孔令銀

菏澤市立醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東菏澤 274000

網(wǎng)織血小板（reticulated platelet,RP）是從骨髓釋放出來的一種比較新的血小板，該細(xì)胞中含有殘留的核糖核酸，且細(xì)胞的體積比較大，具有活性比其他的細(xì)胞更強(qiáng)，因此外周血的RP可以比較精確的反應(yīng)骨髓血小板的動(dòng)力學(xué)，為血液疾病的診斷提供參考[1]。傳統(tǒng)對(duì)于RP的檢查采取流式細(xì)胞儀，但是該種檢測方法具有操作復(fù)雜、檢查時(shí)間長等缺點(diǎn)，從而限制了臨床的應(yīng)用。Sysmex XN-9000血細(xì)胞分析儀是2012年在日本推出的一款全新的自動(dòng)血細(xì)胞分析儀器，它以半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞術(shù)以及核酸熒光染色和鞘流電阻抗檢測等方法進(jìn)行完美的融合，擁有特色的PLT-F通道、WPC通道以及RET通道，自動(dòng)化檢測程度較高。因此，該次將使用Sysmex XN-9000血細(xì)胞分析儀分析血液疾病患者以及健康人群中的RP情況，并對(duì)相關(guān)結(jié)果進(jìn)行分析總結(jié)，為后續(xù)的臨床診斷提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選擇該院收治的96例血液疾病患者，按照患者的疾病情況分為A、B、C3組。A組患者為ITP疾病，為33例，男性患者17例，女性患者16例，年齡8～55歲，平均（32.2±17.0）歲，B 組為 AL 患者 25 例，男性患者 13例，女性患者 12例，年齡5～65歲，平均（33.2±10.2）歲，C組患者為AA，有38例，男性患者19例，女性患者 19 例，年齡 6～62 歲，平均（36.0±12.5）歲。 另選擇同期進(jìn)行健康體檢的健康人群50名為對(duì)照組，男性29 名，女性 21 名，年齡 4～65 歲，平均（35.2±11.0）歲，其血小板正常，肝功能以及心電圖等檢查均正常，排除心血管疾病、糖尿病以及內(nèi)分泌疾病患者。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析以上4組人群中的年齡分布、性別構(gòu)成比等均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），可以進(jìn)行組間的互相比較。且該次的研究患者和家屬均知情并簽訂知情協(xié)議，該次方案通過倫理委員會(huì)的審核。

1.2 研究方法

1.2.1 試劑與儀器 Sysmex XN-9000血細(xì)胞分析為原裝進(jìn)口，來自于日本東亞公司，96例血液疾病患者以及50名健康人群均來自該院，所有標(biāo)本均為真空采血，使用EDTA-K2抗凝，采集血液后室溫放置，然后在4 h內(nèi)完成網(wǎng)織血小板的檢測。

1.2.2 檢測方法 直接對(duì)相關(guān)受試人員的外周血進(jìn)行檢測，使用特殊的熒光染料比如polymehtine以及Oxazine，與網(wǎng)織紅細(xì)胞或者網(wǎng)織血小板中的DNA結(jié)合。根據(jù)細(xì)胞的大小將紅細(xì)胞和血小板進(jìn)行分開，并根據(jù)DNA的具體含量將細(xì)胞分為成熟以及未成熟，將成熟的血小板以及網(wǎng)織血小板給予不同的染色，通過分析獲得RP比例[2]。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

相關(guān)的數(shù)據(jù)納入SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件中進(jìn)行分析比較，（x±s）表示計(jì)量資料，并采取 t檢驗(yàn)分析，率（%）表示等級(jí)資料，然后采取H檢驗(yàn)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 AA、ITP、AL組與對(duì)照組RP等指標(biāo)比較

經(jīng)過分析檢測，3組患者的RP水平值均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，A組及B組的水平值高于對(duì)照組，但C組的水平值明顯低于對(duì)照組；血小板計(jì)數(shù)（PLT）、平均血小板體積（MPV）也存在一定程度差異，見表1。

表1 3組患者與對(duì)照組RP比較(x±s)

2.2 3組患者的診斷準(zhǔn)確性比較

血小板的相關(guān)抗體PAIgG、PAIgA以及PAIgM熒光百分率為（10.4±5.0）、（9.4±4.4）、（7.2±3.1），對(duì)于疾病的診斷準(zhǔn)確性中，A組＞B組＞C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。

表2 3組患者的診斷準(zhǔn)確性比較

3 討論

RP是從骨髓中釋放出來的新的血小板，與成熟的血小板比較，他具有更大的體積因此更加容易觀察到，此外其活躍性更高，蛋白質(zhì)的合成能力也更強(qiáng)，細(xì)胞質(zhì)中含有較多的RNA，可以被核酸熒光染料染色，介于骨髓成熟的巨核細(xì)胞和成熟的血小板之間，是一種剛從骨髓釋放出來的未成熟的細(xì)胞[3]。RP計(jì)數(shù)可以比較準(zhǔn)確的反應(yīng)骨髓血小板的生成情況，但單純的血小板僅能反應(yīng)外周血小板數(shù)量，不能反應(yīng)骨髓血小板生程情況，因此在對(duì)于骨髓血小板的預(yù)測中，RP具有更高的價(jià)值。

3.1 RP對(duì)于ITP診斷應(yīng)用

ITP為免疫系統(tǒng)反應(yīng)引起的血小板破壞增加出血性的一種血液疾病，主要的特征為血小板減少以及骨髓巨核細(xì)胞增加。該疾病在育齡的階段女性發(fā)病高于男性，但其他階段兩者的差異不顯著[4]。該次對(duì)于33例ITF患者進(jìn)行檢測RF，并與健康人群的計(jì)數(shù)進(jìn)行比較，結(jié)果顯示ITF患者的計(jì)數(shù)明顯的高于正常的對(duì)照組，韓琳琳[5]流式細(xì)胞儀分析ITF患者中的RP情況，顯示ITP患者中的RP為（24.01±6.24）%，明顯高于正常人群的（7.20±1.87）%，提示了 TTF換種中血小板破壞增加，使得骨髓生產(chǎn)血小板的速度加快，外周新生的血小板增加，使得了RF的計(jì)數(shù)提高。

3.2 RP對(duì)于AL診斷應(yīng)用

AL為造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病，患者體內(nèi)存在的正常克隆造血以及白細(xì)胞克隆造血兩組互相競爭的細(xì)胞群。在疾病發(fā)生時(shí)，機(jī)體內(nèi)骨髓總的異常原始細(xì)胞以及白血病細(xì)胞就會(huì)大量的繁殖，從而抑制了其他細(xì)胞的正常造血，使得患者的機(jī)體免疫力下降容易出現(xiàn)感染、出血以及貧血等嚴(yán)重的并發(fā)癥，如果不能得到及時(shí)的治療會(huì)危及患者的生命。在該次的檢查中我們發(fā)現(xiàn)，AL患者中的RP計(jì)數(shù)高于正常的對(duì)照組，馮萍等[6]采用流式細(xì)胞儀檢查AL患者的RP情況，結(jié)果顯示在初診期患者的RP為 （5.4±4.25）%， 緩解期為 （16.54±2.64）%，在不同的時(shí)期其水平值差異明顯，而健康人群為（8.27±2.5）%，明顯低于患者的水平值，結(jié)果與該次報(bào)道基本一致。提示該疾病的血小板生產(chǎn)速度比較快。

3.3 RP對(duì)于AA診斷應(yīng)用

AA是一組由于多種原因所導(dǎo)致的骨髓造血功能障礙性疾病，主要的臨床特征為骨髓造血干細(xì)胞增生的降低、外周全血細(xì)胞減少等，臨床表現(xiàn)為出血、貧血以及感染，研究顯示AA的發(fā)生與化學(xué)藥物、遺傳以及放射等相關(guān)。年齡在15～25歲為該疾病的高發(fā)時(shí)間段，男性一般多于女性。在該次的分析中發(fā)現(xiàn)，AA患者的RP計(jì)數(shù)低于正常人群，主要是因?yàn)樵煅?xì)胞受到抑制，使得血小板的生成減少，最終使得骨髓血小板生產(chǎn)出現(xiàn)障礙。蔡力力等[7]采用XE-5000檢測AA患者中的RP 情況，結(jié)果為（1.87±1.63）%，正常為（5.83±3.10）%，結(jié)果與該次報(bào)道基本相近。

3.4 Sysmex XN-9000血細(xì)胞分析儀

Sysmex XN-9000血細(xì)胞分析儀是從日本發(fā)展而來的一種細(xì)胞分析儀，因?yàn)榫哂懈咝?、快捷以及高?zhǔn)確度等優(yōu)點(diǎn)，因此在臨床的應(yīng)用中一直受到關(guān)注。但隨著實(shí)驗(yàn)室檢查的不斷增加以及對(duì)于自動(dòng)化要求的增加使得，一個(gè)實(shí)驗(yàn)室通常會(huì)擁有多臺(tái)血細(xì)胞分析儀，而不同的品牌和不同的型號(hào)會(huì)使得結(jié)果存在一定的差異，因此在實(shí)驗(yàn)室使用該儀器時(shí)建議要對(duì)儀器進(jìn)行校正,對(duì)于該儀器一般測試的值與理論值比較時(shí)a值的范圍（1.0±0.05）范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)＞0.975[8-10]。 Sysmex XN-9000 血細(xì)胞分析儀具有較高的精密度和準(zhǔn)確度，并且線性范圍較廣，相關(guān)性好，攜帶的污染率低，與其他的品牌儀器具有良好的可比性，分析的結(jié)果與廠家規(guī)定的性能基本一致，因此保證了相關(guān)的檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[11-12]。此外該儀器的操作也比較簡單，適合于大批量的檢測，可以輔助臨床相關(guān)血液疾病等檢測，臨床應(yīng)用范圍廣。

4 小結(jié)

在該次的資料分析中，采取XN-9000血細(xì)胞分析儀分析血液疾病中網(wǎng)織血小板的情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在特發(fā)性血小板減少性紫癜以及再生障礙性貧血患者中，期體內(nèi)的網(wǎng)織血小板計(jì)數(shù)明顯高于正常人群，而急性白血病的患者網(wǎng)織血小板計(jì)數(shù)明顯低于正常對(duì)照組，說明了網(wǎng)織血小板在不同的人群中其水平含量具有較大的差異，因此測定血液疾病患者的外周血網(wǎng)織血小板的水平值可以初步判斷患者的疾病類型，為后續(xù)的臨床診斷提供參考。3種疾病的準(zhǔn)確性比較中，通過檢測網(wǎng)織血小板相關(guān)的抗體如PAIgG、PAIgA以及PAIgM熒光百分率可以得出，檢測特發(fā)性血小板減少性紫癜的準(zhǔn)確率高于再生障礙性貧血以及急性白血病。說明取XN-9000血細(xì)胞分析儀在診斷不同疾病時(shí)具有不一樣的敏感性，臨床可以根據(jù)患者的具體情況選擇檢測的方法。3組患者的血小板計(jì)數(shù)均明顯的低于正常人群，說明以上3種血液疾病的患者外周血小板均較低，而均有ITP組患者的MPV稍微高于正常人群，提示以上3種血液疾病采取XN-9000血細(xì)胞分析儀平均血小板體積時(shí)獲得的結(jié)果無特征性，對(duì)于疾病的判斷不利，因此在后續(xù)的臨床應(yīng)用中應(yīng)該避免使用XN-9000血細(xì)胞分析儀檢測血液疾病患者的MPV。

綜上所述，Sysmex XN-9000血細(xì)胞分析儀可以比較準(zhǔn)確的分析網(wǎng)織血小板的數(shù)量，從而反應(yīng)骨髓巨核系統(tǒng)生成血小板的情況，對(duì)于血液疾病的診斷具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

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