袁玉 宋宇 唐睿珠 李歡 王云娟 張娟 黃松苓 徐秋月

（1鎮(zhèn)雄縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 云南 昭通 657000）

（2昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科 云南 昆明 650031）

地貧是編碼珠蛋白的α或β類珠蛋白基因發(fā)生缺失或點(diǎn)突變，使α或β類珠蛋白鏈缺失或不足所致的遺傳性溶血性貧血，多見(jiàn)于東南亞、地中海區(qū)域,我國(guó)西南、華南一代為高發(fā)地區(qū)[1]，最常見(jiàn)的是α型和β型兩種，α-地貧基因攜帶率為2%至18%不等，β-地貧基因攜帶率為1%至9%不等[2-3]，嚴(yán)重地影響了高發(fā)地區(qū)的出生人口質(zhì)量。因此早期對(duì)廣大人群進(jìn)行地中海貧血篩查能有效地防止地貧患兒的出生，降低人群地貧基因攜帶率和發(fā)病率。云南地區(qū)一些基層醫(yī)院采用操作簡(jiǎn)單的血常規(guī)參數(shù)如紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血紅蛋白（Hb）、紅細(xì)胞平均體積（MCV）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（MCH）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）及紅細(xì)胞分布寬度（RDW）等作為地貧篩查的方法，但鮮有對(duì)紅細(xì)胞各項(xiàng)參數(shù)指標(biāo)與地貧基因型進(jìn)行相關(guān)性研究。為更好的掌握地貧不同基因型的篩查指標(biāo)特征，促進(jìn)地貧的臨床篩查及診斷，本研究通過(guò)對(duì)不同基因類型地中海貧血攜帶者紅細(xì)胞參數(shù)指標(biāo)進(jìn)行回顧性統(tǒng)計(jì)分析。

表2 不同基因型地中海貧血紅細(xì)胞參數(shù)比較（±s）

表2 不同基因型地中海貧血紅細(xì)胞參數(shù)比較（±s）

注：與對(duì)照組比較, ②P＜0.05。

基因突變類型 例數(shù) RBC Hb MCV MCH MCHC RDW-CV β0 CD41-42(-TCTT) 28 5.75±1.13② 118±21② 66.9±7.4② 20.7±2.7② 308±10② 17.7±2.5②CD17A＞T 26 5.98±1.09② 122±21② 67.1±8.9② 20.8±3.4② 309±17② 17.0±1.8②IVSI-1G＞T 2 5.58±0.18 138±13 78.4±6.5② 24.8±1.5② 316±7 13.6±0.1 β+ IVS2-654 C＞T 19 6.18±1.36② 124±24② 65.8±5.1② 20.2±1.4② 308±11② 17.5±1.4②NT28A＞G 8 5.08±0.80 115±10② 71.7±5.8② 23.0±1.9② 320±6② 16.0±1.3②HB E CD26G＞A 20 5.23±0.88② 135±25 79.3±5.3② 26.1±2.1 326±12 14.9±2.3②東南亞缺失型（α0）αα/-SEA 66 5.89±1.05② 126±20② 71.2±7.9② 21.7±2.2② 307±17② 16.4±2.7②右缺失（α+）αα/-3.7α 23 5.27±0.94② 141±26 84.7±4.9② 26.8±1.9② 316±17② 14.3±2.9②左缺失（α+）αα/-4.2α 5 5.25±0.55 134±5 79.5±4.9② 25.6±2.1② 322±7.4 13.6±0.4非缺失型（α+）αα/αQs 2 5.12±0.47 130±6 78.7±2.5② 25.4±1.1② 323±4 14.4±0.1 αα/αTCS 3 4.50±0.93 123±36② 87.7±5.0 27.3±4.5② 310±41② 17.3±7.5②αα/αWS 1 5.85 162 84.3 27.7 329 12.1對(duì)照組 - 2014.75±0.48 141±17 90.0±4.8 29.9±1.4 331±8 12.7±0.8

1.資料與方法

1.1 資料

選取2016年3月—2017年9月昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院210名地貧基因攜帶者作為研究對(duì)象，年齡1歲～71歲（中位數(shù)：30歲），其中男性81例，女性129例。另選取同時(shí)期201例健康體檢者作為對(duì)照組，女性101例，男性100例。

1.2 地中海貧血基因檢測(cè)

EDTA-K2抗凝全血樣本于天隆NP968全自動(dòng)核酸提取儀提取基因組DNA后，采用用廈門致善生物熒光PCR-熔解曲線法基因檢測(cè)試劑盒檢測(cè)α-地中海貧血的缺失型（αα/-SEA，αα/-4.2α，αα/-3.7α）和非缺失型(Hb CS，Hb WS， Hb QS)，β地中海貧血的國(guó)內(nèi)常見(jiàn)的21種突變類型，其中β+/βN10種，β0/βN10種和βE。

1.3 血常規(guī)檢測(cè)

采集EDTA-K2抗凝全血2ml，經(jīng)SYSMEX-XN2000全自動(dòng)分析儀檢測(cè)RBC，Hb，MCV，MCH，MCHC及RDW-CV。本實(shí)驗(yàn)室正常參考值為：RBC (3.5～5.5)×1012/L、HB 110～172g/L，MCH 27～35pg，MCV 82～99fl，MCHC 320～362g/L、RDW-CV 8.1～14.5%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2.結(jié)果

2.1 本次檢測(cè)210人中，α-地貧100例，β-地貧103例，αβ復(fù)合型7例。經(jīng)過(guò)血常規(guī)紅細(xì)胞各項(xiàng)參數(shù)分析，α-地貧組、β-地貧組及αβ復(fù)合組三組的RBC及RDW-CV明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），Hb、MCV、MCH、MCHC四項(xiàng)指標(biāo)明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）；β-地貧組MCV、MCHC及MCH低于α-地貧組，αβ復(fù)合組MCV低于α-地貧組（P＜0.05）。結(jié)果及比較見(jiàn)表1。

表1 不同地中海貧血血細(xì)胞參數(shù)與正常對(duì)照組比較（±s）

表1 不同地中海貧血血細(xì)胞參數(shù)與正常對(duì)照組比較（±s）

注：與對(duì)照組比較， ①P＜0.05。

例數(shù) RBC Hb MCV MCH MCHC RDW-CV β-地貧組 105 5.71±1.13① 124±22① 70.0±8.7① 22.0±3.4① 313±14① 16.7±2.3①α-地貧組 100 5.66±1.03① 130±22① 75.5±9.2① 23.3±3.1① 310±17① 15.7±3.0①αβ復(fù)合組 7 5.51±0.93① 118±16① 67.8±4.8① 21.5±1.5① 317±11① 16.1±2.2①對(duì)照組 2014.75±0.48 141±17 90.0±4.8 29.9±1.4 331±8 12.7±0.8

2.2 按照缺失或突變類型分類分析血常規(guī)參數(shù)，β-地貧中CD41-42(-TCTT)、CD17A＞T、IVS2-654 C＞T及α-地貧中αα/-SEA基因型 RBC、Hb、MCV、MCH、MCHC及RDW-CV檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照組相比均有顯著差異（P＜0.01）。其中MCV、MCH低于其他基因型， RDW-CV高于其他基因型。見(jiàn)表2。

3.討論

本次研究中α-地貧組、β-地貧組及αβ復(fù)合組三組的RBC及RDW-CV明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），與一些文獻(xiàn)報(bào)道[4-5]結(jié)果并不一致，分析原因可以發(fā)現(xiàn)本次研究回顧的基因型主要是雜合子，長(zhǎng)期的慢性貧血加之昆明地區(qū)的高海拔氣候使得紅細(xì)胞代償性增高，生成的紅細(xì)胞數(shù)量多但是質(zhì)量較差；同時(shí)由于長(zhǎng)期慢性溶血以及紅細(xì)胞代償增高，使得網(wǎng)織紅細(xì)胞、質(zhì)量差的大小不一的紅細(xì)胞以及紅細(xì)胞碎片也增多，導(dǎo)致RDW-CV值較高。

昆明地區(qū)α-地中海貧血中基因缺失突變比點(diǎn)突變更為常見(jiàn)，其中αα/-SEA所占比例最高。本次研究中αα/-SEA基因型6項(xiàng)紅細(xì)胞參數(shù)與對(duì)照組相比較均發(fā)生明顯變化，該基因型表現(xiàn)為同一條染色體上的2個(gè)α基因都缺失，導(dǎo)致形成血紅蛋白的4個(gè)α基因中的一條染色體完全不能表達(dá)合成珠蛋白鏈，因此其臨床血液學(xué)表現(xiàn)較其他幾個(gè)α-地貧基因型都更嚴(yán)重；αα/-α3.7和αα/-α4.2僅一條染色體上缺失1個(gè)α基因，引起該基因功能喪失，另3個(gè)α基因正常工作，該條染色體合成的珠蛋白只是產(chǎn)量減少，因此本研究中左/右缺失型地貧血液學(xué)表型也相對(duì)較輕，有的患者甚至沒(méi)有表現(xiàn)明顯的血液學(xué)改變。

一般認(rèn)為在非缺失型α地貧中αα/αTCS的血液學(xué)表現(xiàn)與αα/-SEA相當(dāng)[6]，本組研究中αα/αTCS組MCHC及RDWCV與αα/-SEA組相當(dāng)，而該組RBC及Hb則比其它α-地貧基因型組都更為明顯降低（P＜0.05）。但由于本次觀察αα/αTCS組樣本量過(guò)少，其血常規(guī)參數(shù)的改變的結(jié)論尚不能確立，需待將來(lái)進(jìn)一步研究討論。

β-地貧組MCV、MCH及MCHC下降幅度超過(guò)α-地貧組，與黃遠(yuǎn)真等[7]的研究結(jié)果相似，其中CD17A＞T、IVS2-654 C＞T、CD41-42(-TCTT)基因型的MCV、MCH降低幅度及RDW-CV高于其他基因型，IVS2-654 C＞T是屬于β+型突變，即β-基因的突變引起的是β-鏈合成的減少，其一般比β0突變的β珠蛋白基因完全不能合成β-鏈的基因型輕，但本次研究中IVS2-654 C＞T屬于例外。βE屬于β-突變的一種特殊類型，在張杰[8]等的研究中其在云南省的β-雜合突變中占有重要比例，在臨床上無(wú)任何貧血癥狀，血液學(xué)可表現(xiàn)為小細(xì)胞低色素。

綜上所述，MCV、MCH及RDW-CV結(jié)果與基因表型有一定的相關(guān)性，對(duì)于臨床醫(yī)師在進(jìn)行地貧遺傳咨詢時(shí)有很好的指導(dǎo)意義，對(duì)于地貧防控也具有重要意義。