李可成，劉艷萍，張華玲

(1.柳州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西 柳州 545006；2.柳州市中醫(yī)醫(yī)院肺病科，廣西 柳州 545001)

網(wǎng)織血小板(Reticulated platelet，RP)在骨髓中能夠分泌到人體外圍血液內(nèi)也即人體血循環(huán)內(nèi)最為年輕也是尚未成熟狀態(tài)的血小板，是一種網(wǎng)絡(luò)狀的染色物。該指標(biāo)所反映的是骨髓內(nèi)血小板的生成狀態(tài)。它在血小板削減性病癥的診治與鑒別診治方面，發(fā)揮著關(guān)鍵性的功能。由于母親與胎兒的血流于胎盤(pán)內(nèi)存在著緊密的組織學(xué)關(guān)系，產(chǎn)婦全血網(wǎng)織血小板能夠經(jīng)由“血-胎盤(pán)屏障”的渠道轉(zhuǎn)移至正處于生長(zhǎng)發(fā)育的胎兒體內(nèi)[1]。本研究旨在分析是新生兒臍血的網(wǎng)織血小板與產(chǎn)婦全血的網(wǎng)織血小板的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：隨機(jī)選取我院的年齡在26～38歲的身體健康的產(chǎn)婦100例為研究對(duì)象，其中孕周37～42周為滿(mǎn)足足月妊娠的產(chǎn)婦95例，不足37周屬于早產(chǎn)孕婦5例(注：本試驗(yàn)中孕周都不低于35周)。新生兒男55例,女45例；平均體重(3 407.36±438.41)g，其中2.5～4.0 kg(即體重正常的新生兒)74例(其中，足月的新生兒71例，早產(chǎn)兒3例)，不足2.5 kg(即低體重的新生兒)10例(其中，足月的新生兒7例，早產(chǎn)兒3例)，超出4.0 kg新生兒18例[2]。

1.2儀器設(shè)備：Sysmex XN-9000全自動(dòng)血液體液分析儀及其配套原廠(chǎng)試劑及其校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。

1.3測(cè)定方法：孕婦入院待產(chǎn)時(shí),使用無(wú)菌一次性注射器留取2 ml孕婦靜脈血,納入產(chǎn)婦組；分娩時(shí)留取2 ml臍靜脈血,納入新生兒臍血組；均用EDTA抗凝,顛倒混勻。通過(guò)使用Sysmex XN9000 PLT-F通道進(jìn)行檢測(cè)，F(xiàn)luorocell PLT 為 PLT-F 通道檢測(cè)專(zhuān)用熒光染料，高特異性(與CD41/61免疫學(xué)PLT檢測(cè)相當(dāng))，靜脈血在 CBC+DIFF+PLT-F模式下進(jìn)行檢測(cè)，網(wǎng)織血小板以IPF(%)由配套軟件自動(dòng)計(jì)算得出。

2 結(jié)果

100例產(chǎn)婦全血網(wǎng)織血小板和新生兒臍血的網(wǎng)織血小板無(wú)論是RP%平均值還是數(shù)量而言，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且新生兒臍血中的網(wǎng)織血小板含量要遠(yuǎn)低于產(chǎn)婦全血的網(wǎng)織血小板的含量，見(jiàn)表1。通過(guò)相關(guān)性研究發(fā)現(xiàn)，100例產(chǎn)婦全血網(wǎng)織血小板和新生兒臍血的網(wǎng)織血小板之間RP%平均差異4.124 92，標(biāo)準(zhǔn)誤1.761 33，P=0.133，兩者并不存在著內(nèi)在的相關(guān)性(P>0.05)。

品名例數(shù)RP%平均值RP(×109/L)產(chǎn)婦全血網(wǎng)織血小板10012.61±2.1314.32±2.41新生兒臍血網(wǎng)織血小板1009.32±3.3132.15±3.07P值0.0020.001

3 討論

根據(jù)相關(guān)的研究表明，網(wǎng)織血小板內(nèi)胞漿留有不少的mRNA與粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，能夠保留并合成不多的蛋白質(zhì)性能，其對(duì)凝血酶原受體激動(dòng)肽(TRNP)的刺激會(huì)發(fā)生更為明顯的反應(yīng)性，而膜外表能夠表達(dá)出更為豐富的CD62P，即凸顯出止血的活性。由于其體積比較大，TO能夠通過(guò)膜和漿中的RNA發(fā)生特異性結(jié)合，同時(shí)在很大程度上強(qiáng)化熒光的強(qiáng)度，從而有助于開(kāi)展流式細(xì)胞儀的測(cè)試。出于確定所檢測(cè)的細(xì)胞是屬于網(wǎng)織血小板，一般借助于CD41加以測(cè)定[3-4]。在檢測(cè)網(wǎng)織血小板的過(guò)程中，RP網(wǎng)絡(luò)狀的結(jié)構(gòu)屬于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)所殘留的RNA，因?yàn)榫W(wǎng)絡(luò)狀的結(jié)構(gòu)并不大，同時(shí)數(shù)量不多，在一般的光鏡下測(cè)試時(shí)并不容易，因此，在測(cè)定RP 檢時(shí)，在很長(zhǎng)的一段時(shí)期中都沒(méi)有被使用于臨床學(xué)內(nèi)。1986 年，Lee 等學(xué)者發(fā)現(xiàn)了可以和活細(xì)胞RNA物質(zhì)相融合的熒光色素-噻唑橙(Thiazole orange,TO)，并在4年之后，運(yùn)用到作RNA熒光的染料物質(zhì)，借助于流式細(xì)胞儀則能夠容易地測(cè)定包括RNA的血小板，據(jù)此構(gòu)建起RP 智能化的計(jì)數(shù)方法。該方法雖然比較地精確，然而試驗(yàn)周期長(zhǎng)，同時(shí)，結(jié)果也容易受到標(biāo)本內(nèi)網(wǎng)織紅細(xì)胞所產(chǎn)生的熒光影響。Richards 等學(xué)者對(duì)以上方法加以改進(jìn)，然而仍舊存在著操作流程過(guò)于復(fù)雜與費(fèi)時(shí)等不足之處。渡道清明等學(xué)者構(gòu)建起基于奧黃 (AuramineO,AO)當(dāng)做RNA主要染料的RP智能化計(jì)數(shù)法，此法有著良好的精確度，同時(shí)所制定的標(biāo)本能夠維持在1/2 d。其最大的特征在于測(cè)定外周血標(biāo)本所花費(fèi)的時(shí)間只有78s。從而為臨床學(xué)的應(yīng)用提供了有利的條件。外周血RP的測(cè)定，主要有助于血小板減少癥的病因?qū)W診斷，為生成障礙或破壞過(guò)多，可作為骨髓移植、造血促進(jìn)因子使用和骨髓抑制后的骨髓血小板造血恢復(fù)的監(jiān)控指標(biāo)[5]。

就新生兒而言，雖然胎兒是母親身體的一部分，通過(guò)臍血和產(chǎn)婦相聯(lián)系起來(lái)，但由于胎盤(pán)具有屏障的功能，因此新生兒的臍血網(wǎng)織血小板比較地穩(wěn)定，并不受到妊娠與生產(chǎn)的影響。同時(shí)，健康新生兒的RP與孕齡有關(guān)，孕齡<30周的新生兒RP為(8.7%±4.9%)，明顯高于>36周新生兒RP(3.9%±2.3%)和30～36周的新生兒RP (4.5%±1.6 %)?；济庖咝匝“鍦p少癥的足月新生兒RP則明顯高于健康足月新生兒，前者RP達(dá)(38.3% ±23.1%)，而在一名血小板生成減低的新生兒血中其RP百分率(1.6%)和絕對(duì)數(shù)均明顯降低。因此作者認(rèn)為測(cè)定血中RP值有助于評(píng)價(jià)新生兒血小板減少癥的原因。

新生兒臍血的網(wǎng)織血小板與產(chǎn)婦全血的網(wǎng)織血小板并不存在關(guān)聯(lián)性，且新生兒臍血網(wǎng)織血小板不會(huì)受到孕婦的影響，處于穩(wěn)定的狀態(tài)。

4 參考文獻(xiàn)

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