楊健莉, 王 猛, 李兆陽, 鄭志紅

(中國醫(yī)科大學實驗動物部, 遼寧 沈陽10001)

實驗動物是生命科學研究的重要對象和材料，作為活的試劑和度量衡被廣泛應用于高等醫(yī)藥院校及綜合性大學進行教學實驗和科學研究[1]。在多數(shù)實驗動物生產(chǎn)單位，實驗用動物供應是屬于必須按時提供給購買單位，然而實驗動物不同于其它商品，生產(chǎn)周期較長，一般需要2～3個月[2]，而且各個單位對實驗用動物的規(guī)格要求相對單一，只側(cè)重于體質(zhì)量和性別，使用量大，使用時間又相對集中[3]，所以探尋一個行之有效的實驗用動物生產(chǎn)繁殖方法，確保動物的生產(chǎn)量以及規(guī)格最大程度符合要求顯得非常重要。在本單位實驗用小鼠的使用中，KM小鼠的使用數(shù)量遠大于其它封閉群以及近交系小鼠，所以本文以KM小鼠作為研究對象，通過控制雌鼠哺乳仔鼠數(shù)量，探討對雌鼠繁殖性能和生長發(fā)育的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

6～8周齡清潔級KM小鼠140只，雌雄各半，中國醫(yī)科大學實驗動物中心提供[SCXK(遼)2013-0001]。飼養(yǎng)于屏障環(huán)境中[SYXK(遼)2013-0007]，溫度20～26℃，相對濕度40%～70%，10h/14h明暗交替，換氣次數(shù)18 次/h，使用北京科澳協(xié)力飼料有限公司[SCXK(京)2014-0010]生產(chǎn)的60Co滅菌全價飼料(水分49 g/kg，粗蛋白228 g/kg，粗脂肪41.3 g/kg，粗纖維35 g/kg，粗灰分68 g/kg，鈣13.1 g/kg，總磷7.6 g/kg)，高溫高壓滅菌飲用水,自由采食。墊料使用刨花墊料, 一周更換兩次。

1.3 儀器

電子秤(型號LD5100-1), 分度值0.1 g, 購自沈陽龍騰電子有限公司。

1.4 實驗方法

選取6～8周齡KM小鼠70對，隨機分為2組，每組35對，按雌雄1∶1交配, 實驗組在仔鼠出生2～3 d左右調(diào)整雌鼠帶仔數(shù)量, 保證每胎帶仔10只，21 d離乳，多余仔鼠補入仔鼠數(shù)少于10只的繁殖籠內(nèi)，其余淘汰; 對照組雌鼠哺乳全部仔鼠, 21 d離乳。觀測和記錄小鼠1～3胎窩產(chǎn)仔數(shù)、仔鼠初生體質(zhì)量、仔鼠的離乳體質(zhì)量、離乳數(shù)量、離乳率以及胎間隔等。

1.5 數(shù)據(jù)處理

實驗結(jié)果均使用±s表示，組間差異比較使用t檢驗和x2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 母鼠繁殖性能

從表1可以看出實驗組從第2胎開始初生到離乳, 體質(zhì)量都明顯高于對照組(P＜0.05)，而且增長速度也要較高于對照組。從第二胎開始，實驗組仔鼠的初生體質(zhì)量也要高于對照組(P＜0.05)(表1)。

表1 兩組小鼠初生和離乳時體質(zhì)量的比較

實驗組與對照組1～3胎的離乳率分別為98.22%±2.56%、99.46%±3.45%、98.76%±3.58%和96.23%±2.75%、95.45%±3.65%、93.75%±4.26%，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

實驗組與對照組1～2胎及2～3胎的胎間隔分別為26.77±1.56 d、26.17±2.78 d和28.21±2.02 d、28.32±3.16 d, 二者差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

2.2 仔鼠生長發(fā)育

除第1胎的前2周兩組小鼠體質(zhì)量增長無明顯差異外，從第2胎開始，實驗組仔鼠由于數(shù)量受到控制，可以得到充足的母乳，體質(zhì)量明顯高于對照組，詳見表2。

表2 兩組小鼠生長情況的比較 g

3 討論

本研究主要通過控制母鼠帶仔數(shù)量的方式，來探討對封閉群小鼠的繁殖性能和生長發(fā)育的影響。本文仔鼠數(shù)量控制在10只，首先因為在之前的實驗研究中，雌鼠帶仔數(shù)量分別控制在10只(模仿理想狀態(tài))，13只(模仿日常狀態(tài))，16只(模仿特殊狀態(tài))的情況下進行比較分析，結(jié)果表明帶仔數(shù)量為10只的情況下仔鼠生長狀態(tài)是最優(yōu)的[4]，其次考慮雌鼠的乳頭總數(shù)為10個，盡量保證一只仔鼠一個乳頭，這樣雌鼠的哺乳資源可以得到充分的利用，減輕哺乳壓力; 但是之前的實驗只是簡單討論單一胎次下的不同帶仔數(shù)量對子代生長發(fā)育的影響，并未對母鼠的繁殖性能進行詳細的分析，所以本文選擇帶仔數(shù)量為10只，通過比較實驗組與對照組從第1胎到第3胎，兩組仔鼠的初生體質(zhì)量、雌鼠產(chǎn)仔數(shù)、仔鼠的離乳體質(zhì)量、離乳數(shù)量、離乳存活率以及胎間隔之間的差異，來進一步研究控制雌鼠帶仔數(shù)量對雌鼠繁殖性能和仔鼠生長發(fā)育的影響，摸索更加有效的繁殖方法。

本實驗結(jié)果和日常管理觀察表明，實驗組通過控制仔鼠的數(shù)量，使其能夠得到充分的母乳和雌鼠更多的照料，實驗組小鼠離乳時外觀比較健康，仔鼠狀態(tài)比較活躍，體質(zhì)量增長較快，離乳率也要高于對照組，雌鼠由于帶仔數(shù)量減少, 哺乳壓力減輕，所以胎間隔與對照組相比較有一定的縮短，胎間隔是衡量雌鼠繁殖性能的一個指標，所以控制帶仔數(shù)量對雌鼠繁殖性能也有一定的益處[5,6]，延長小鼠的繁殖周期，提高生產(chǎn)量，能夠更好滿足實驗要求，更有效為實驗動物教學服務。而對照組，由于未對子代仔鼠數(shù)量進行控制, 導致各個繁殖籠內(nèi)動物數(shù)量不均勻，有的繁殖籠內(nèi)仔鼠數(shù)量甚至達到18只，雌鼠的哺乳壓力增大，出現(xiàn)體質(zhì)量下降，精神渙散等現(xiàn)象[7]; 而有的繁殖籠內(nèi)動物數(shù)量少于10只，甚至只有2～3只，造成雌鼠哺乳資源的浪費，雖然每只仔鼠可以得到更加充足的母乳和充分的照料，但是由于其離乳時體質(zhì)量會遠遠高于仔鼠數(shù)量過多的繁殖籠，造成離乳動物體質(zhì)量分布不均勻，降低了教學用實驗動物發(fā)放的可選擇范圍，不利于教學動物的正常供應。

通過對雌鼠子代數(shù)量進行控制，去弱留強的過程中，我們對子代小鼠的性別也可以進行選擇性控制，根據(jù)各院系上報的教學計劃，合理控制雌雄比例，有計劃進行生產(chǎn)繁育，從而可以進一步提高封閉群小鼠的使用率，避免因為雌雄配比與教學需求不符，耽誤實驗動物教學的進度。

[1]張永斌, 陳苑, 郭學軍等.高校實驗動物供求特點及成本控制[J]. 畜牧與飼料科學, 2011, 32(12):41-42.

[2]李紅宇, 譚紅梅, 陳省平, 等. 醫(yī)學教學實驗動物的計劃與管理[J]. 實驗室研究與探索, 2014, 33(7):244-246,300.

[3]梅志強, 王瓊, 鄧莉, 等. 動物福利在研究生實驗動物教學中的應用初探[J]. 中國比較醫(yī)學雜志, 2012, 22(3):76-78.

[4]高健, 吳瑕, 王猛, 等. KM小鼠帶仔數(shù)量對小鼠生長的影響[C]. 伊春: 第九屆北方實驗動物科技年會, 2011:77-78.

[5]梁磊, 許龍翔, 陳小晚, 等. 社居福利因素對小鼠生長發(fā)育及繁殖性能的影響[J].中國比較醫(yī)學雜志, 2014, 24(1):18-22.

[6]鄺少松, 潘甜美, 趙偉健, 等. 三個品種SPF級小鼠繁殖性能和生長發(fā)育的統(tǒng)計比較[J]. 實驗動物與比較醫(yī)學, 2006,26(1):42-43.

[7]吳敬民. KM 鼠中出現(xiàn)稀毛鼠的遺傳規(guī)律[J].中國比較醫(yī)學雜志, 2007,17(3):159-160.