郭建超　李　亮　許華釗　樊福好*

（1農(nóng)業(yè)部種豬質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心，廣東廣州 510500；2廣東省畜牧技術(shù)推廣總站，廣東廣州 510500）

豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）是圓環(huán)病毒科的成員之一，屬共價(jià)閉環(huán)單股DNA病毒，口鼻傳播是該病毒的主要傳播途徑，感染豬的口鼻分泌物、唾液、乳汁、尿液和精液中亦有病毒檢出[1]，現(xiàn)已證實(shí)是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）的重要病原之一。PMWS癥狀的出現(xiàn)可能必須有其他因素的參與，如豬瘟病毒、豬細(xì)小病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬偽狂犬病毒等，這些病原的共同感染或其他應(yīng)激因素刺激才會(huì)導(dǎo)致PCV2感染豬發(fā)展為PMWS。PCV2現(xiàn)呈隱性感染趨勢(shì)，對(duì)豬的生產(chǎn)性能的正常發(fā)揮有著極大的影響，Young[2]研究表明注射PCV2疫苗的豬群比未注射疫苗的豬群每頭豬可多獲益5.90美元。

1　材料方法

1.1　樣品采集

調(diào)查的樣品來(lái)自2017年下半年華南地區(qū)26個(gè)規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)的保育豬，用頸靜脈抽血的方法采集血液樣品，并用動(dòng)物血液保護(hù)液保存于4℃冰箱。

1.2　儀器耗材

采用POCKIT智能型手提式核酸分析儀，DNA與RNA共同提取套組（tacoTMDNA/RNA Extraction Kit），檢測(cè)試劑組采用POCKIT PCV2 Detection Kit POCKIT（豬圓環(huán)病毒二型檢測(cè)試劑組）、POCKIT PRRSV-CN Detection Kit POCKIT（豬生殖與呼吸綜合癥病毒-中國(guó)株檢測(cè)試劑組）、POCKIT PRRSV-NA Reagent Set POCKIT（豬生殖與呼吸綜合癥病毒-北美株檢測(cè)試劑組）。

1.3　試驗(yàn)方法

核酸提取按照金瑞鴻捷公司提供的DNA與RNA共同提取套組（tacoTMDNA/RNA Extraction Kit）操作手冊(cè)進(jìn)行，核酸的擴(kuò)增按照1.2中三種不同試劑組的操作要求進(jìn)行。

2　結(jié)果分析

2.1　PCV2病毒感染情況

本次共檢測(cè)來(lái)自26個(gè)豬場(chǎng)的375份血清學(xué)樣品，感染PCV2的陽(yáng)性場(chǎng)有23個(gè)，陽(yáng)率性88.46%；陽(yáng)性場(chǎng)中豬只PCV2的感染率從0.00%～85.71%；檢測(cè)的375份樣品中，有142份檢測(cè)到PCV2病毒，總體感染率達(dá)37.87%，檢測(cè)情況見(jiàn)表1。

2.2　PCV2感染情況和日齡的關(guān)系

由圖1可知，抗原陽(yáng)性率7周齡為26.92%（7/26）、8周齡為 46.48%（33/71）、9周齡為 38.83%（73/188）、10周齡為 32.20% （19/59）、11周齡為32.26%（10/31），感染趨勢(shì)呈先升后降。抗體陽(yáng)性率7周齡為73.08%（19/26）、8周齡為95.77%（68/71）、9周齡為 94.68%（178/188）、10周齡為 98.31%（58/59）、11周齡為90.32%（28/31），總體抗體陽(yáng)性率為93.60%（351/375）。

圖1　PCV2感染率、抗體陽(yáng)性率隨日齡變化情況結(jié)果

2.3　不同PRRSV豬群PCV2感染情況

PRRSV抗原陰性豬只有178頭，其中PCV2陽(yáng)性豬只57頭，PCV2感染率為32.02%；PRRSV抗原陽(yáng)性豬只有197頭，其中PCV2陽(yáng)性豬只85頭，PCV2感染率為43.15%。表明不同豬群感染率不同，PRRSV陽(yáng)性群體PCV2感染率更高。

2.4　不同品種豬只PCV2的感染狀況

大白豬、杜洛克豬、長(zhǎng)白豬PCV2抗原陽(yáng)性頭數(shù)分別為63頭、45頭、34頭，感染率分別為40.91%（63/154）、32.61%（45/138）、40.96%（34/83）。

3　結(jié)論

目前豬圓環(huán)病毒可分為3個(gè)基因型PCV1、PCV2、PCV3，其中PCV1無(wú)致病性，PCV2是當(dāng)今流行的基因型。根據(jù)基因組大小不同，PCV2又分為PCV2a、PCV2b、 PCV2c、 PCV2d、 PCV2e， 其 中 PCV2c、PCV2e很少被報(bào)道，PCV2b和PCV2d為國(guó)內(nèi)的優(yōu)勢(shì)流行株。覃艷然[3]2015年對(duì)廣西地區(qū)的284份豬淋巴結(jié)及肺組織樣品檢測(cè)，結(jié)果顯示PCV2陽(yáng)性率達(dá)50.7%，對(duì)45份陽(yáng)性樣品測(cè)序得知有6株為PCV2a、39株為PCV2b。徐朋麗等[4]2016年對(duì)來(lái)自河南的21份PCV2陽(yáng)性樣品分析發(fā)現(xiàn)，16株屬于PCV2d、5株屬于PCV2b。曹啟明[5]在2015至2016年間采集病死豬病料用PCR技術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)27株P(guān)CV2，其中7株屬于PCV2b型、1株屬于PCV2a型，其余19株為PCV2d。PCV3作為新型豬圓環(huán)病毒，已在國(guó)內(nèi)流行傳播。Zhai等[6]對(duì)全國(guó)各地PCV3的流行情況調(diào)查顯示，吉林為100%（8/8）、廣東為44.29%（62/140）、山東為7.69%（2/26）、甘肅為 3.75% （6/160）、廣西為 8.82%（3/34）、四川為 13.85% （9/65）、云南為 1.04%（1/96）、內(nèi)蒙古為23.33%（7/30）。其中廣東地區(qū)感染率最高，需要引起重視，該地區(qū)大型種豬企業(yè)較多，PCV3的流行可能與從海外引進(jìn)種豬有著千絲萬(wàn)縷的關(guān)系。

表1　PCV2病毒感染情況統(tǒng)計(jì)表

本次檢測(cè)華南地區(qū)健康豬只的375份血清樣品中PCV2感染率達(dá)37.87%，26個(gè)場(chǎng)中有23個(gè)陽(yáng)性場(chǎng)，場(chǎng)內(nèi)感染率最高的達(dá)85.71%。另?yè)?jù)報(bào)道，2014至2015年江蘇、浙江、安徽3省的健康豬群的感染率為31.20%[7]?？梢?jiàn)國(guó)內(nèi)一些地區(qū)PCV2感染率已相當(dāng)高，防控形勢(shì)嚴(yán)峻。PCV2的隱形感染狀態(tài)，相當(dāng)于在豬群中埋藏了一顆不定時(shí)炸彈，其他病原感染或豬群應(yīng)激都有可能成為導(dǎo)火索。研究表明PRRSV、細(xì)小病毒和豬支原體均能增加PCV2陽(yáng)性豬體內(nèi)病毒的復(fù)制，誘發(fā)表現(xiàn)出圓環(huán)病毒病相關(guān)的臨床癥狀[8,9]。本文對(duì)不同PRRSV群體PCV2感染情況的調(diào)查，也印證了上述研究，在PRRSV陽(yáng)性群體中PCV2的感染率相應(yīng)增高。

本文對(duì)PCV2抗體陽(yáng)性率和日齡關(guān)系的研究發(fā)現(xiàn)，從7周齡開(kāi)始抗體陽(yáng)性率上升，在8、9周齡趨于穩(wěn)定，10周齡陽(yáng)性率達(dá)到高峰，11周齡略有下降。從7周齡PCV2病原感染率開(kāi)始上升，8周齡達(dá)到高峰后下降，11周齡稍有升高，8周齡感染率較高可能由于7周齡時(shí)抗體陽(yáng)性率較低，病原感染壓力高，病毒在豬群內(nèi)迅速傳播導(dǎo)致；8周齡后隨抗體陽(yáng)性率升高穩(wěn)定，抗原陽(yáng)性率開(kāi)始降低。

本文的調(diào)查結(jié)果表明，豬對(duì)圓環(huán)病毒的易感程度與品種有關(guān)，長(zhǎng)白豬可能最易感（40.96%），杜洛克豬抵抗力最高（32.61%）。周繼勇等[10]2004年應(yīng)用間接免疫熒光技術(shù)檢測(cè)血清，發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)白豬陽(yáng)性率為44.83%，杜洛克豬為33.33%，大約克豬介于其間。Opriessnig等[11]也研究發(fā)現(xiàn)，與杜洛克、大白豬相比，長(zhǎng)白豬對(duì) PCV2相關(guān)疾病易感性較高?？梢?jiàn)不同品種的豬對(duì)同一病原的易感性不同。