周小燕，余娟娟

子癇前期是妊娠期特有的疾病，其發(fā)病率國(guó)內(nèi)大約在9.4%[1]。近年來(lái)，隨著對(duì)子癇前期疾病的研究不斷深入，母嬰預(yù)后雖然具有明顯的改善，但是對(duì)于子癇前期疾病的發(fā)病機(jī)制仍然不十分明確。為了探討子癇前期發(fā)病與缺氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxia-inducible factor-1α，Hif-1α)和胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(placental growth factor，PLGF)表達(dá)的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料在我院2010年2月至2012年2月收治的子癇前期患者中選取60例為研究對(duì)象，年齡(27.5±3.2)歲，孕周(35.4±2.3)周。本組60例患者均符合《婦產(chǎn)科學(xué)》第6版診斷要求，同時(shí)根據(jù)分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)將60例患者分為輕度子癇前期30例、重度子癇前期30例。同時(shí)選擇30例正常妊娠者作為對(duì)照組，年齡(27.4±3.5)歲，孕周(35.5±2.1)周。上述3組患者均無(wú)原發(fā)性心臟病、高血壓以及糖尿病等。3組年齡、孕周等一般資料比較P>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本的采集3組孕婦均胎盤(pán)娩出后5 min內(nèi)，立即選取母體面中央部位的胎盤(pán)組織，大小2.0 cm×1.5 cm×0.5 cm，采用生理鹽水沖洗后，放置在4%甲醛溶液中固定24 h以上進(jìn)行檢查。

1.2.2檢測(cè)方法臨床對(duì)胎盤(pán)組織中Hif-1α和PLGF均采用免疫組化法檢測(cè)：將制作好的標(biāo)本常規(guī)脫水，采用石蠟包埋并制作成3 μm厚度的連續(xù)切片，經(jīng)過(guò)HE染色判斷其質(zhì)量后，采用鏈霉素抗生物素蛋白—過(guò)氧化物酶連接法進(jìn)行檢測(cè)。Hif-1α兔抗人多克隆抗體及PLGF鼠抗人單克隆抗體購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司，免疫組化檢測(cè)試劑盒購(gòu)自福州邁新生物工程技術(shù)有限公司。操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。陰性對(duì)照采用磷酸鹽緩沖溶液代替一抗。最后根據(jù)檢測(cè)的著色強(qiáng)度和面積進(jìn)行評(píng)分：①著色強(qiáng)度：沒(méi)有著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；②著色面積：5%以下為0分，5%～25%為1分、25%～50%為2分、50%～75%為3分，75%以上為4分。上述兩項(xiàng)結(jié)果相加得出最后總得分，其中0～1分為陰性(-)、2～3分(+)、4～5分為(++)，6～7分為(+++)。

2 結(jié)果

2.13組胎盤(pán)組織中Hif-1α的表達(dá)隨著患者病情加重，Hif-1α蛋白的表達(dá)呈現(xiàn)增加的趨勢(shì)。其中輕度子癇前期組和重度子癇前期組中Hif-1α蛋白表達(dá)強(qiáng)度均比對(duì)照組高(均P<0.05)，而重度子癇前期組和輕度子癇前期組比較，表達(dá)也明顯升高(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 3組孕產(chǎn)婦Hif-1α表達(dá)情況(n=30) 例(%)

注：①與對(duì)照組比較，P<0.05；②與輕度子癇前期組比較，P<0.05。

2.23組孕婦胎盤(pán)組織中PLGF的表達(dá)隨著患者病情加重，PLGF的表達(dá)呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)。其中輕度子癇前期組和重度子癇前期組中PLGF表達(dá)強(qiáng)度均比對(duì)照組低(P<0.05)，重度子癇前期組中PLGF表達(dá)強(qiáng)度高于輕度子癇前期組，兩組相比P>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表2。

表2 3組孕產(chǎn)婦PLGF表達(dá)情況(n=30) 例(%)

注：①與對(duì)照組比較，P<0.05。

2.3Hif-1α和PLGF表達(dá)的相關(guān)性分析通過(guò)對(duì)Hif-1α和PLGF表達(dá)的相關(guān)性分析，胎盤(pán)Hif-1α與PLGF的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.46，P<0.05)。

3 討論

子癇前期屬于妊娠期高血壓疾病中一種類(lèi)型，其病理改變主要是由于小動(dòng)脈痙攣、血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷以及全身器官的血液灌流量下降等造成的。此種疾病對(duì)母嬰健康具有極大的危害，嚴(yán)重將會(huì)導(dǎo)致母嬰死亡[2]。研究表明，子癇前期發(fā)病主要是由于胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡以及血管內(nèi)皮細(xì)胞激活與損傷造成，而胎盤(pán)形成缺陷以及胎盤(pán)淺著床導(dǎo)致胎盤(pán)缺氧、缺血是造成子癇前期發(fā)病的主要原因。[3]Hif-1α蛋白主要是細(xì)胞缺氧應(yīng)激所產(chǎn)生的轉(zhuǎn)錄激活因子，是缺氧調(diào)節(jié)通路上的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，同時(shí)缺氧也是誘導(dǎo)Hif-1α蛋白表達(dá)的關(guān)鍵因素[4-7]。本研究結(jié)果，輕度子癇前期組和重度子癇前期組中Hif-1α蛋白表達(dá)強(qiáng)度均比對(duì)照組高(P<0.05)，而重度子癇前期組中Hif-1α蛋白表達(dá)強(qiáng)度強(qiáng)于輕度子癇前期組(P<0.05)。說(shuō)明在缺氧的情況下，Hif-1α和Hif-1β形成的二聚體更加穩(wěn)定，進(jìn)而造成Hif-1α在子癇前期患者胎盤(pán)組織中降解減少，表達(dá)隨著疾病加重而增加[8-9]。

而PLGF是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)家族中的一員，其與VEGF有高度的同源性，PLGF經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄后加工修飾，將會(huì)產(chǎn)生不同的蛋白亞型[10]。研究表明，PLGH在胎兒和成體發(fā)育的血管形成中具有重要的作用，妊娠期PLGH表達(dá)的增強(qiáng)將會(huì)促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞增殖和分化，進(jìn)而誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、抗內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，最終保證胎盤(pán)血管網(wǎng)充分形成[11]。但是，如果PLGF的合成和分泌出現(xiàn)減弱，則會(huì)導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞增殖活性轉(zhuǎn)化浸潤(rùn)活性受阻，最終導(dǎo)致胎盤(pán)淺著床、胎盤(pán)缺氧、缺血[12-13]。本研究結(jié)果，隨著患者子癇前期病情加重，PLGF的表達(dá)呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)。輕度子癇前期和重度子癇前期中PLGF表達(dá)強(qiáng)度均比對(duì)照組低(均P<0.05)說(shuō)明本研究中患者PLGF的表達(dá)異常，將會(huì)導(dǎo)致胎盤(pán)缺氧、缺血，進(jìn)而造成子癇前期的發(fā)生。另外，通過(guò)對(duì)Hif-1α和PLGF表達(dá)的相關(guān)性分析可以得知，胎盤(pán)Hif-1α表達(dá)與PLGF的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.46，P<0.05)，說(shuō)明在子癇前期發(fā)生中，胎盤(pán)Hif-1α表達(dá)與PLGF的表達(dá)相互影響、相互作用，進(jìn)而導(dǎo)致子癇前期疾病的發(fā)展。以上提示胎盤(pán)Hif-1α和PLGF可作為血清標(biāo)志物，其在子癇前期臨床監(jiān)測(cè)及診治中具有一定的應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

[1] 沈方,陳奇,肖建平.脫落滋養(yǎng)細(xì)胞在子癇前期發(fā)病機(jī)制中的作用[J].國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志,2014,41(4):443-447.

[2] 張艷芳,田靜,劉娜.孕婦胎盤(pán)組織中缺氧誘導(dǎo)因子Hif-1α的表達(dá)與子癇前期發(fā)病關(guān)系的Meta分析[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué),2014,42(3):261-264.

[3] 李新菊.子癇前期發(fā)病及其嚴(yán)重程度與NF-κB、TNF-α及PLGF相關(guān)性研究[J].中國(guó)婦幼保健,2014,29(12):1849-1851.

[4] Semmm GL,sam F,Booth G,et a1.Structural and functional analysis of hypoxia-inducible factor 1[J].Kidney Int,1997,51(2):553-555.

[5]Wright WS,Mceihatyen RM,Messina J E,et al.Hypoxia and the expression of HIF-1 alpha and HIF-2 alpha in the retina of streptozotoein injected mice and rat[J]. Exp Eye Res,2010,90(3):405-412.

[6]Oka H,Goto H,Koizumi K,et al.Effect of hachimijiogan against renal dysfunction and involvement of hypoxia inducible factor-1ɑ in the remnant kidney model[J].Diabetes Res Clin Pract,2001,82:25-29.

[7] Cameron C M,Harding F,Hu W S,et al.Activation of hypoxiac response in human embryonic stem cell-derived embryoid bodies[J].Exp BioMed(Maywood),2008,233(8):1044-1057.

[8] Adams JM,Difazio LT,Rolandelli RH,et al. HIF-1:a key mediator in hypoxia[J]. Acta Physiol Hung,2009,96(1):19-28.

[9] George EM.New approaches for managing preeclampsia:clues from clinnical and basic research[J].Clin Ther,2014,36(12):1873-1881.

[10]王明松,鄒良健.血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子價(jià)值的研究現(xiàn)狀[J].醫(yī)學(xué)綜述,2006,12(9):534-536.

[11]魯春,張玉秋,甕占平.生長(zhǎng)分化因子15在子癇前期胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞中的表達(dá)及意義[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志,2013,21(12):96-98.

[12]Zeeman GG,Dekker GA,van Geijin HP,et al.Endothelial function in normal and pre-eclamptic pregnancy:a hypothesis[J].Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol,1992,43(2):113-122.

[13]李東志,林其德,林建華. 胎盤(pán)絨毛缺氧與血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中國(guó)病理生理雜志,2004,20(3):411-416.