王莎莎，趙 凌，蔡廣知*

（長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春 130117）

1 介 紹

炙甘草為甘草的炮制加工品，即將甘草飲片。照蜜炙法（通則0213）炒至黃色至深黃色，不粘手時(shí)取出，晾涼。炙甘草性味甘，平。歸心、肺、脾、胃經(jīng)。具有補(bǔ)脾和胃，益氣復(fù)脈的功效[1]。炙甘草主要含三萜類、二氫黃酮類及查爾酮類成分。蜜制后，甘草苷和甘草酸含量下降，同時(shí)產(chǎn)生醛糖衍生物等化學(xué)成分[2]。研究表明甘草素為甘草主要活性成分之一，具有抗癌[3]、預(yù)防糖尿病的應(yīng)激反應(yīng)[4]等活性，甘草素的提取分離及分析方法也日益受到關(guān)[5]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)15批次炙甘草的性狀特點(diǎn)進(jìn)行描述，對(duì)顯微特征、薄層進(jìn)行鑒別，對(duì)水分、總灰分、酸不溶性灰分和含量進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果，對(duì)炙甘草質(zhì)量進(jìn)行質(zhì)量分析。

2 方法與結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)材料

2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

DHG-9070型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；SHZ-D（Ⅲ）循環(huán)水式真空泵（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）；安捷倫1100高效液相（安捷倫有限公司）；KQ-50B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑

正丁醇、乙酸乙酯、甲酸、乙醇、濃硫酸（北京化工廠）；冰乙酸（西隴化工股份有限公司）；甲醇（Fisher Chemical）；乙醚（天津天泰精細(xì)化學(xué)品有限公司）。

2.1.3 實(shí)驗(yàn)試藥

樣品1（內(nèi)蒙，8 1 6 00 11 9 1）；樣品2（內(nèi)蒙，817030931）；樣品3（內(nèi)蒙，161201）；樣品4（內(nèi)蒙，160601）；樣品5（內(nèi)蒙，170522）；樣品6（內(nèi)蒙，170201）；樣品7（內(nèi)蒙，170521）；樣品8（甘肅，20161109）；樣品9（甘肅，20171101）；樣品10（甘肅，170512）；樣品11（甘肅，170905）；樣品12（甘肅，1709030）；樣品13（甘肅，170031）；樣品14（甘肅，171209）；樣品15（甘肅，180102）。

2.2 實(shí)驗(yàn)過(guò)程與結(jié)果

2.2.1 性狀

性狀考察，多數(shù)批次炙甘草為類圓形或橢圓形。外表皮灰棕色或紅棕色，微光澤，縱皺紋，外皮松緊不一。橫切面為黃色至深黃色，具形成層環(huán)，射線呈放射狀。微黏性，焦香氣，味甜。炙甘草直徑在0.419～2.517 cm范圍內(nèi)，厚度在3.01～6.80 mm范圍內(nèi)。性狀如圖1-4所示。

圖1 炙甘草 甘肅 170702

圖2 炙甘草 甘肅 20170608

圖3 炙甘草 內(nèi)蒙 161201

圖4 炙甘草 內(nèi)蒙 817030931

2.2.2 顯微鑒別

觀察可見(jiàn)纖維成束，壁厚，微木化，薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶，晶鞘纖維。草酸鈣方晶多見(jiàn)，呈長(zhǎng)方形、類方形等形狀。具緣紋孔導(dǎo)管較大，紋孔排列緊密，呈橢圓形。偶可見(jiàn)網(wǎng)紋導(dǎo)管，開(kāi)口平而圓。木栓細(xì)胞多角形，紅棕色，微木化。如圖5-8。

2.2.3 薄層色譜鑒別

稱炙甘草粉末（三號(hào)篩）約1 g，乙醚40 mL，回流1 h，過(guò)濾。30 mL甲醇重提，回流1 h，濾過(guò)蒸干，加水40 mL溶解。正丁醇提取3次，正丁醇液蒸干，5 mL甲醇溶解，作為供試品溶液。稱甘草對(duì)照藥材1 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。精密稱甘草酸單銨鹽對(duì)照品，制成每1 mL甲醇含2 mg的對(duì)照品溶液。如圖9-11。

圖5 炙甘草晶纖維

圖6 炙甘草具緣紋孔導(dǎo)管

圖9

圖1 0

圖1 1

圖7 炙甘草木栓細(xì)胞

圖8 炙甘草草酸鈣方晶

按2015版中國(guó)藥典（通則0502）試驗(yàn)。乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸、水=（15:1:1:2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，10%硫酸乙醇105℃下加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，紫外光燈下檢視結(jié)果。

如圖可見(jiàn)，供試品的色譜中，對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，會(huì)顯現(xiàn)出顏色相同的熒光斑點(diǎn)；對(duì)照品色譜的相應(yīng)位置上，可以看到相同的橙黃色的熒光斑點(diǎn)，符合2015版中國(guó)藥典的標(biāo)準(zhǔn)。在相同點(diǎn)樣量和展開(kāi)的條件下，不同批次的藥材薄層鑒別所顯示的點(diǎn)顏色深淺有細(xì)微的差別。

2.2.4 水分測(cè)定

稱炙甘草粉末（二號(hào)篩）2～5 g，平鋪于扁形稱量瓶。其余步驟按水分檢查法（2015年版《中國(guó)藥典》四部通則0832第二法）規(guī)定操作，根據(jù)減失重量，計(jì)算供試品的含水量（%）。

表1 水分測(cè)定結(jié)果（n，%）

如表可見(jiàn)，1 5批炙甘草樣品中水分含量在6.22%～8.27%之間，2015版中國(guó)藥典中規(guī)定的炙甘草水分≤10.0%，15批藥材水分測(cè)定結(jié)果均合格。

2.2.5 灰分測(cè)定

2.2.5.1總灰分測(cè)定法

稱炙甘草粉末（二號(hào)篩）2～3 g，放入坩堝。按灰分檢查法（2015年版《中國(guó)藥典》四部通則（2302））根據(jù)所得殘?jiān)闹亓浚?jì)算供試品的總灰分的含量（%）。

表2 總灰分及酸不溶性灰分結(jié)果（n，%）

續(xù)表2

2.2.5.2酸不溶性灰分測(cè)定法

取2.2.5.1項(xiàng)下坩堝，加10 mL稀鹽酸。參照2015年版《中國(guó)藥典》四部通則（2302）規(guī)定操作，根據(jù)所得殘?jiān)闹亓?，?jì)算供試品酸不溶性灰分的含量（%）。

數(shù)據(jù)見(jiàn)表2，結(jié)果顯示，15批炙甘草藥材的總灰分含量為3.41%～4.13%，酸不溶性灰分含量為0.86%～1.41%，符合2015版中國(guó)藥典所要求得標(biāo)準(zhǔn)。

2.2.6 含量測(cè)定

參照2015年版《中國(guó)藥典》（0512）測(cè)定。

2.2.6.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動(dòng)相A：乙腈，流動(dòng)相B：0.05%磷酸溶液；檢測(cè)波長(zhǎng)為237 nm。按照甘草苷峰理論板數(shù)計(jì)算，不低于5000。

2.2.6.2對(duì)照品溶液的制備

精密稱甘草酸銨和甘草苷對(duì)照品。分別制成每1 mL70%乙醇試劑含甘草酸0.2 mg、甘草苷20 μg的溶液（甘草酸重量=甘草酸銨重量/1.0207）。

2.2.6.3供試品溶液的制備

精密稱取炙甘草的粉末（過(guò)三號(hào)篩）約0.2 g，放到具塞的錐形瓶中，70%乙醇試劑100 mL，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，冷卻，稱重，70%乙醇補(bǔ)足失重，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.6.4樣品測(cè)定

分別稱取15批炙甘草樣品適量，按2.2.6.3項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，按2.2.6.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定。含量見(jiàn)圖12-13。

藥典規(guī)定，甘草酸不少于2.0%，甘草苷不少于0.5%。分析15批炙甘草得知，13批炙甘草含量明顯不合格，僅2批炙甘草的含量合格，說(shuō)明大部分市售炙甘草含量不符合2015版中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)。

圖1 2 炙甘草中甘草苷含量

圖1 3 炙甘草中甘草酸單銨鹽含量

3 結(jié) 論

炙甘草質(zhì)量評(píng)價(jià)的結(jié)果分析，13批炙甘草的含量不符合2015版中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)，僅有2批含量較合格。根據(jù)結(jié)果可見(jiàn)，不同批次的炙甘草飲片的質(zhì)量大部分為不合格產(chǎn)品，不符合2015版中國(guó)藥典的標(biāo)準(zhǔn)，僅少部分炙甘草飲片的質(zhì)量合格。原因可能有：1.購(gòu)買(mǎi)的炙甘草飲片為各大藥房購(gòu)買(mǎi)的飲片，其貯藏環(huán)境和貯藏條件不符合貯藏要求，導(dǎo)致

炙甘草質(zhì)量有所影響，貯藏時(shí)常常會(huì)因?yàn)闈穸?、溫度、避光和空氣流通等條件不當(dāng)出現(xiàn)飲片質(zhì)量下降的問(wèn)題；2.炙甘草是甘草的炮制加工品，原藥材含量不合格會(huì)直接導(dǎo)致其炮制加工品含量較低，甚至不符合藥典標(biāo)準(zhǔn)，或者在炮制加工過(guò)程中凈選、藥用輔料、火候、翻炒時(shí)間等掌握不當(dāng)出現(xiàn)炙甘草含量降低，導(dǎo)致市場(chǎng)流通的炙甘草大部分不合格。