黃 亮，班立桐**，王 玉，楊紅澎，孫 溪，王旭峰

（1.天津農(nóng)學(xué)院農(nóng)學(xué)與資源環(huán)境學(xué)院，天津300384；2.天津農(nóng)學(xué)院食品科學(xué)與生物工程學(xué)院，天津300384；3.天津綠圣蓬源農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司，天津300400；4.天津?yàn)I海德勝農(nóng)業(yè)科技有限公司，天津300300）

真姬菇（Hypsizygus marmoreus） 又名玉蕈、斑玉蕈、荷葉離褶傘，因其具有獨(dú)特的蟹鮮味，故有人稱它為蟹味菇、海鮮菇等[1]。真姬菇含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸和維生素，具有防止便秘、抗氧化、提高免疫力、延年益壽等功效[1]。作為大眾消費(fèi)食品，其貨架期長，是1種高蛋白、低熱量、低脂肪的保健食品[2]。

根據(jù)商品化分類分為白色品系和灰色品系，白色品系又稱“白玉菇”、“玉龍菇”，深受市場歡迎，且多為工廠化栽培。目前真姬菇的工廠化生產(chǎn)主要采用固體菌種，一般需要經(jīng)過母種→原種→栽培種→栽培出菇，經(jīng)歷的生產(chǎn)周期需要達(dá)到170 d，而液體菌種生產(chǎn)流程為：母種→液體菌種培養(yǎng)→栽培出菇，生產(chǎn)流程大大簡化，且時(shí)間大幅縮短。但液體菌種并未被推廣，其原因在于不夠穩(wěn)定。真姬菇的菌絲長滿培養(yǎng)料后不會馬上扭結(jié)出現(xiàn)原基，必須達(dá)到生理成熟后，在適宜溫度下才能出菇。本研究對液體菌種生產(chǎn)真姬菇工藝進(jìn)行了不同后熟期的栽培比較，為真姬菇的工廠化生產(chǎn)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌種

真姬菇HB-1：天津綠圣蓬源農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司生產(chǎn)用菌種。

1.2 培養(yǎng)基

母種培養(yǎng)基：PDA培養(yǎng)基。

液體菌種培養(yǎng)基：葡萄糖2%、玉米漿1%、K2PO40.25%、MgSO40.05%、VB110 mg·L-1，初始pH為5。

栽培料配方：木屑14%、棉籽殼40%、玉米芯15%、麩皮21%、玉米粉5%、豆粕5%。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 液體菌種培養(yǎng)

按配方配制液體培養(yǎng)基，250 mL三角瓶裝液量為70 mL，滅菌后接種斜面菌種，置于25℃、150 r·min-1的搖床上培養(yǎng)8 d～10 d，至產(chǎn)生均勻致密的菌絲球時(shí)停止發(fā)酵，備用。

1.3.2 拌料、裝瓶、滅菌

按配方加入對應(yīng)原料進(jìn)行機(jī)器拌料，同時(shí)將培養(yǎng)料的含水量調(diào)到65%，每瓶裝干料185 g，進(jìn)行高壓蒸汽滅菌后運(yùn)至接種室。1.3.3 接種、發(fā)菌及后熟

采用接種槍接種，每個(gè)栽培瓶接種5 mL的液體菌種，再將菌瓶搬入發(fā)菌室內(nèi)培養(yǎng)。溫度控制在20℃～23℃，空氣相對濕度保存持在70%～80%，培養(yǎng)室二氧化碳濃度控制在0.4%以下，在黑暗或弱光下發(fā)菌28 d左右即為滿瓶。后熟期設(shè)置為23 d、30 d、37 d、44 d，分別記為1號、2號、3號、4號，以工廠正常生產(chǎn)的固體菌種作為對照CK。

1.3.4 搔菌、出菇管理及采收

采用搔菌機(jī)搔菌，注水后放入生育室，溫度保持在14℃～16℃，相對濕度保持在90%～95%，采用分階段的方法控制CO2[4]。當(dāng)菇蓋直徑達(dá)到3 cm～5 cm，柄長8 cm～15 cm，子實(shí)體飽滿緊實(shí)時(shí)采收。不同處理各挑取6瓶，進(jìn)行子實(shí)體農(nóng)藝性狀考察和產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)，計(jì)算生物轉(zhuǎn)化率。

2 結(jié)果與討論

2.1 不同后熟期的真姬菇生長周期

相同的液體菌種接入栽培瓶后進(jìn)行發(fā)菌，真姬菇的滿瓶天數(shù)基本相同，進(jìn)一步監(jiān)測不同后熟期的真姬菇的各生理時(shí)期的時(shí)間，并與使用固體菌種的栽培瓶進(jìn)行比較，結(jié)果見圖1。

圖1 不同處理的真姬菇的生產(chǎn)周期Fig.1 The production cycle time of Hypsizygus marmoreus with different treatments

由圖1可見，縮短液體菌種的后熟期可使整個(gè)生產(chǎn)周期縮短，處理1的整個(gè)生長周期為108 d，較之固體菌種的生產(chǎn)周期118 d縮短了10 d。結(jié)果表明，后熟期縮短會導(dǎo)致現(xiàn)蕾和采收晚，可能是由于真姬菇菌絲生長的積溫不夠?qū)е?；但成熟期的過分延長并不能促使真姬菇的采收提前，這應(yīng)該是真姬菇的生育期有較為穩(wěn)定的生理控制。

2.2 不同后熟期的真姬菇子實(shí)體的農(nóng)藝性狀調(diào)查

考察了4種處理真姬菇子實(shí)體的農(nóng)藝性狀，結(jié)果見表1。

由表1可以看出，處理1和CK子實(shí)體的叢高和菌蓋直徑大致相同，說明處理1和CK的真姬菇性狀相似，但生物轉(zhuǎn)化率存在差異，兩者相差12.3%。值得注意的是，本試驗(yàn)中處理3和處理4的生物轉(zhuǎn)化率均超過了100%，這在目前報(bào)道的文獻(xiàn)中是最高的[5-8]，由此可見液體菌種在真姬菇生產(chǎn)中具有巨大潛力。但從子實(shí)體形態(tài)上看，處理3和處理4的菌柄較長，形成了所謂的“海鮮菇”[9-10]，且菌蓋偏大，在后期包裝和運(yùn)輸中容易導(dǎo)致菌蓋破裂。

表1 不同后熟期生產(chǎn)真姬菇的農(nóng)藝性狀和生物轉(zhuǎn)化率Tab.1 Agronomic characters and biological efficiency of Hypsizygus marmoreus with different after-ripening time

3 結(jié)論

采用液體菌種栽培真姬菇可縮短真姬菇的生產(chǎn)周期，有利于工廠化企業(yè)降低生產(chǎn)成本；適宜的后熟期有利于真姬菇生物轉(zhuǎn)化率的提高，最高可比固體菌種生產(chǎn)的真姬菇生物轉(zhuǎn)化率增加43.9%。綜合比較液體菌種生產(chǎn)真姬菇不同后熟期處理結(jié)果，說明液體菌種的應(yīng)用將是未來真姬菇工廠化生產(chǎn)的趨勢，其技術(shù)還有待進(jìn)一步研究。