左秀玲 ，樸金龍， 薛豐田 ， 趙喜新

1.鄭州市第一人民醫(yī)院內(nèi)分泌科(鄭州 450004)，2.河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科(開封 475000)， 3.鄭州頤和醫(yī)院內(nèi)分泌科(鄭州 450047)，4.河南中醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院針灸科 (鄭州 450008)

主題詞 糖尿病, 2型/中醫(yī)藥療法 @黃連素 動物實驗 大鼠

隨著人民生活水平不斷提高，生活方式的改變，環(huán)境污染的加劇，生活壓力的增大，糖尿病的發(fā)病率逐年增加，嚴(yán)重危害人類健康及生命安全[1]。降糖西藥可控制血糖水平，改善胰島素抵抗，降低糖尿病及并發(fā)癥的發(fā)生，但長期服藥副作用大。中藥降糖作用溫和持久，療效確切安全，副作用小，通過多效應(yīng)、多靶點降低患者血糖水平，還控制及延緩其并發(fā)癥的發(fā)生，成為治療糖尿病的研究熱點[2]。作為黃連的主要生物活性成分，黃連素可降糖調(diào)脂，提高胰島素敏感性，對糖尿病及糖尿病并發(fā)癥療效確切[3-4]，副作用少、價格低廉。本研究通過觀察黃連素對2型糖尿病大鼠血脂調(diào)節(jié)作用及對IL-6、IL-10及CRP水平影響，探討其對 2 型糖尿病的作用機(jī)制，為黃連素應(yīng)用于臨床治療糖尿病提供實驗依據(jù)。

資料與方法

1 實驗動物 80只SD大鼠購自長沙市天勤生物技術(shù)有限公司，許可證號：SCXK(湖)2014-0010，雌雄各半，體重(163.27±12.31)g。

2 方 法

2.1 分組與模型制備:80只大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為對照組20只，喂標(biāo)準(zhǔn)飼料，高脂高糖飲食組60只，8周后，按40 mg/kg的劑量1%STZ腹腔注射，維持原飲食2周，依據(jù)空腹血糖和胰島素結(jié)果，共得到T2DM模型大鼠56只，隨機(jī)分為模型組和黃連素組。

2.2 給藥方法:黃連素組給予黃連素(國藥準(zhǔn)字：H11020962)125 mg/kg灌胃，正常組及模型組同時給予同等容量的生理鹽水。三組每天灌胃1次，連續(xù)4周。

2.3 評定指標(biāo):①試驗過程中記錄大鼠的飲食量、飲水量、尿量、體重及狀態(tài)。②處死大鼠后，留取血清標(biāo)本測定空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、白細(xì)胞介素10(IL-10)、C反應(yīng)蛋白(CRP)。試劑盒購自上海恒遠(yuǎn)生化試劑有限公司。

結(jié) 果

1 三組大鼠癥狀的變化比較 見表1。與正常組比較，模型組和黃連素組均出現(xiàn)糖尿病“三多一少”癥狀，體毛欠光澤，精神萎靡不振，行動遲緩。經(jīng)黃連素治療后，以上情況得到明顯改善。

表1 三組大鼠“三多一少”癥狀的變化比較

注： 與正常組相比，*P<0.05;與模型組相比，#P<0.05

2 三組大鼠FBG、TG、TC水平比較 見表2。正常組FBG、TG、TC水平低于模型組和黃連素組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；黃連素組FBG、TG、TC水平低于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表2 三組大鼠FBG、TG、TC水平比較(mmol/L)

注： 與正常組相比，*P<0.05;與模型組相比，#P<0.05

3 三組大鼠CRP、IL-6、IL-10的變化比較 見表3。模型組和黃連素組的CRP和IL-6水平高于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；黃連素組CRP和IL-6水平低于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；模型組和黃連素組IL-10的水平低于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；黃連素組 IL-10水平高于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表3 三組大鼠CRP、IL-6、IL-10的變化比較

注： 與正常組相比，*P<0.05;與模型組相比，#P<0.05

討 論

2型糖尿病是由于胰島素分泌減少或胰島素相對不足及胰島素缺陷所引起的糖代謝紊亂，繼發(fā)脂肪和蛋白質(zhì)代謝障礙的疾病。多飲、多食、多尿、體重減輕為主要臨床表現(xiàn)。中醫(yī)稱本病為“消渴病”，飲食失節(jié)，情志失調(diào)，勞倦過度，久坐久臥都可內(nèi)傷脾胃，郁怒傷肝，氣血郁滯，痰濕阻滯，導(dǎo)致胃腸積熱，肝氣郁結(jié)，傷陰耗氣，引起糖尿病發(fā)病。糖尿病的基本病機(jī)是脾胃肝腎同病，郁熱虛損，導(dǎo)致全身臟腑器官絡(luò)脈瘀結(jié)[5]。瀉火、生津、滋陰、補(bǔ)腎、化瘀、通絡(luò)為本病的治療原則。治療本病的機(jī)制為刺激胰島 B 細(xì)胞分泌胰島素，改善胰島素抵抗，抑制糖異生，減緩微血管病變等。

黃連素可促進(jìn)β細(xì)胞修復(fù)和分泌，增加胰島素的生物活性，改善胰島素抵抗，降低交感神經(jīng)活性，抑制糖異生，促進(jìn)外周組織的葡萄糖酵解，抗升血糖激素，促進(jìn)脂類代謝，降糖降血脂，清除氧自由基，抗血小板聚積，改善糖尿病癥狀，起到治療2型糖尿病的作用[6-7]。本實驗中，黃連素治療后，黃連素組大鼠的空腹血糖、TG及TC水平明顯優(yōu)于模型組，糖尿病“三多一少”的癥狀明顯改善，提示黃連素增加肝臟超氧化物歧化酶活性，抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)，提高機(jī)體抗氧化清除自由基能力，促進(jìn)脂類的代謝，改善脂質(zhì)紊亂，顯著降低糖尿病大鼠的血脂水平，抑制糖異生和促進(jìn)糖酵解產(chǎn)生，提高機(jī)體對葡萄糖的耐受量，改善了胰島素抵抗，從而降低血糖，改善糖尿病癥狀。動物實驗表明，黃連素抑制RIP140調(diào)控通路效應(yīng)，增加血漿脂聯(lián)素而降低瘦素，改善內(nèi)臟白色脂肪組織異常的糖脂代謝，減輕脂沉積，改善血糖血脂，增強(qiáng)胰島素敏感性[8]。戴建峰等將2型糖尿病模型大鼠隨機(jī)分為黃連素高劑量組、黃連素低劑量組、優(yōu)降糖組和模型組，經(jīng)過4周的治療后，與模型組相比，黃連素組2型糖尿病大鼠“三多一少”癥狀及精神狀態(tài)明顯改善，空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯明顯降低，與本文的研究結(jié)果一致[9]。

研究顯示，炎癥因子可能是胰島素抵抗發(fā)生的致病介質(zhì)，參與糖尿病的發(fā)生和發(fā)展[10]。IL-10 通過抑制炎性反應(yīng)，調(diào)節(jié)機(jī)體組織糖、脂肪代謝，可預(yù)防2型糖尿病的發(fā)生。CRP通過調(diào)節(jié)核轉(zhuǎn)錄因子KB介導(dǎo)的炎性反應(yīng)，加重胰島素抵抗，造成內(nèi)皮功能紊亂，促進(jìn)轉(zhuǎn)移抑制因子的產(chǎn)生，促進(jìn)糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展。IL-6增加脂肪細(xì)胞的溶解，對B細(xì)胞產(chǎn)生毒副作用，誘導(dǎo) B 細(xì)胞凋亡，干擾細(xì)胞胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，誘發(fā)胰島素抵抗[11-13]。本研究中，模型組和黃連素組的CRP和IL-6水平高于正常組，IL-10的水平低于正常組，黃連素組的CRP和IL-6水平低于模型組，IL-10的水平高于模型組，表明黃連素可改善大鼠的炎癥因子水平，減輕炎癥反應(yīng)。

綜上所述，通過本實驗我們發(fā)現(xiàn)黃連素能有效改善2型糖尿病大鼠的炎癥因子水平，改善胰島素抵抗，有效改善血糖血脂水平，改善臨床糖尿病癥狀，且安全性較高。