Bacillus fastidious）菌株Z7-1，通過(guò)單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)優(yōu)化其發(fā)酵條件，首先基于Plackett-Burman（PB）試驗(yàn)設(shè)計(jì)找出重要影響因子，然后經(jīng)DesignExpert.V8.0.6軟件中響應(yīng)面Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)響應(yīng)過(guò)程變量進(jìn)行數(shù)學(xué)建模及分析，進(jìn)一步優(yōu)化響應(yīng)因子，確定最優(yōu)發(fā)酵條件，目的是提高尿酸氧化酶的活力，從而為該尿酸氧化酶更深入研究及中試實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 菌株

苛求芽孢桿菌（Bacillus fastidious）Z7-1：大連黃海海域海泥中篩選出來(lái)的Z7菌株經(jīng)紫外（ultraviolet，UV）-亞硝基胍（nitrosoguanidine，NTG）復(fù)合誘變得到，保藏在遼寧省海洋微生物工程技術(shù)研究中心。

1.1.2 化學(xué)試劑

尿酸、蛋白胨、酵母膏、葡萄糖、磷酸氫二鉀、牛肉膏、葡萄糖、氯化鈉、硫酸亞鐵、硫酸鎂、瓊脂粉（均為生化試劑）：生物工程上海股份有限公司。其他實(shí)驗(yàn)所用試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.1.3 培養(yǎng)基

種子培養(yǎng)基：尿酸5 g，酵母膏3 g，NaCl 0.1 g，MgSO40.5g，K2HPO42.0g，KH2PO40.5g，pH7.5，0.1MPa滅菌20min。

發(fā)酵培養(yǎng)基：尿酸5 g，酵母膏3 g，NaCl 0.1 g，MgSO40.5g，K2HPO42.0g，KH2PO40.5g，pH7.5，0.1MPa滅菌20min。

1.2 儀器與設(shè)備

HZP-250全溫振蕩培養(yǎng)箱、DK-S26電熱恒溫水浴鍋：上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；LTI-700低溫恒溫培養(yǎng)箱：上海愛(ài)朗儀器有限公司；DHG-9070電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱：上海一恒科技有限公司；UV-2102C紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)：尼柯儀器有限公司；LDZX-40BI立式壓力蒸汽滅菌器：上海申安醫(yī)療器械廠。

1.3 方法

1.3.1 種子液制備

在無(wú)菌條件下，將斜面保藏的菌株Z7-1接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，25℃、160 r/min搖床中振蕩培養(yǎng)24 h，作為一級(jí)種子液。用移液槍吸取5%的一級(jí)種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)中，同樣條件培養(yǎng)24 h，作為二級(jí)種子液。

1.3.2 粗酶液制備方法

取發(fā)酵液8 000 r/min離心15 min，離心獲得的濕菌經(jīng)pH8.5的硼酸緩沖溶液洗滌3次以上，直至發(fā)酵液洗凈為止。將洗滌后的菌體懸浮于pH8.5的硼酸緩沖溶液中，冰浴條件下超聲波破碎，能量30%，每次破碎3s，間隙3s，破碎30min。將破碎液12 000 r/min離心15 min，上清液即為粗酶液。

1.3.3 尿酸氧化酶酶活測(cè)定方法

將粗酶溶液0.1 mL與含有2 mmol/L尿酸的0.6 mL硼酸鈉緩沖液（pH8.5，0.1 mol/L）、0.15 mL 4-氨基安替比林（30 mmol/L）、0.1 mL苯酚（1.5%）、0.05 mL過(guò)氧化物酶（15 U/mL）加入到25 mL比色管中，25℃孵育10 min。然后通過(guò)加入1.0 mL乙醇停止反應(yīng)，去離子水定容至20 mL?？瞻讓?duì)照：把粗酶液置換為硼酸鈉緩沖液。采用分光光度計(jì)測(cè)定波長(zhǎng)540 nm處的吸光度值。

尿酸氧化酶酶活單位的定義：在標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定條件下，每min可產(chǎn)生1.0 μmol H2O2的酶量為一個(gè)酶活單位（U/mL）。

1.3.4 發(fā)酵條件優(yōu)化單因素試驗(yàn)

（1）碳源、氮源優(yōu)化：分別在發(fā)酵培養(yǎng)基中加入可溶性淀粉、尿酸、蔗糖、乳糖、麥芽糖、葡萄糖作為碳源，添加量為0.5%；分別在發(fā)酵培養(yǎng)基中加入蛋白胨、酵母膏、牛肉膏、磷酸氫二銨、氯化銨、尿素作為氮源，添加量為3%。在25℃、160 r/min條件下培養(yǎng)36 h，按照酶活測(cè)定方法測(cè)定酶活，考察碳源、氮源對(duì)苛求芽孢桿菌Z7-1產(chǎn)尿酸氧化酶的影響。每個(gè)處理做3個(gè)平行。

（2）尿酸添加量分別為0.25%、0.50%、0.75%、1.00%、1.25%，酵母膏添加量分別為0.25%、0.50%、0.75%、1.00%、1.25%，K2HPO4添加量分別為0.10%、0.15%、0.20%、0.25%、0.30%；KH2PO4添加量分別為0.01、0.03%、0.05%、0.07%、0.09%的；MgSO4添加量分別為0.01%、0.03%、0.05%、0.07%、0.09%，培養(yǎng)基初始pH值分別為6.5、7.0、7.5、8.0、8.5，發(fā)酵溫度分別為10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃，轉(zhuǎn)速分別為140 r/min、150 r/min、160 r/min、170 r/min、180 r/min，裝液量分別為50 mL/500 mL、75 mL/500 mL、100 mL/500 mL、125 mL/500 mL、150 mL/500 mL、175 mL/500 mL，接種量分別為3%、4%、5%、6%、7%。在25℃、160 r/min條件下振蕩培養(yǎng)36 h后測(cè)定酶活，考察各個(gè)因素對(duì)苛求芽孢桿菌Z7-1產(chǎn)尿酸氧化酶的影響。每個(gè)處理做3個(gè)平行。

1.3.5 Plackett-Burman設(shè)計(jì)

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選取9個(gè)影響因素作為研究對(duì)象，以尿酸氧化酶酶活（Y）為響應(yīng)值，進(jìn)行試驗(yàn)次數(shù)N=12的Plackett-Burman（PB）設(shè)計(jì)，PB試驗(yàn)設(shè)計(jì)的因素與水平見(jiàn)表1。

表1 Plackett-Burman試驗(yàn)因素及水平設(shè)計(jì)Table 1 Factors and levels of Plackett-Burman experiments

1.3.6 最陡爬坡試驗(yàn)設(shè)計(jì)

根據(jù)Plackett-Burman試驗(yàn)結(jié)果中各個(gè)顯著影響因素效應(yīng)的大小來(lái)設(shè)定步長(zhǎng)及變化方向，找出峰值，快速逼近最佳值區(qū)域。

1.3.7 中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)

根據(jù)最佳爬坡試驗(yàn)結(jié)果，將酶活最高的一組作為中心組合試驗(yàn)中心點(diǎn)，運(yùn)用Minitab 15軟件進(jìn)行Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)，采用響應(yīng)面分析法對(duì)產(chǎn)酶條件參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化分析。運(yùn)用Minitab15軟件分析得到最優(yōu)結(jié)果，最后對(duì)預(yù)測(cè)值進(jìn)行驗(yàn)證。每個(gè)試驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)酵條件優(yōu)化

2.1.1 最適碳源的確定

圖1 不同的碳源對(duì)酶活的影響Fig.1 Effects of different carbon sources on enzyme activity

如圖1所示，尿酸作為唯一碳源時(shí)，菌株Z7-1產(chǎn)尿酸氧化酶的酶活最高，葡萄糖次之，可溶性淀粉、蔗糖、乳糖、麥芽糖作為碳源時(shí)，酶活很低。因此，尿酸是菌株Z7-1產(chǎn)尿酸氧化酶的最適碳源。

2.1.2 尿酸添加量的確定

圖2 不同的尿酸添加量對(duì)酶活的影響Fig.2 Effects of different uric acid addition on enzyme activity

如圖2所示，尿酸添加量從0.25%升至1.25%，尿酸氧化酶的酶活隨著尿酸添加量的增加而增高，當(dāng)尿酸添加量達(dá)到1.00%時(shí)尿酸氧化酶的酶活最高。然而當(dāng)尿酸添加量＞1.00%之后，酶活反而下降，是因?yàn)槟蛩犭y溶于水，尿酸濃度增加反而阻礙了菌株Z7-1對(duì)尿酸的利用。因此，最適尿酸添加量為1.00%。

2.1.3 最適氮源的確定

圖3 不同的氮源對(duì)酶活的影響Fig.3 Effects of different nitrogen sources on enzyme activity

如圖3所示，當(dāng)無(wú)機(jī)氮作為唯一氮源時(shí)，菌株Z7-1產(chǎn)酶酶活很低。而菌株利用蛋白胨、酵母膏、牛肉膏時(shí)酶活很高。因此菌株Z7-1產(chǎn)酶是利用的有機(jī)氮。其中將酵母膏作為氮源時(shí)酶活最高。因此，選酵母膏為最適氮源。

2.1.4 酵母膏添加量的確定

圖4 酵母膏添加量對(duì)酶活的影響Fig.4 Effects of yeast extract addition on enzyme activity

如圖4所示，隨著酵母膏添加量在0.25%～0.75%范圍內(nèi)增加，菌株產(chǎn)酶酶活也隨之增高。當(dāng)酵母膏添加量達(dá)到0.75%時(shí)酶活最高。而酵母膏添加量過(guò)高時(shí)，酶活反而下降。說(shuō)明濃度過(guò)高的酵母膏會(huì)對(duì)菌體生長(zhǎng)有一定抑制作用，進(jìn)而影響尿酸氧化酶的合成，然而酵母膏添加量過(guò)低就會(huì)影響酶的大量合成[12]。因此，最適酵母膏添加量為0.75%。

2.1.5 無(wú)機(jī)鹽最適添加量的確定

如表2所示，當(dāng)K2HPO4添加量為0.25%時(shí)，尿酸氧化酶酶活最高，為16.1 U/mL；KH2PO4添加量0.07%時(shí)尿酸氧化酶酶活最高，為16.4 U/mL，說(shuō)明適量KH2PO4和K2HPO4對(duì)該菌株產(chǎn)酶有促進(jìn)作用；MgSO4添加量0.05%時(shí)，尿酸氧化酶酶活最高，為15.8 U/mL；說(shuō)明少量的硫酸鎂對(duì)該菌株產(chǎn)酶有促進(jìn)作用。

表2 無(wú)機(jī)鹽添加量對(duì)酶活的影響Table 2 Effects of inorganic salt addition on enzyme activity

2.1.6 發(fā)酵初始pH值對(duì)產(chǎn)酶的影響

如圖5所示，當(dāng)發(fā)酵初始pH值為6.5～7.5時(shí)，菌株產(chǎn)酶酶活也隨之增高；當(dāng)發(fā)酵初始pH值為7.5時(shí)，酶活最高，為16.5 U/mL；當(dāng)發(fā)酵初始pH值＞7.5之后，酶活有所下降，過(guò)酸過(guò)堿都會(huì)影響菌株產(chǎn)酶。因此，最適發(fā)酵初始pH值為7.5。

圖5 初始pH值對(duì)酶活的影響Fig.5 Effects of initial pH value on enzyme activity

2.1.7 發(fā)酵溫度對(duì)產(chǎn)酶的影響

圖6 發(fā)酵溫度對(duì)酶活的影響Fig.6 Effects of fermentation temperature on enzyme activity

如圖6所示，當(dāng)發(fā)酵溫度為10～25℃時(shí)，菌株酶活也隨之增高；當(dāng)發(fā)酵溫度為25℃時(shí)，發(fā)酵酶活最高，為17.5 U/mL；隨著發(fā)酵溫度＞25℃之后，酶活降低。因此，最適發(fā)酵溫度為25℃。

2.1.8 轉(zhuǎn)速對(duì)產(chǎn)酶的影響

如圖7所示，酶活隨著轉(zhuǎn)速在140～160 r/min范圍內(nèi)的增加而增高；當(dāng)轉(zhuǎn)速為160 r/min時(shí)酶活最高，為17.8 U/mL；轉(zhuǎn)速＞160 r/min之后，酶活會(huì)隨之下降，過(guò)高的轉(zhuǎn)速可能影響了菌體的生長(zhǎng)。因此，最適轉(zhuǎn)速為160 r/min。

圖7 轉(zhuǎn)速對(duì)酶活的影響Fig.7 Effects of rotating speed on enzyme activity

2.1.9 裝液量對(duì)產(chǎn)酶的影響

如圖8所示，在裝液量為（50～125）mL/500mL時(shí)，菌株Z7-1產(chǎn)尿酸氧化酶的酶活隨之增加；當(dāng)裝液量為125 mL/500 mL時(shí)，酶活最大，為17.9 U/mL；當(dāng)裝液量＞125 mL/500 mL之后，酶活隨之下降。裝液量影響酶活，主要是影響菌株對(duì)溶氧的需求。裝液量為125 mL/500 mL時(shí)，能達(dá)到菌株對(duì)溶氧的需求，促進(jìn)了菌株的生長(zhǎng)，進(jìn)而促進(jìn)了菌株產(chǎn)酶。因此，最適裝液量為125 mL/500 mL。

圖8 裝液量對(duì)酶活的影響Fig.8 Effects of liquid volume on enzyme activity

2.1.10 接種量對(duì)產(chǎn)酶的影響

如圖9所示，當(dāng)接種量為3.0%～5.0%時(shí)，菌株產(chǎn)尿酸氧化酶隨接種量增大而升高；當(dāng)接種量為5%時(shí)，酶活達(dá)到最大，為17.6 U/mL；當(dāng)接種量＞5.0%之后，酶活反而下降。這是因?yàn)榕囵B(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是有限的，培養(yǎng)基中菌體數(shù)目過(guò)多也會(huì)影響菌株的生長(zhǎng)，進(jìn)而影響菌株產(chǎn)酶。因此，最佳接種量為5.0%。

圖9 接種量對(duì)酶活的影響Fig.9 Effects of inoculum on enzyme activity

2.2 Plackett-Burman設(shè)計(jì)篩選顯著因子[13-15]

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)Plackett-Burman（N=12）實(shí)驗(yàn)，對(duì)影響尿酸氧化酶發(fā)酵工藝中的9個(gè)因素的顯著性進(jìn)行考察。試驗(yàn)的設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表3，利用Minitab15軟件進(jìn)行主效應(yīng)分析，結(jié)果見(jiàn)表4。

表3 Plackett-Burman試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果Table 3 Design and results of Plackett-Burman experiments

表4 Plackett-Burman設(shè)計(jì)的各因素水平及主效應(yīng)分析Table 4 Factors,levels and significance analysis of Plackett-Burman design

由表4中的P值可知，尿酸、發(fā)酵溫度、酵母膏的P值分別為0.004、0.005、0.028，由于這三個(gè)因素的P值均＜0.05，所以這3個(gè)因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響均＞95%，達(dá)到顯著水平，在所選因素中對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響最大，其中尿酸、發(fā)酵溫度具有正效應(yīng)，酵母膏具有負(fù)效應(yīng)。因此選尿酸添加量、酵母膏添加量、發(fā)酵溫度設(shè)計(jì)響應(yīng)面試驗(yàn)。

2.3 最陡爬坡試驗(yàn)

最陡爬坡試驗(yàn)是為了確定顯著影響因素的取值逼近中心點(diǎn)以及提高尿酸氧化酶的產(chǎn)量，尿酸添加量、發(fā)酵溫度和酵母膏添加量這3個(gè)因素的變化方向和步長(zhǎng)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表5。由表5可知，3個(gè)顯著影響因素的中心點(diǎn)在第2組試驗(yàn)附近，因此確定以第2組的水平作為響應(yīng)面試驗(yàn)的中心點(diǎn)，即尿酸添加量（X1）、酵母膏添加量（X2）、發(fā)酵溫度（X3）分別為1.00%，0.75%和25℃。

表5 最陡爬坡試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 5 Design and results of the steepest ascent experiments

2.4 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)

利用上述Plackett-Burman試驗(yàn)結(jié)果，在PB試驗(yàn)和最陡爬坡試驗(yàn)確定的3因素3水平的基礎(chǔ)上，以酶活（Y）為響應(yīng)值，響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平見(jiàn)表6，設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表7。

表6 響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平Table 6 Factors and levels of response surface experiments

表7 Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 7 Design and results of Box-Behnken experiments

表8 回歸方程方差分析Table 8 Variance analysis of the quadratic model

運(yùn)用Minitab15軟件對(duì)表7中心組合試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸模型方差分析，結(jié)果見(jiàn)表8?；貧w擬合二次多項(xiàng)式得到回歸方程：Y=45.53+2.80X1+2.25X2+3.45X3-0.48X1X2+1.28X1X3-

由表8可知，該回歸模型的影響達(dá)到極顯著水平（P＜0.01），失擬項(xiàng)P值為0.106＞0.05，因而無(wú)失擬因素存在。其自變量X1，X2，X3，X2X3，X32對(duì)響應(yīng)值影響顯著（P＜0.05），其他項(xiàng)均不顯著（P＞0.05）?；貧w方程的決定系數(shù)R2=0.9661＞0.9，校正決定系數(shù)R2Adj為0.951 2＞0.9，表明響應(yīng)值變化有96.61%來(lái)源于所選變量，說(shuō)明模型擬合度較好，該回歸方程可用于代替試驗(yàn)真實(shí)點(diǎn)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行初步分析和預(yù)測(cè)[16-18]。

利用Minitab15軟件繪制響應(yīng)面曲線圖，結(jié)果見(jiàn)圖10。由圖10可知，響應(yīng)值存在最大值，經(jīng)軟件分析獲得酶活發(fā)酵條件為尿酸添加量1.14%，酵母膏添加量0.81%，發(fā)酵溫度28.1℃，軟件分析預(yù)測(cè)最大酶活為45.6 U/mL。為了便于實(shí)際操作，將發(fā)酵條件修改為尿酸添加量1.00%，酵母膏添加量0.80%，發(fā)酵溫度28℃，在此條件下重復(fù)3次驗(yàn)證試驗(yàn)，平均酶活為42.5 U/mL，與理論值接近，表明采用響應(yīng)面法優(yōu)化得到的最佳條件準(zhǔn)確可靠。優(yōu)化后的酶活比優(yōu)化前的12.1 U/mL提高了251.8%。

圖10 發(fā)酵溫度與尿酸，酵母膏添加量對(duì)酶活交互影響的曲面及等高線Fig.10 Response surface plots and contour line of effects of interaction between fermentation temperature,uric acid and yeast extract addition on enzyme activity

3 結(jié)論

本試驗(yàn)對(duì)苛求芽孢桿菌（Bacillus fastidiosus）Z7-1產(chǎn)酶條件進(jìn)行優(yōu)化。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上采用Mintab軟件設(shè)計(jì)Plackett-Burman試驗(yàn)得出尿酸、酵母膏、發(fā)酵溫度3個(gè)最重要影響因素；利用Box-Behnken模型對(duì)菌株Z7-1發(fā)酵生產(chǎn)尿酸氧化酶的培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，方差分析后表明模型擬合度良好。單因素及響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果為尿酸添加量1.00%、酵母膏添加量0.80%、K2HPO4添加量0.25%、MgSO4添加量0.05%、KH2PO4添加量0.07%、培養(yǎng)溫度28℃、轉(zhuǎn)速160r/min、接種量5%、pH7.5、裝液量125mL/500mL。通過(guò)產(chǎn)酶條件優(yōu)化尿酸氧化酶酶活由優(yōu)化前的約12.1U/mL提高到42.57U/mL，比優(yōu)化前提高了251.8%。

苛求芽孢桿菌Z7-1最適生長(zhǎng)溫度為25℃，該菌株屬于耐冷菌，發(fā)酵粗酶液最適作用溫度為25℃，屬于低溫酶。海洋環(huán)境低溫、高鹽、高壓，菌株Z7-1與其他國(guó)內(nèi)外篩選的尿酸氧化酶酶菌株相比[4]，具有適應(yīng)低溫環(huán)境（25℃），耐鹽性極好，耐高壓等優(yōu)良特征。海洋尿酸氧化酶對(duì)催化尿酸嘌呤環(huán)的氧化開(kāi)放的性質(zhì)、臨床分析和臨床藥物以及染發(fā)劑商業(yè)配方中的添加劑的制備更具有優(yōu)勢(shì)。因此，對(duì)該菌株發(fā)酵條件的研究，可為其進(jìn)一步發(fā)酵放大乃至工業(yè)化生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)。