魏廣治

臨床中關于口腔治療相關的研究多見，關于口腔骨代謝方面的相關研究不斷增多，牙周支持組織的破壞，如牙槽骨吸收﹑牙周袋的形成和進行性附著喪失，最后可導致牙松動和被拔除，而成骨細胞增殖作為在牙槽骨缺損重建中發(fā)揮重要作用的方面，對其進行的調(diào)節(jié)有助于牙槽骨骨小梁的改建，其中成骨細胞增殖情況（CCK-8值）及ALP活性作為反應骨重建的重要指標，對其表達的監(jiān)控結(jié)果可作為干預效果的評估依據(jù)[1]。中藥川芎作為補骨強腎的重要藥物，在骨髓功能促進中的作用較好，但是對于成骨細胞增殖的影響研究不足。本研究就中藥川芎對成骨細胞增殖的影響進行探究與分析，結(jié)果總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 基本資料

以小鼠成骨細胞株MC3T3-E1為實驗對象，以川芎提取液干預作為觀察組，并以α-MEM培養(yǎng)液干預為對照組。

1.2 方法

1.2.1 材料 鹽酸川芎嗪標準品購自北京億諾輝科技發(fā)展有限公司；小鼠成骨細胞株MC3T3-E1購自上海中科院細胞庫；二甲基亞砜購自Sigma公司；胎牛血清購自杭州四季青公司；CCK-8試劑盒購自上海博古生物科技有限公司；ALP試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.2.2 實驗方法 首先將小鼠成骨細胞株MC3T3-E1進行培養(yǎng)，穩(wěn)定二氧化碳（5%）水平，在二氧化碳培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)（溫度37℃，濕度95%），培養(yǎng)液更換間隔時間為2.0 d，細胞匯合度至80%～90%時采用0.25%胰蛋白酶進行消化細胞處理。鹽酸川芎嗪標準品采用對倍稀釋法處理，制備10 μg/ml的川芎藥液干預作為觀察組，另以α-MEM培養(yǎng)液加入的空白對照組作為對照，觀察組于干預24 h及48 h各檢測1次，每次均設置5個復孔。采用CCK-8試劑盒方法進行細胞增殖率的檢測，并以多功能酶標儀讀取波長4 50O D值，并以ALP試劑盒進行ALP活性的檢測。統(tǒng)計與比較兩組的檢測值。

1.3 統(tǒng)計學分析

本研究軟件為SPSS 20.0，計量資料進行t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

干預后24 h﹑48 h及72 h觀察組的CCK-8值及ALP活性均高于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 兩組干預后24 h、48 h及72 h的CCK-8值及ALP活性比較

3 討論

口腔治療過程中，較多患者面臨牙槽骨重建的情況，而牙槽骨重建的細胞基礎為破骨細胞與成骨細胞的平衡調(diào)節(jié)，其中成骨細胞的分化增殖是骨形成的關鍵，因此對其進行增殖狀態(tài)的調(diào)節(jié)成為治療的重點[2-4]。另外，ALP作為成骨細胞分泌的一類重要酶蛋白，在成骨細胞的早期分化反應中具有積極的反應作用，對ALP表達的調(diào)控是重要的監(jiān)測方面[5-7]。近年來采用多種方式促進成骨細胞增殖的研究多見，而中藥方面的相關研究也可見，其中中藥川芎作為具有較好的補骨強腎的藥物，對患者骨代謝的影響研究雖可見，但是對于成骨細胞增殖的促進作用研究及相關研究差異較大[8-10]，未見其顯著優(yōu)勢的研究，因此這些方面的影響探究仍十分必要。

本研究顯示，干預后24 h﹑48 h及72 h中藥川芎干預的CCK-8值及ALP活性均高于α-MEM培養(yǎng)液干預的效果，干預后48 h高于其他時間，說明中藥川芎的干預效果更為顯著，這可能與中藥川芎的氧自由基清除及骨代謝調(diào)節(jié)作用有關，因此在骨細胞增殖狀態(tài)的提升方面有較好作用[11-12]。綜上所述，我們認為中藥川芎可有效促進成骨細胞的增殖。

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