胡恒貴，秦淑國，歐雁冰，方高潔

(皖北煤電集團總醫(yī)院檢驗科，安徽宿州 234000)

原發(fā)性肝癌是人體常見的惡性腫瘤，并有逐年上升趨勢，其中肝細(xì)胞癌占95%以上，病情進(jìn)展快，惡性程度高，治療難度大。原發(fā)性肝癌在早期無明顯的臨床癥狀，當(dāng)出現(xiàn)臨床癥狀時已經(jīng)是中晚期，已錯過了手術(shù)的機會[1]。臨床上對于原發(fā)性肝癌的預(yù)警尤為重要[2]。如何早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療原發(fā)性肝癌是當(dāng)前醫(yī)療技術(shù)急需解決的問題。多種血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌診斷具有重要價值，可以彌補單一項目靈敏度和特異度低的不足。本研究主要通過對甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白異質(zhì)體-3(AFP-L3)、高爾基蛋白73(GP73)和透明質(zhì)酸(HA)血清水平進(jìn)行檢測分析，進(jìn)一步探討這4項指標(biāo)單一檢測及聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的診斷及與其他肝病的鑒別價值。

1　資料與方法

1.1一般資料收集2014年1至2016年7月在本院進(jìn)行治療的122例肝病患者的臨床資料和血清學(xué)檢測結(jié)果。依據(jù)肝病種類分組：原發(fā)性肝癌組36例，其中男21例、女15例，年齡42～73歲；肝硬化組46例，其中男33例、女13例，年齡25～72歲；慢性肝炎組40例，其中男25例、女15例，年齡27～59歲。各類肝病患者均經(jīng)臨床結(jié)合免疫學(xué)、B超、CT檢查確診。肝硬化和肝炎的診斷參照2010年中華醫(yī)學(xué)會肝病分會、感染病學(xué)分會制定的《慢性乙型肝炎防治指南》的標(biāo)準(zhǔn)[3]。原發(fā)性肝癌患者均經(jīng)過超聲影像學(xué)、病理組織證實，診斷符合全國肝癌學(xué)術(shù)會議制訂的《原發(fā)性肝癌臨床診斷與分期標(biāo)準(zhǔn)》[4]。選取同期健康體檢者50例作為對照組，其中男35例、女15例，年齡31～77歲。4組研究對象的性別、年齡等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2儀器及方法所有被檢測者均在早晨采集空腹靜脈血3 mL，標(biāo)本經(jīng)3 000 r/min離心10 min，分離血清后于當(dāng)日完成檢測。GP73檢測試劑和耦聯(lián)有小扁豆凝集素微球的AFP-L3親和吸附離心管由北京熱景生物技術(shù)有限公司提供。AFP-L3的純化按照參考文獻(xiàn)[5]進(jìn)行，HA、原始血清AFP和純化后AFP-L3檢測由深圳新產(chǎn)業(yè)化學(xué)發(fā)光分析儀完成，儀器配套試劑由該公司提供，GP73檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)，具體操作方法均參照試劑盒進(jìn)行嚴(yán)格操作。

2　結(jié)　　果

2．14組間HA、AFP、AFP-L3、GP73水平的比較原發(fā)性肝癌組的HA、AFP、AFP-L3、GP73水平較慢性肝炎組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；原發(fā)性肝癌組的AFP、AFP-L3水平較肝硬化組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；原發(fā)性肝癌組的HA、GP73水平與肝硬化組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；肝硬化組的HA、AFP、AFP-L3、GP73水平較慢性肝炎組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2ROC曲線分析結(jié)果以非肝癌患者為對照，繪制HA、AFP、AFP-L3、GP73在原發(fā)性肝癌診斷中的ROC曲線，見圖1。HA、AFP、AFP-L3、GP73的臨界值分別為216.3 ng/mL、314.1 IU/mL、26.8 IU/mL和137.4 ng/mL，曲線下面積(AUC)分別為0.691、0.712、0.790和0.611。

圖1　以非肝癌血清標(biāo)本為對照，各項指標(biāo)診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線分析

表1　　4組研究對象中HA、AFP、AFP-L3、GP73水平比較

注：與慢性肝炎組比較，*P<0．05；與肝硬化組比較，△P<0．05

2．3各指標(biāo)單項及聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的診斷價值從表2可以看出，單項檢測中，AFP-L3靈敏度和特異度最高，分別為76.4%和83.1%。在聯(lián)合檢測中，HA、AFP、AFP-L3、GP73四項聯(lián)合檢測的靈敏度和特異度分別為89.5%和91.7%，高于其他任一組合。

表2　　HA、AFP、AFP-L3和GP73聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌診斷價值比較

3　討　　論

原發(fā)性肝癌的早期診斷缺乏金標(biāo)準(zhǔn)，腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測在原發(fā)性肝癌的診斷中發(fā)揮著重要的作用。AFP是診斷原發(fā)性肝癌的傳統(tǒng)標(biāo)志物，廣泛用于原發(fā)性肝癌的診斷、療效監(jiān)測，然而其診斷靈敏度、特異度均較低，有許多的原發(fā)性肝癌患者血清AFP持續(xù)濃度低值，而部分慢性肝炎和肝硬化患者AFP水平中度升高，所以AFP輕度、中度增高很難區(qū)分肝癌與良性肝病。本研究中，原發(fā)性肝癌組AFP的靈敏度為58.8%，特異度為77.9%，顯示較低的靈敏度和特異度，在良、惡性肝臟腫瘤方面存在一定的局限性。

AFP根據(jù)與LCA的親和力不同分為AFP-L1(主要存在于慢性肝炎和肝硬化患者)、AFP-L2(主要存在于孕婦)和AFP-L3(主要存在于細(xì)胞性肝癌患者)，AFP-L3為肝癌細(xì)胞特有。近年來AFP-L3越來越被國際公認(rèn)為靈敏度高于AFP的診斷標(biāo)志物，許多學(xué)者均對其診斷原發(fā)性肝癌的價值給予很高評價。有研究顯示AFP-L3在診斷原發(fā)性肝癌時特異度達(dá)90.0%以上,靈敏度為70.0%～75.5%[6]。本研究也顯示血清AFP-L3在診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為76.4%,特異度為83.1%，可見,AFP-L3在診斷原發(fā)性肝癌無論是靈敏度還是特異度都優(yōu)于AFP,而且本研究顯示，原發(fā)性肝癌組患者血清AFP-L3水平較肝硬化組和慢性肝炎組患者高，這一結(jié)果與文獻(xiàn)[7]報道結(jié)果相似。本研究中AFP、AFP-L3聯(lián)合檢測的靈敏度為76.4%,特異度為86.1%，在特異度方面優(yōu)于AFP。AFP、AFP-L3聯(lián)合檢測成為原發(fā)性肝癌診斷和診療、肝癌與良性肝病鑒別診斷的常用指標(biāo)[8]。

GP73為高爾基體的一種跨膜糖蛋白，主要表達(dá)在人類多種正常組織的上皮細(xì)胞，在肝硬化和肝癌細(xì)胞中也表達(dá)上調(diào)。最近國內(nèi)文獻(xiàn)報道肝硬化患者的GP73大量表達(dá)而且高于肝癌患者，本研究以非肝癌患者的標(biāo)本(包括慢性肝炎、肝硬化)為對照，結(jié)果顯示肝硬化組的GP73水平高于原發(fā)性肝癌組，但兩者之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，與文獻(xiàn)[9]報道一致。表明GP73對肝癌的鑒別診斷價值不大，這與GP73在原發(fā)性肝癌、肝硬化患者中水平高有關(guān)。

HA是肝細(xì)胞外間質(zhì)中蛋白多糖的一個組成部分。當(dāng)肝組織受損時，HA的合成增多、降解減少，致血清中HA的水平增高。HA與肝組織纖維化的分期呈正相關(guān)，可作為測定活動性肝纖維化和肝損害的定量指標(biāo)。莊燕等[10]報道肝纖維化時HA變化最大，明顯升高，是反映各型肝病肝纖維化和炎性改變最靈敏的指標(biāo)，并且在肝硬化和肝癌患者中也維持在較高水平。本研究顯示，肝硬化組和原發(fā)性肝癌組血清中HA的水平明顯高于慢性肝炎組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而肝硬化組和原發(fā)性肝癌組之間的HA水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，可能與肝硬化向原發(fā)性肝癌不斷進(jìn)展有密切關(guān)系。

綜上所述，聯(lián)合檢測AFP、AFP-L3、GP73和HA 4項腫瘤標(biāo)志物極大地提高對早期肝硬化甚至原發(fā)性肝癌的靈敏度和診斷率，彌補單項檢測的不足，降低原發(fā)性肝癌的漏檢率，為臨床診斷和治療原發(fā)性肝癌提供可靠的參考價值。