張 娜 朱 峰 張 強 王立平 陳 鑫

河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院東院區(qū)實驗診斷科，河北滄州 061000

臨床治療過程中，臨床醫(yī)師往往需要依據(jù)檢驗結(jié)果對患者的病情及治療效果進行評估，藥物對檢驗結(jié)果的干擾也會影響醫(yī)師做出正確判斷，此時正確分析藥誤對檢驗結(jié)果的影響顯得尤為重要[1]。對臨床實驗室而言，降低或避免藥物對檢驗結(jié)果的影響，明確干擾物質(zhì)所產(chǎn)生的檢驗結(jié)果的差異是很有必要的[2-3]。藥物對檢測結(jié)果的影響主要包括分析干擾（體外影響）和生物學(xué)干擾（體內(nèi)影響）,藥物和(或)其代謝物能干擾另一物質(zhì)定量分析的一個或多個階段[4]。對于干擾的定義，Kroll[5]認為：樣品中的一種能改變結(jié)果準確值的物質(zhì)，會影響分析物的濃度或活性。近年來，藥物對臨床檢驗項目的影響越來越普遍，其中中藥制劑對檢測結(jié)果的影響也日漸受到重視。本研究根據(jù)臨床實驗室標準化委員會CLSI的EP7-A2[6]文件做了喜炎平注射液對常規(guī)生化項目檢測方法有無干擾的篩選試驗[7],實驗表明，其對乳酸脫氫酶產(chǎn)生干擾，進而研究喜炎平對乳酸脫氫酶產(chǎn)生干擾的劑量效應(yīng)。

1 資料與方法

1.1 儀器

HITACHI7600-010全自動生化分析儀

1.2 試劑

乳酸脫氫酶檢測試劑盒，德賽診斷系統(tǒng)（上海）有限公司生產(chǎn)，批號00003288，線性范圍5.4 ～1300U/L，檢測方法為乳酸底物法。

1.3 實驗藥品

喜炎平注射液（江西青峰藥業(yè)，每支裝2mL：50mg），取5支備用。喜炎平的用量為肌內(nèi)注射：成人一次50～100mg，2～3次/d。靜脈點滴，250～500mg/d，0.9%氯化鈉注射液或5%葡萄糖注射液稀釋后進行滴注。兒童：按體重每日5～ 10mg/kg（0.2～ 0.4mL/kg），不得超過 250mg，0.9%氯化鈉注射液或5%葡萄糖注射液100～250mL稀釋后靜脈點滴，30～40滴/min，一次/d。

1.4 基質(zhì)血清

選取50名健康體檢正常的健康人群，要求采血前三天禁止服用任何藥物[8]，采集血液標本后，3500轉(zhuǎn)/分，離心5min，將血清混合作為基礎(chǔ)樣本。

1.5 測定重測次數(shù)

對基礎(chǔ)樣本連續(xù)測定10次，將測定得到乳酸脫氫酶的標準差（s）計算出來。根據(jù)CLIA’88對允許誤差范圍的標準設(shè)定乳酸脫氫酶的臨床可接受范圍，設(shè)定LDH連續(xù)測定10次后計算得出平均值的20%[9]作為其有臨床意義的差別標準dmax，計算dmax/s。計算基礎(chǔ)混合樣本標準差為2.5，計算乳酸脫氫酶的dmax/s值為14，查閱EP7-A2中的dmax/s與重測次數(shù)對應(yīng)表[1]，依據(jù)此表得出重測次數(shù)為3次。見表1。

表1 dmax/s與重測次數(shù)對應(yīng)表

1.6 操作步驟

取喜炎平注射液，用注射用水稀釋成5%、15%、25%、50%、75%、100% 濃度濃度。將各個濃度的藥物與基礎(chǔ)樣本按1∶20的比例混合作為實驗樣本，混合后的實驗樣本稀釋倍數(shù)為1∶400（含穿心蓮內(nèi)酯磺化物0.0625mg/mL），1∶133（含穿心蓮內(nèi)酯磺化物0.188mg/mL），1∶80（含穿心蓮內(nèi)酯磺化物0.313mg/mL），1∶40（含穿心蓮內(nèi)酯磺化物0.625mg/mL），1∶27（含穿心蓮內(nèi)酯磺化物0.926mg/mL），1∶20（含穿心蓮內(nèi)酯磺化物1.25mg/mL），設(shè)置樣本對照，即將注射用水與基礎(chǔ)樣本按照1∶20的比例進行混合。將制備好的樣本對照與不同稀釋倍數(shù)的實驗樣本在HITACHI-7600-010全自動生化分析儀上按照濃度由低到高的順序?qū)ζ淙樗崦摎涿高B續(xù)測定3次。

1.7 統(tǒng)計學(xué)處理

使用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)處理，得出乳酸脫氫酶的干擾效應(yīng)點估計值（dobs）、干擾臨界值（dc）以及該項目的干擾率。

1.8 干擾判斷

干擾效應(yīng)點估計值（dobs）=實驗樣本各項目平均值-對照樣本各項目平均值，

（dnull為無效假設(shè)規(guī)定的值，通常為0，S表示標準差，α=0.05，Z1-α/2=1.96，n表示重測次數(shù)），如|dobs|＞dc則該濃度的藥物對乳酸脫氫酶存在干擾，相反，如|dobs|＜dc,則該藥物濃度對乳酸脫氫酶無干擾[1]。

1.9 干擾率計算

2 結(jié)果

2.1 計算干擾臨界值

基礎(chǔ)樣本乳酸脫氫酶測定結(jié)果中x=180.9，S=2.5，依據(jù)干擾臨界值公式得出dc=2.83。

2.2 喜炎平注射液對LDH的干擾分析

喜炎平注射液對LDH（乳酸底物法）的測定有正向干擾，干擾率按稀釋倍數(shù)由低到高分別為19.8%，14.7%，9.4%，5.7%，2.1%，0.77%。產(chǎn)生干擾的最低稀釋倍數(shù)為1：133（含穿心蓮內(nèi)酯磺化物0.188mg/mL），dobs=3.6，dc=2.83。

2.3 喜炎平注射液濃度與LDH干擾效應(yīng)點估計值的關(guān)系

表 達 式 為：Y=0.7768X2-12.069X+45.31，R2=0.9981。見表2。

3 討論

喜炎平注射液是一種中藥制劑，從穿心蓮葉中制取出穿心蓮乙素，經(jīng)過磺化后制成磺酸鹽注射溶液，其有效成分為穿心蓮內(nèi)酯磺化物。通過改變穿心蓮內(nèi)酯的空間結(jié)構(gòu)，阻斷DNA復(fù)制，使細菌和病毒受到抑制[10]。與傳統(tǒng)中藥注射劑比較，喜炎平注射劑成分很明確，穿心蓮內(nèi)酯磺化物具有抗病毒、提高機體免疫力的作用[11]。

表2 不同濃度的喜炎平注射液對LDH的分析干擾（n=3）

喜炎平注射液有相對較好的安全性及有效性[12]，其對上呼吸道感染、手足口、小兒腹瀉、老年帶狀皰疹、哮喘，但用藥時也需要注意遲發(fā)性過敏反應(yīng)的發(fā)生[13-18]。喜炎平在兒童疾病治療過程中，一定注意用量。劑量過大、頻率過高都會加大不良反應(yīng)出現(xiàn)的概率，需按患者年齡、體質(zhì)規(guī)范用藥[19]，臨床用藥時需遵循辨證論治原則，合理用藥，安全用藥[20]。

本研究通過體外干擾篩選和劑量效應(yīng)試驗得知，不同濃度的喜炎平注射液對乳酸脫氫酶測定（乳酸底物法）有一定的正向干擾，干擾原因尚未明確，亟待進一步研究。實驗表明，注射喜炎平注射液作為干擾物對乳酸脫氫酶測定的最低干擾稀釋倍數(shù)為1：133（含穿心蓮內(nèi)酯磺化物0.188mg/mL）。隨著中藥制劑的發(fā)展，越來越多的中藥制劑應(yīng)用于臨床治療過程中，中藥注射劑在起到治療作用的同時，也存在不少的安全隱患[21]，特別是隨著醫(yī)學(xué)檢驗檢測技術(shù)水平的提高，臨床醫(yī)師對患者病情的療效觀察越來越依賴檢測數(shù)據(jù)，這使臨床醫(yī)師選擇的用藥劑量及用藥后的檢測時間段就成了反映患者檢測項目結(jié)果與患者自身真實病情的關(guān)鍵所在。此外，藥品說明中可寫入該藥物對檢驗結(jié)果的影響，從而使檢驗結(jié)果更加準確地反映患者的自身情況[22]。在日常的檢測工作中，檢驗人員需與臨床醫(yī)師多溝通，了解患者的用藥方案，對可疑結(jié)果應(yīng)建議停掉可能產(chǎn)生干擾的藥物一段時間后再進行復(fù)查[23]。作為一名檢驗人員，我們更應(yīng)該注意分析前的質(zhì)量保證，加強與臨床科室的溝通，以便更好的服務(wù)患者，避免誤診，提高患者的治愈率。