劉雪晴，石永威，李志江，劉坤，賈天軍

（河北北方學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)院 臨床檢驗教研室，河北 張家口 075000）

有研究發(fā)現(xiàn)人甘露糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶2（mannan-binding lectin associated serine protease, MASP-2）在患者血清中的濃度的變化與某些疾病，如慢性感染﹑惡性腫瘤及自身免疫性疾病等存在一定的相關(guān)性[1]。近幾年來，隨著飲食結(jié)構(gòu)的改變和人民生活水平的提高，大腸癌的發(fā)病率逐年增高，成為臨床上常見的惡性腫瘤，嚴(yán)重危害了人類的健康。由于在總體治療效果和預(yù)后等方面不盡人意，人們迫切尋求一種新的﹑綜合性的及有效的治療方法來改變這一現(xiàn)象。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月-2016年7月于河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院胃腸外科診斷為大腸癌的患者52例作為癌癥組。患者均未進行過放化療，每位患者取癌旁正常組織1例。另選取本院體檢中心年齡﹑性別結(jié)構(gòu)相類似的80例健康人群外周血標(biāo)本作為對照組。

1.2 方法

1.2.1 MASP-2濃度測定 將所有血清標(biāo)本和試劑盒提前取出，平衡至室溫，1∶10倍稀釋，嚴(yán)格按照試劑盒的操作說明書進行操作。

1.2.2 免疫組織化學(xué)法 標(biāo)本固定﹑脫水﹑透明﹑浸蠟﹑包埋及切片，二甲苯脫蠟，酒精水化，室溫孵育，抗原微波修復(fù)。滴加一抗，4℃冰箱過夜。滴加二抗。滴加鏈親合素標(biāo)記的辣根過氧化物酶，37℃，30min。顯色液顯色，顯微鏡下觀察顯色情況，及時終止。自來水下充分沖洗，蘇木素復(fù)染。中性樹膠封片。在顯微鏡下觀察結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用t檢驗；計數(shù)資料以率表示，比較用χ2檢驗；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者MASP-2比較

癌癥組患者血清MASP-2濃度為（303.22±125.76）ng/ml，對照組患者為（482.24±201.24）ng/ml，兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=5.766，P=0.001），癌癥組低于對照組。

2.2 癌癥組患者不同臨床病理因素與MASP-2表達的關(guān)系

癌癥組不同年齡﹑性別﹑TNM分期﹑淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及癌癥類型患者的MASP-2比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；癌癥組低分化患者與高-中分化患者的MASP-2濃度比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見附表。

2.3 兩組患者MASP-2陽性率比較

癌癥組患者MASP-2陽性率為57.69%（30/52），對照組患者為28.85%（15/52），經(jīng)χ2檢驗，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=8.814，P=0.003）。

2.4 大腸癌組織和癌旁正常組織中MASP-2的表達

表達部位在細(xì)胞核，呈棕黃色，在癌旁組織中陽性表達少，偶見細(xì)胞核呈淡黃色。見附圖。

附表 癌癥組患者不同臨床病理因素與MASP-2的關(guān)系

附圖 大腸癌組織和癌旁正常組織中MASP-2的表達（×200）

3 討論

國外有文獻報道顯示大腸癌患者術(shù)前血清MASP-2蛋白的濃度和活性高于對照組[2]。甲狀腺乳頭狀癌患者血清中MASP-2的濃度高于甲狀腺瘤和正常人群[3]。MASP-2可能通過惡化炎癥和促進增殖而引起腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移，提示血清中MASP-2濃度可作為預(yù)測大腸癌復(fù)發(fā)和存在時間的獨立指標(biāo)[4-5]。然而關(guān)于兩者的相關(guān)性，不同研究小組得出的結(jié)論存在差異[6]。石燕萍等[7]報道甲狀腺腫瘤患者與健康對照者相比MASP-2濃度增高，但未進一步分析MASP-2濃度與疾病轉(zhuǎn)歸的影響，也未對其升高具體機制進行闡明。

腫瘤細(xì)胞的分化程度是指腫瘤細(xì)胞與其相應(yīng)的正常細(xì)胞的相似程度。高分化癌與正常的組織類似，成熟度較高，惡性程度低。低分化癌成熟度較差，惡性程度高。MASP-2在惡性程度高的低分化腫瘤中的濃度高于惡性程度低的高-中分化腫瘤，提示惡性程度越高，表達量越低。大腸癌患者血清中MASP-2濃度較健康人群偏低的結(jié)果與國外報道有所出入，這種差異有可能與不同地區(qū)﹑不同種族有關(guān)，也有可能與實驗人群年齡分布有關(guān)，還有可能與樣本量較少有關(guān)。

國內(nèi)最新報道，在胃癌組織中，MASP-2為低表達，而在癌旁組織中高表達[8]。石燕萍等[9]報道MASP-2在甲狀腺乳頭狀癌組織中升高，但在癌旁正常甲狀腺組織中無表達，且與其他臨床資料無明顯相關(guān)性。SWIERZKO等[10]報道MASP2在卵巢癌中的表達量高于正常卵巢和良性卵巢腫瘤。VERMA等[11]運用免疫組織化學(xué)法檢測了食管鱗狀細(xì)胞癌患者在不同階段MASP-2的表達，結(jié)果顯示MASP-2主要是在癌癥晚期和轉(zhuǎn)移的過程中表達，其表達與疾病的進展和腫瘤侵襲性密切相關(guān)。有文章報道在卵巢癌中MASP-2的基因表達高于健康對照組，表明MASP-2可能通過補體激活的凝集素途徑參與了卵巢癌的疾病過程[12]。本研究證實MASP-2陽性率在癌癥組中的表達量高于對照組，這與血清中MASP-2濃度檢測結(jié)果有所出入，還需進一步研究?？傊甅ASP-2參與了腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。

本研究為深入研究大腸癌的發(fā)生﹑發(fā)展奠定了實驗基礎(chǔ)。但關(guān)于MASP-2在大腸癌侵襲及轉(zhuǎn)移之間的機制還有待于更進一步的研究。

參 考 文 獻：

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[10]SWIERZKO A S, SZALA A, SAWICKI S, et al. Mannose -binding lectin (MBL) and MBL -associated serine protease -2 (MASP-2)in women with malignant and benign ovarian tumours[J]. Cancer Immunol Immunother, 2014, 63(11): 1129-1140.

[11]VERMA A, MATTA A, SHUKLA N K, et al. Clinical significance of mannose-binding lectin-associated serine protease-2 expression in esophageal squamous cell carcinoma[J]. Int J Cancer, 2006,118(12): 2930-2935.

[12]SWIERZKO A S, SZALA A, SAWICKI S, et al. Mannose-binding lectin (MBL) and MBL-associated serine protease-2 (MASP-2)in women with malignant and benign ovarian tumours[J]. Cancer Immunology, Immunotherapy, 2014, 63(11): 1129-1140.