張加雄，萬 麗，王 張，楊沮勤，朱伊婷，陳英杰，夏媛媛

目前，預防急性高原病（AMS）的化學藥物主要有碳酸酐酶抑制劑、鈣離子通道阻滯劑、利尿劑、鎮(zhèn)靜催眠劑和糖皮質(zhì)激素等，代表性藥物分別有乙酰唑胺、硝苯地平、呋塞米、地西泮和地塞米松等；預防AMS的中藥主要為補益類、活血化瘀類中藥，代表性藥物有紅景天、生脈散、復方丹參制劑等。由于AMS涉及多器官、多組織的功能改變，疾病機理錯綜復雜，中醫(yī)藥因注重“整體觀念”、“辨證論治”，相較于西醫(yī)藥物預防具有一定的優(yōu)勢。外環(huán)境的低氧低壓、空氣干燥是AMS的主要病因，AMS經(jīng)中醫(yī)辨證可歸為“氣陰虛”的范疇，因此，筆者選擇中醫(yī)治療氣陰虛的基本方“生脈散”為研究對象，對生脈散配方顆粒及其益氣、活血的加味方劑益氣生脈散（黃芪+生脈散）、活血生脈散（丹參+生脈散）配方顆粒進行抗急性缺氧方面的藥效學比較研究，為合理運用生脈散類方劑預防AMS提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要試劑 生脈散配方顆粒（自制），紅景天(四川省中藥飲片有限責任公司），丹參配方顆粒、黃芪配方顆粒（四川新綠色藥業(yè)科技發(fā)展股份有限公司）；大鼠 ALD、ANG-Ⅱ、ANP、EPO、NT-proBNP、Renin ELISA試劑盒，均由Abcam公司生產(chǎn)，北京永輝生物科技有限公司進口分裝。

1.1.2 實驗動物 SPF級SD大鼠，雌雄各半，體重180～220 g，購于成都達碩實驗動物有限公司，生產(chǎn)許可證號SCXK（川）2015-030，飼養(yǎng)于成都中醫(yī)藥大學藥學院實驗動物觀察室，實驗前適應性飼養(yǎng)1 w。

1.1.3 主要設備 FLYDWC50-ⅡA低壓氧艙（中航工業(yè)貴州風雷航空軍械有限責任公司），Multlskan Mk3酶標儀（賽默飛世爾儀器有限公司）。

1.2 實驗方法

1.2.1 動物分組與給藥 取大鼠60只，雌雄各半，隨機分成6組，每組10只，即空白組、模型組、紅景天（HJT）組、生脈散（SMS）組、益氣生脈散（YQSMS）組、活血生脈散（HXSMS）組?？瞻捉M、模型組均灌胃給予生理鹽水（10 ml/kg），其余各組分別灌胃給予紅景天水煎液（以原生藥計，劑量為1 g/kg）、生脈散配方顆粒（以原生藥計，劑量為4 g/kg）、益氣生脈散配方顆粒（以原生藥計，劑量為5 g/kg）、活血生脈散配方顆粒（以原生藥計，劑量為5 g/kg），1次/d，連續(xù)7 d。

1.2.2 急性缺氧模型[1]連續(xù)給藥7 d后，除空白組外，其余各組均置于模擬海拔5000 m的低壓艙內(nèi)，放置24 h，此期間正常供應飼料及水。

1.2.3 檢測指標 完成造模后，將各組自低壓氧艙取出，用10%水合氯醛腹腔注射（劑量為3 ml/kg），待大鼠失去意識后，取腹主動脈血液，離心，取上層血清，采用ELISA法檢測血清促紅細胞生成素（EPO）、心鈉素（ANP）、N-腦鈉鈦（NT-proBNP）、腎素（Renin）、血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)、醛固酮(ALD)的含量。

1.3 統(tǒng)計學方法 應用SPSS18.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，計量資料以±s表示，組間比較采用方差分析和兩兩比較t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

與空白組比較，其他各組血清EPO、ANP、NT-proBNP、Renin、ANG-Ⅱ、ALD 含量均顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）。但與模型組比較，HJT組、SMS組、YQSMS 組 和 HXSMS 組 的 EPO、ANP、NT-proBNP、Renin、ANG-Ⅱ、ALD 含量均較低 （P＜0.05或P＜0.01）。比較而言，在SMS組、YQSMS組和HXSMS組中，HXSMS組的EPO和ANP含量最接近空白組，其次是YQSMS組；在NT-proBNP的變化上，以HXSMS組最低（P＜0.01），其他各組差異不大（P＞0.05）。 見表1。

3 討論

ANP、NT-proBNP是反映心臟功能的重要生化標志物；腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（RASS）在維持體內(nèi)水、電解質(zhì)平衡和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定方面發(fā)揮著重要作用；高原缺氧環(huán)境會導致機體血漿EPO含量升高，進而導致紅細胞增生，血液粘稠度增高?；谝陨弦蛩?，本研究選擇血清EPO、ANP、NT-proBNP、Renin、ANG-Ⅱ、ALD為急性缺氧的藥效學研究指標。

紅景天防治AMS療效確切，目前已廣泛應用于臨床[2-3]，故本研究選擇其為陽性對照藥物。本研究結(jié)果顯示，實驗大鼠在暴露模擬海拔5000 m高原環(huán)境后， 血清 EPO、ANP、NT-proBNP、Renin、ANG-Ⅱ、ALD含量均明顯升高，而生脈散配方顆粒及加味方劑能明顯降低其含量，其中活血生脈散在降低急性缺氧大鼠血清EPO含量方面，較生脈散藥理作用更強；在降低NT-proBNP含量方面，較生脈散、紅景天藥理作用均更強，這是否表明丹參與生脈散配伍，產(chǎn)生了藥理協(xié)同作用，有待進一步研究。

表1各組急性缺氧相關生化指標比較（n=10）

查閱生脈散預防AMS的相關文獻，雖偶見臨床應用報道[4-6]，但在基礎藥理方面，研究還不夠全面、深入。而本課題較全面地研究了生脈散及其加味方劑對模擬高原環(huán)境下急性缺氧大鼠生化指標的影響，為合理應用生脈散類方劑預防AMS提供了更充分的實驗依據(jù)。