羅映月

摘 要：農(nóng)藥能有效地預防病蟲害，提高糧食、蔬菜的產(chǎn)量。但如果使用過多的農(nóng)藥，就會使蔬菜中有大量的農(nóng)藥殘留，會對食用者的身體健康造成巨大損害。預防蔬菜病蟲害的農(nóng)藥很多，主要以有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥為主。為了檢測上述農(nóng)藥在蔬菜中的殘留物，通常會采用乙酰膽堿酶活性檢測法。這種檢測方法簡易快速，能夠定性、定量地檢測出蔬菜中有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥的含量。在環(huán)境溫度為10℃到40℃的時候，檢測的精度最高，能將敵敵畏、辛硫磷、甲基對硫磷的檢測濃度降低到0.5mg/kg，將甲胺磷的檢測濃度降低到0.89mg/kg。本文具體研究了蔬菜農(nóng)藥殘留的檢測技術(shù)，對該技術(shù)的發(fā)展前景做出了展望。

關(guān)鍵詞：有機磷農(nóng)藥；氨基甲酸酯農(nóng)藥；酶活性檢測法

蔬菜中有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥的檢測工作非常重要，是保障消費者生命安全的有效措施。通常會采用火焰光度法來檢測有機磷，但這種方法檢測時間長、費用高，很難迅速地鑒定出蔬菜中農(nóng)藥的殘留量。為了防止消費者食用有機磷農(nóng)藥的蔬菜，我國應該探索出一種簡單、快捷、靈敏度高的農(nóng)藥殘留檢測方法。農(nóng)業(yè)科技人員通過多方面的試驗發(fā)現(xiàn)，乙酰膽堿酯酶能靈敏地檢測出有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量，該方法在蔬菜農(nóng)藥檢測領(lǐng)域得到了廣泛應用，能迅速地檢測出含有農(nóng)藥殘留的蔬菜，從而使消費者放心食用安全綠色的蔬菜。

一、有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測材料與方法

1.檢測方法的基本原理

馬血清中含有乙酰膽堿酯酶，該酶能與氯化乙酰膽堿產(chǎn)生作用，生產(chǎn)醋酸，反應的化學方程式為：

CH2COOCH2CH2N（CH3）5+H2O+ACHe→ CH3COOH+ HOCH2CH2N（CH3）3

從上述化學反應方程式可以看出，醋酸產(chǎn)生的量越多，就說明反應進行得越徹底。然而有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥會抑制乙酰膽堿的酶活性，導致醋酸的生成量減少，使反應前后的PH值發(fā)生變化。根據(jù)這一特征，就可以準確推算出蔬菜中有機磷、氨基甲酸酯農(nóng)藥的殘留狀況。為了更好地觀察反應前后酸堿性的變化，常會加入PH指示劑來檢測溶液顏色的變化情況。

2.試驗所用的材料和農(nóng)藥種類

為了準確驗證蔥、蒜、蘿卜、韭菜、香菜、蘑菇、番茄等蔬菜中有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量，就采取乙酰膽堿酶活性檢測法。乙酰膽堿酯酶在馬血清中大量存在，馬血清可以從當?shù)仞B(yǎng)殖場中抽取。試驗中需要大量的農(nóng)藥，包括80%的敵敵畏，50%的甲基對硫磷、50%辛硫磷乳油、40%樂果、50%甲胺磷乳油、90%可溶性呋喃丹粉劑等農(nóng)藥。

3.有機磷類農(nóng)藥的檢測方法

具體的檢測方法如下：首先，將葉菜剪成寬度為1cm左右的樣品，將塊根菜切成1cm的表皮樣品，取2g樣品放入三角瓶中，加入10ml緩沖液，振蕩1分鐘后過濾，過濾得到的溶液就是待測試液。

取1cm的比色皿，加酶20ul，再加入2.5ml的緩沖液，充分搖勻。靜置10分鐘之后，加入顯色劑，觀察溶液PH值的顏色變化情況。

PH酸堿性顏色變化情況如下表所示：

由上表可以清楚地看到，當反應后溶液指示劑的顏色變?yōu)樗{色、深藍、淺藍的時候，就有50%的乙酰膽堿酯酶活性受到了抑制，此時蔬菜中含有大量有機磷類農(nóng)藥；而當指示劑的顏色變?yōu)闇\綠、黃綠、深綠時，就有15%到50%的酶活性受到抑制，此時蔬菜中含有少量的有機磷類農(nóng)藥；而當指示劑的顏色變?yōu)闇\黃、淺棕、黃色時，就有不到15%的酶活性受到抑制，這時蔬菜中有機磷類農(nóng)藥的含量已降到安全標準之下。

二、利用酶片快速檢測農(nóng)藥殘留狀況

1.酶片法與氣相色譜法的檢測結(jié)果對照

為了驗證酶片檢測的準確性，將對同一份待測樣品采取兩種檢測方式。除了乙酰膽堿酶活性檢測法，還將采用我國常用的氣相色譜檢測法。通過檢測蔬菜中甲胺磷、敵敵畏、甲基1059、樂果、辛硫磷等農(nóng)藥的殘留狀況，來綜合分析酶活性檢測法與氣相色譜檢測法的準確性。檢測數(shù)據(jù)如下表所示：

從上表可以看出，利用氣相色譜法檢測甲基1059、敵敵畏、甲胺磷、樂果、辛硫磷等農(nóng)藥的殘留物，檢測結(jié)果均超出《食品蔬菜農(nóng)藥含量限量標準》，而利用酶片法檢測蔬菜中農(nóng)藥含量均在中輕度污染、高度污染范圍內(nèi)，說明酶片法的檢測結(jié)果比較好，精確度比較高。

2.酶片法檢測的精確度分析

酶片法將以黃瓜、白菜為研究樣品，驗證其殘存的農(nóng)藥含量。對每個樣品檢測8次，最終測得黃瓜的PH差值在1.0到1.2之間，平均PH值為1.175，它的標準差為0.07，變異系數(shù)為6.01；而白菜的PH差值在0.6到0.8之間，平均值為0.075，變異系數(shù)為12.34。由這組數(shù)據(jù)可以看出，白菜比黃瓜的變異系數(shù)更大，這可能是因為白菜葉片較大，導致農(nóng)藥殘存量增大。

在有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥中加入溴水，能夠大大提高農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶的抑制作用，使檢測精確度更加靈敏。比如在敵敵畏、辛硫磷、甲基1059、樂果、萬靈等農(nóng)藥中滴入溴水，就會使檢測最低限度降低，實驗數(shù)據(jù)如下圖所示：

由上表可以看出，對辛硫磷、樂果、甲基1059進行溴化處理之后，酶片檢測的濃度可以降低到0.50mg/kg、0.01mg/kg、0.13mg/kg，使乙酰膽堿檢測的精度大大提高。

三、結(jié)語

為了檢測出蔬菜中有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥的含量，我國通常采用火焰光度法，但這種方法檢測時間長、費用高，很難迅速地鑒定出蔬菜中農(nóng)藥的殘留量。馬血清中的乙酰膽堿能與氯化乙酰膽堿作用，生產(chǎn)醋酸。而有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥會抑制乙酰膽堿的酶活性，導致醋酸的生成量減少。利用反應前后PH值的變化，來驗證蔬菜中有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量，這種檢測方法精度高、方便快捷，使消費者能放心食用綠色安全的蔬菜。

參考文獻：

[1]李順，陳霞，楊華梅.酶抑制法檢測蔬菜中有機磷氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量研究[J]食品與藥品，2015（05）.

[2]宋茹，李晶.蔬菜中有機磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留酶片快速檢測方法[J].食品研究與開發(fā)，2011（10）.

[3]王林，張穎.蔬菜中有機磷和氨基甲酸類農(nóng)藥殘留的快速檢測方法研究[J].中國食品藥品衛(wèi)生雜志，2014（08）.