李 魏 劉曉亭

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽(yáng) 100847)

肌肉衰減綜合征是一種以老年人骨骼肌質(zhì)量和骨骼肌力量及功能降低為主要特征的退行性病征，用以描述骨骼肌老化的進(jìn)程〔1〕。其作為一種增齡性疾病，嚴(yán)重影響老年人的身體健康和正常生活，同時(shí)還增加老年人跌倒、骨折、糖尿病、肺炎等患病風(fēng)險(xiǎn)。本研究探討藥膳干預(yù)對(duì)衰老大鼠骨骼肌抗氧化能力的影響。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng) SPF級(jí)3月齡健康雄性SD大鼠30只，體重210～240 g,購(gòu)于遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司，許可證號(hào)SCXK-(遼)2015-0001。購(gòu)入后于本學(xué)校實(shí)驗(yàn)中心動(dòng)物房IVC獨(dú)立送風(fēng)飼養(yǎng)系統(tǒng)中在SPF條件下分籠飼養(yǎng)，以國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類(lèi)飼料喂養(yǎng)，自由飲食、飲水，溫度21℃±2℃，相對(duì)濕度55%±5%。

1.2藥品及試劑 黃芪、黨參、茯苓、白術(shù)、甘草購(gòu)自沈陽(yáng)市遼河大藥房；氯化鈉注射液購(gòu)自遼寧民康制藥有限公司；D-半乳糖(gal)美國(guó)Genview公司產(chǎn)品；水合氯醛，北京Solarbio有限公司產(chǎn)品；超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)試劑盒及丙二醛(MDA)試劑盒均購(gòu)自天津市灝洋生物制品科技有限公司。

1.3衰老大鼠模型的建立 將30只大鼠隨機(jī)分為空白組、藥膳組和模型組，每組10只。空白組每日腹部皮下注射0.9%生理鹽水125 mg/kg，藥膳組和模型組每日腹部皮下注射7.5% D-gal 125 mg/kg，連續(xù)注射6 w〔2〕，建立衰老大鼠模型。將黃芪、黨參、茯苓、白術(shù)、甘草放入藥罐，加水浸泡30 min后武火煎煮20 min取汁；然后將粳米下入藥汁中，文火熬制湯汁濃稠，冷卻后濾去殘?jiān)?，存放?℃冰箱保存。藥膳組每日予以藥膳10 ml/kg灌胃，空白組和模型組每日予以米湯10 ml/kg灌胃，持續(xù)4 w。

1.4指標(biāo)檢測(cè) 末次灌胃禁食24 h后，稱(chēng)大鼠體重，用10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，行腹主動(dòng)脈取血，然后取大鼠一側(cè)股直肌肌肉組織，按試劑盒說(shuō)明檢測(cè)血清及骨直肌SOD、GSH-Px和MDA活性。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1藥膳干預(yù)后各組大鼠一般指標(biāo)變化 空白組大鼠精神狀態(tài)佳，體毛白有光澤，反應(yīng)靈敏，飲食排便正常；造模后，藥膳組與模型組大鼠體毛枯黃，有嚴(yán)重掉毛現(xiàn)象，喜臥懶動(dòng)，攝食量減少，大便稀溏；藥膳干預(yù)后，藥膳組大鼠精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，較模型組好動(dòng)，毛色相對(duì)潤(rùn)澤，攝食增加，二便情況好轉(zhuǎn)；3組大鼠體重均平緩增加〔空白組(432.82±10.28)g、模型組(437.08±13.34)g、藥膳組(444.83±14.01)g〕，但組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2各組SOD、GSH-Px活性及MDA含量變化 與空白組相比，模型組血清及股直肌SOD、GSH-Px活性顯著降低，MDA含量顯著增加(P<0.05)；藥膳組血清及股直肌SOD、GSH-Px活性顯著高于模型組，MDA含量顯著低于模型組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 各組血清及股直肌SOD、GSH-Px活性及MDA含量比較

與空白組比較：1)P<0.05；與模型組比較：2)P<0.05

3 討 論

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，脾主運(yùn)化、主統(tǒng)血、主四肢肌肉，是“氣血生化之源”、“后天之本”，在中醫(yī)論著中有諸多論述?！端貑?wèn)集注·五臟生成篇》曰：“脾主運(yùn)化水谷之精，以生養(yǎng)肌肉，故主肉”。《太平圣惠方》曰：“脾胃者，水谷之精，化為氣血，氣血充盛，營(yíng)衛(wèi)流通，潤(rùn)養(yǎng)身形，榮于肌肉也”，說(shuō)明全身肌肉都有賴于脾胃運(yùn)化的水谷精微及營(yíng)養(yǎng)滋潤(rùn)，如脾胃鍵運(yùn)，則肌肉豐滿、壯實(shí)，四肢強(qiáng)勁有力。若脾失健運(yùn)，則肌肉瘦削，甚或痿廢，進(jìn)而導(dǎo)致肌肉衰減綜合征的發(fā)生?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)角度認(rèn)為，脾主肌肉四肢、主運(yùn)化的功能與線粒體為細(xì)胞各項(xiàng)生命活動(dòng)供應(yīng)能量、為肌肉收縮提供能量的功能在某種程度上是相似的，脾主肌肉亦是通過(guò)線粒體的功能來(lái)實(shí)現(xiàn)的〔3〕。劉友章等〔4〕研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期脾虛模型大鼠線粒體含量減少，結(jié)構(gòu)遭到破壞。而通過(guò)四君子湯復(fù)健后，其線粒體含量增加，結(jié)構(gòu)恢復(fù)也接近正常，證實(shí)脾與線粒體的相關(guān)性。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，活性氧自由基(ROS)與肌肉衰減綜合征的發(fā)生有密切聯(lián)系。在骨骼肌衰老的過(guò)程中產(chǎn)生大量的自由基，導(dǎo)致骨骼肌氧化損傷，使骨骼肌細(xì)胞膜、線粒體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等發(fā)生結(jié)構(gòu)與功能改變，進(jìn)而影響Ca2+轉(zhuǎn)運(yùn)，導(dǎo)致骨骼肌的收縮功能發(fā)生變化〔5〕。正常情況下，機(jī)體內(nèi)有一整套完整的ROS防御系統(tǒng)，即包括SOD、GSH-Px、過(guò)氧化氫酶(CAT)及谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)等在內(nèi)的酶促防御系統(tǒng)，其能夠快速清除體內(nèi)多余的ROS,使機(jī)體組織免受危害。SOD為活性氧的第一道防線，其水平影響機(jī)體的抗氧化能力。SOD活性降低將導(dǎo)致自由基堆積，而大量氧自由基可攻擊生物膜中不飽和脂肪酸，導(dǎo)致脂質(zhì)過(guò)氧化物，如MDA的增加，進(jìn)而加劇細(xì)胞膜的損傷。GSH-Px的主要作用是清除脂類(lèi)氫過(guò)氧化物,保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整，保護(hù)機(jī)體免受損害。SOD、GSH-Px活性及MDA含量對(duì)監(jiān)測(cè)組織的抗氧化水平及氧化損傷起重要作用。

線粒體是產(chǎn)生氧自由基的部位,同時(shí)也是自由基的重要攻擊目標(biāo),過(guò)高的自由基水平使線粒體受到的損傷不斷累積,導(dǎo)致肌細(xì)胞抗氧化能力降低，細(xì)胞完整性遭到破壞，進(jìn)而導(dǎo)致骨骼肌的能量供應(yīng)不足、功能紊亂及肌肉衰減綜合征的發(fā)生，線粒體功能正常與否直接決定骨骼肌細(xì)胞生理功能的強(qiáng)弱。

肌肉衰減綜合征在中醫(yī)學(xué)屬于“痿證”的范疇，其病因病機(jī)多為脾胃虧虛，肌肉衰減綜合征治療原則應(yīng)為補(bǔ)脾益氣，調(diào)理脾胃。而脾與線粒體在某種程度上又極為相似。本實(shí)驗(yàn)將營(yíng)養(yǎng)支持與藥物治療相融合，選取補(bǔ)氣健脾經(jīng)典方劑-四君子湯中的黨參、茯苓、白術(shù)、甘草四味藥，加上補(bǔ)氣生肌的黃芪及粳米等組成新的藥膳方，對(duì)衰老大鼠進(jìn)行藥膳灌胃，進(jìn)而觀察骨骼肌抗氧化能力的變化。

本文結(jié)果顯示，與空白組相比，模型組血清、股直肌中SOD和GSH-Px活性降低，MDA含量增加，這是因?yàn)镈-gal致衰老大鼠與自然衰老大鼠衰老程度相似〔6～8〕，所以模型組大鼠因?yàn)槟挲g的增加，出現(xiàn)了骨骼肌抗氧化能力降低，骨骼肌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整性受損，導(dǎo)致體內(nèi)氧化損傷增加，產(chǎn)生大量氧自由基。而高水平的氧自由基又作用于線粒體，造成線粒體損傷〔9〕,進(jìn)而導(dǎo)致骨骼肌質(zhì)量和骨骼肌力量及功能的降低，促進(jìn)了肌肉衰減綜合征的發(fā)生。同時(shí)模型組大鼠抗氧化能力的降低及氧化損傷的增加，也反過(guò)來(lái)證實(shí)了注射D-gal制備衰老動(dòng)物模型這一方法的可靠性與可行性。而通過(guò)藥膳干預(yù)后，結(jié)果說(shuō)明通過(guò)補(bǔ)脾益氣能夠提高線粒體的抗氧化能力，減輕體內(nèi)的氧化損傷，減少骨骼肌的損傷，進(jìn)而延緩肌肉衰減綜合征的發(fā)生。本實(shí)驗(yàn)表明，通過(guò)補(bǔ)脾益氣藥膳對(duì)衰老大鼠進(jìn)行干預(yù)，可提高衰老大鼠的抗氧化能力，減輕氧化損傷，從而延緩骨骼肌的衰老，減緩肌肉衰減綜合征的發(fā)生。