鐘陽青，陳艷清，肖　翔，郭馥艷，閔琴琴

(1.廣東省東莞市塘廈醫(yī)院檢驗(yàn)科　523722；2.廣東省東莞市塘廈醫(yī)院婦科　523722； 3.廣東省深圳市中醫(yī)院病理科　518033)

人乳頭瘤病毒(HPV)是一種雙鏈環(huán)狀DNA病毒，也是乳頭瘤空泡病毒，歸屬乳多空病毒科[1]。根據(jù)致癌風(fēng)險(xiǎn)的大小，HPV分為低危型和高危型兩大類，高危型HPV(HR-HPV)主要有HPV16、18、26、31、33、35、52、56、58 等亞型。研究表明HPV感染與宮頸癌密切相關(guān)[2]。宮頸癌是威脅全球女性健康的最常見的惡性腫瘤之一，有報(bào)道顯示全球每年約有宮頸癌新發(fā)病例52.8萬，與宮頸癌相關(guān)的死亡例數(shù)達(dá)26.6萬，其中 85%的病例發(fā)生在發(fā)展中國家，全球每年約有1/4左右的新發(fā)病例在我國發(fā)生[3]。研究表明HR-HPV 持續(xù)感染約 8～24個(gè)月將導(dǎo)致宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)，經(jīng)過8～12年可進(jìn)展為宮頸癌[4]。HR-HPV感染導(dǎo)致CIN，發(fā)展到癌是一個(gè)漫長(zhǎng)的過程，在這個(gè)漫長(zhǎng)的過程中陰道微環(huán)境可能在其中扮演著重要的角色[5]。本研究通過觀察陰道微環(huán)境的變化與HR-HPV感染的相關(guān)性，為臨床疾病的診療提供客觀依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇2016年1月至2017年5月來東莞市塘廈醫(yī)院婦科門診就診的宮頸細(xì)胞學(xué)檢測(cè)陰性的患者2 945例，年齡21～48歲，平均(28.32±5.17)歲。

1.2標(biāo)本采集HPV標(biāo)本：將標(biāo)本刷在子宮頸和外口順時(shí)針旋轉(zhuǎn) 5 圈，收集子宮頸脫落細(xì)胞，置入保存液中。陰道微環(huán)境檢驗(yàn)標(biāo)本：用 2 根無菌棉拭子留取陰道側(cè)壁上1/3分泌物，其中一支用于陰道病五聯(lián)檢，另一支加0.9%的生理鹽水1 mL用于顯微鏡檢查。

1.3儀器及試劑HPV檢測(cè)采用Thermo基因擴(kuò)增儀，試劑使用深圳亞能公司的試劑，能檢測(cè)HR-HPV17種(16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82)，低危型HPV6種(6、11、42、43、81、83)；陰道病五聯(lián)檢試劑使用北京中生金域診斷技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)的愛必維試劑盒，能檢測(cè)過氧化氫(H2O2)、唾液酸苷酶(sNa)、白細(xì)胞酯酶(LE)、葡萄糖醛酸苷酶(Gus)、凝固酶(GA)。

1.4檢測(cè)方法HPV檢測(cè)、陰道病五聯(lián)檢嚴(yán)格按照廠家說明書的規(guī)定操作；外陰陰道假絲酵母菌性陰道炎(VVC)和滴蟲性陰道炎(TV)的檢測(cè)使用加了0.9%生理鹽水的棉簽，在玻璃片上涂片，使用400倍顯微鏡檢測(cè)。

1.5診斷標(biāo)準(zhǔn)HPV檢測(cè)出高危型為HR-HPV感染；H2O2、sNa陽性為需氧菌性陰道炎(AV)，H2O2、LE陽性+Gus、GA一項(xiàng)或兩項(xiàng)陽性為細(xì)菌性陰道炎(BV)，H2O2、sNa、LE陽性+Gus、GA一項(xiàng)或兩項(xiàng)陽性為AV+BV混合感染；顯微鏡檢測(cè)觀察到假絲酵母菌、滴蟲診斷為相應(yīng)陰道炎；H2O2陽性其余陰性為單純H2O2缺乏，H2O2和LE陽性其余陰性為單純H2O2、LE陽性；以上任意兩項(xiàng)陽性為混合感染。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)使用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

2.1陰道微環(huán)境改變與HR-HPV感染2 945例標(biāo)本中有1 957例陰道微環(huán)境改變，發(fā)生率為66.45%；HR-HPV感染468例，感染率為15.89%，其中陰道微環(huán)境改變的HR-HPV感染率為384例(19.62%)，陰道微環(huán)境正常者的HR-HPV感染率為84例(8.5%)，陰道微環(huán)境改變者HR-HPV感染率與陰道微環(huán)境正常者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1　　各類型陰道微環(huán)境改變與HR-HPV感染的關(guān)系

注：與陰道微環(huán)境正常比較，*P<0.05

2.2各類型陰道微環(huán)境改變與HR-HPV感染的關(guān)系1 957例陰道微環(huán)境改變的患者中AV、BV、VVC、TV、單純H2O2缺乏、單純H2O2和LE陽性的分別為 302例(15.43%)、578例(29.54%)、276例(14.10%)，225例(11.50%)、246例(12.57%)、330例(16.86%)，其中存在混合感染的情況，AV通常與BV、VVC混合，VVC、TV通常與BV混合，總混合例數(shù)為439例，占22.43%；AV、BV、VVC、TV陽性者，單純H2O2缺乏者，單純H2O2和LE陽性者，混合感染者HR-HPV感染率與陰道微環(huán)境正常者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；AV、TV陰性者HR-HPV感染率與其他各類型比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；BV、VVC陰性者HR-HPV感染率與其他類型比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；混合感染者與BV者比較HR-HPV感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

3　討　　論

陰道微環(huán)境為陰道內(nèi)正常的定植菌群、宿主免疫能力、體內(nèi)外環(huán)境與宮頸陰道解剖結(jié)構(gòu)之間構(gòu)成的動(dòng)態(tài)平衡的微生態(tài)系統(tǒng)。正常條件下，陰道微環(huán)境中優(yōu)勢(shì)菌如乳桿菌等占主導(dǎo)地位，乳桿菌分泌乳酸、H2O2及細(xì)菌素等，維持陰道的酸性環(huán)境，并殺死部分條件致病菌，維持陰道微環(huán)境平衡狀態(tài),當(dāng)陰道微環(huán)境被打破時(shí)，可能造成一系列下生殖道疾病[6-8]。有研究報(bào)道陰道微環(huán)境改變?nèi)鏐V、滴蟲感染、假絲酵母菌、乳酸桿菌數(shù)量減少或功能降低等都會(huì)影響HPV的感染率[9-10]。

本研究共納入2 945例標(biāo)本，其中陰道微環(huán)境改變的有1 957例(66.45%)，HR-HPV感染468例(15.89%)，陰道微環(huán)境改變者HR-HPV感染率與陰道微環(huán)境正常者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明陰道微環(huán)境改變與HR-HPV感染有關(guān)。李東燕等[6]對(duì)3 861例標(biāo)本進(jìn)行分析也得出相同結(jié)果。AV、BV、VVC、TV、單純H2O2缺乏、單純H2O2和LE陽性的患者HR-HPV感染分別為78例(25.83%)、184例(31.86%)、83例(30.11%)、56例(24.92%)、62例(25.24%)、94例(28.48%)，與陰道微環(huán)境正常者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)?；旌闲完幍牢h(huán)境改變患者HR-HPV感染率明顯升高，與陰道微環(huán)境正常者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。夏玉潔等[11]對(duì)149例HR-HPV感染、宮頸細(xì)胞學(xué)陰性患者和165例健康者HPV陰性、細(xì)胞學(xué)陰性患者的研究表明，BV、AV、VVC、pH>4.5及乳酸桿菌減少與HR-HPV感染有關(guān)。VIEIRA-BAPTISTA等[12]的研究表明AV與宮頸癌的發(fā)生有關(guān)，是宮頸癌的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，但是與HPV感染率無關(guān)，目前對(duì)AV感染與HR-HPV感染的報(bào)道較少且存在差異，因此需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本研究。H2O2、LE被認(rèn)為是反映陰道乳酸桿菌功能和數(shù)量的指標(biāo)，本研究表明此兩項(xiàng)中的一項(xiàng)陽性或兩項(xiàng)均陽性與HR-HPV感染有關(guān)，與以往的研究有相同也有差異[7,11]。此外本次還發(fā)現(xiàn)VVC、TV與HR-HPV感染有關(guān)，亦與以往的研究有相符也存在差異[7,11，13]。有研究報(bào)道TV合并BV HR-HPV感染率降低，BV合并VVC感染HR-HPV感染率升高[11]。對(duì)于混合感染對(duì)HR-HPV的研究需要進(jìn)一步研究。

綜上所述，陰道微環(huán)境改變與HR-HPV感染有關(guān)，尤其是BV、VVC和混合感染者的HR-HPV升高較明顯。臨床需要重視陰道微環(huán)境改變的治療，以達(dá)到預(yù)防HR-HPV感染的目的，進(jìn)而降低宮頸癌的發(fā)生率。