王永芳

毛細(xì)支氣管炎是小年齡組兒童常見的下呼吸道感染性疾病，重癥毛細(xì)支氣管炎可合并呼吸衰竭、心力衰竭等，危及患兒生命。近年來研究發(fā)現(xiàn)［1］，毛細(xì)支氣管炎患兒存在淋巴細(xì)胞亞群失衡，針對病情嚴(yán)重程度不同的毛細(xì)支氣管炎患兒淋巴細(xì)胞亞群水平變化研究較少。該文旨在探討重癥毛細(xì)支氣管炎患兒淋巴細(xì)胞亞群臨床特點(diǎn)，以便為重癥毛細(xì)支氣管炎患兒的病情評估及治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年1月—2017年6月在鄭州市第一人民醫(yī)院住院的2歲以下毛細(xì)支氣管炎患兒101例，其中重癥組50例，輕癥組51例。兩組患兒均為第1次喘息，診斷標(biāo)準(zhǔn)均符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》第8版［2］。并排除有先天性心臟病、支氣管肺發(fā)育不良、先天性免疫缺陷的患兒。正常對照組選同期本院門診體檢的2歲以下健康兒童49例，其中男28例，女21例。分組：按疾病分為重癥毛細(xì)支氣管炎組 （重癥組）、輕癥毛細(xì)支氣管炎組（輕癥組）、正常對照組（對照組）；按年齡分為：＜6個(gè)月組、＞6個(gè)月組。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集 來院后當(dāng)天采集外周靜脈血2 ml，EDTA抗凝，送檢淋巴細(xì)胞亞群。

1.2.2 淋巴細(xì)胞亞群測定 淋巴細(xì)胞亞群檢測采用BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀。每個(gè)血標(biāo)本對應(yīng)標(biāo)記兩支流式專用管，分別加入20μl BD Multitest CD3 FITC/CD8PE/CD45 Per CP/CD4 APC和 20μl BD Multitest CD3 FITC/CD16+CD56 PE/CD45Per CP試劑于試管底部；將50μl充分混勻的抗凝全血移取到各管的底部，震蕩混勻于室溫（20～25℃）環(huán)境下避光孵育15 min；向每個(gè)管中添加450μl 1×Multitest溶血素，震蕩混勻于室溫（20～25℃）環(huán)境下避光孵育15 min。淋巴細(xì)胞亞群結(jié)果由BD Multi SET軟件自動(dòng)獲取，測定CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+、CD19+、CD16+/CD56+細(xì) 胞相 對計(jì) 數(shù)及CD4+/CD8+。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以（x±s）表示；多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析；兩組間比較采用Mann－Whitney U檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組患兒淋巴細(xì)胞亞群比值比較 重癥毛細(xì)支氣管炎組、輕癥毛細(xì)支氣管炎組CD3+、CD3+/CD8+、CD16+/CD56+比值均低于正常對照組 （P＜0.05），且以重癥毛細(xì)支氣管炎組最低，與輕癥毛細(xì)支氣管炎組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。重癥毛細(xì)支氣管炎組、輕癥毛細(xì)支氣管炎組CD4+/CD8+、CD19+比值均高于正常對照組（P＜0.05），且以重癥毛細(xì)支氣管炎組最高，與輕癥毛細(xì)支氣管炎組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

2.2 重癥毛細(xì)支氣管炎不同年齡組患兒淋巴細(xì)胞亞群比值比較 兩年齡組中，重癥毛細(xì)支氣管炎組患兒淋巴細(xì)胞各亞群比值比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。年齡＜6個(gè)月的重癥毛細(xì)支氣管炎組患兒 CD3+、CD3+/CD4+、CD4+/CD8+比值均較＞6 個(gè)月組高，CD3+/CD8+、CD19+、CD16+/CD56+比值均較＞6 個(gè)月組低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表1 重癥毛細(xì)支氣管炎組與輕癥毛細(xì)支氣管炎組淋巴細(xì)胞亞群比值比較

表2 重癥毛細(xì)支氣管炎患兒不同年齡組淋巴細(xì)胞亞群比值比較

3 討論

重癥毛細(xì)支氣管炎以6個(gè)月內(nèi)嬰兒多見，其發(fā)病機(jī)制除與病原體直接侵害有關(guān)外，可能還與此年齡段患兒免疫系統(tǒng)發(fā)育不健全，免疫功能不完善有關(guān)。機(jī)體免疫功能的維持有賴于各淋巴細(xì)胞亞群間的相互協(xié)調(diào)、相互制約，形成穩(wěn)定的免疫應(yīng)答。淋巴細(xì)胞在胸腺中發(fā)育成熟后進(jìn)入外周血，分為T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞，參與并調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能。外周血成熟T淋巴細(xì)胞均為CD3+細(xì)胞，其為免疫系統(tǒng)中最重要的細(xì)胞亞群，主要由CD4+和CD8+組成，兩者之間處于動(dòng)態(tài)平衡及相互反饋調(diào)節(jié)狀態(tài)。當(dāng)機(jī)體受到病毒、細(xì)菌等病原體感染時(shí)，免疫平衡破壞，引起免疫功能紊亂，從而引發(fā)一系列病理變化。

重癥患者T淋巴細(xì)胞大量凋亡使總數(shù)降低，其亞群的變化造成免疫功能紊亂，且病毒等感染又對機(jī)體的細(xì)胞免疫功能具有抑制作用［3］。在該研究中，毛細(xì)支氣管炎組（重癥組、輕癥組）患兒CD3+、CD3+/CD8+均低于正常對照組，且以重癥毛細(xì)支氣管炎組最低，重癥毛細(xì)支氣管炎組CD4+/CD8+比值高于輕癥毛細(xì)支氣管炎組及對照組，以對照組最低，提示毛細(xì)支氣管炎存在淋巴細(xì)胞亞群失衡，且病情越重失衡越顯著。該研究還發(fā)現(xiàn)，在重癥毛細(xì)支氣管炎中，年齡＜6個(gè)月組CD3+/CD4+、CD4+/CD8+比值較年齡＞6個(gè)月組高，提示在重癥毛細(xì)支氣管炎患兒中小年齡組患兒淋巴細(xì)胞亞群失衡更重，即重癥毛細(xì)支氣管炎易發(fā)生在免疫功能失衡的小年齡組人群中。與董賀婷等［1］對毛細(xì)支氣管炎患兒的研究結(jié)果一致。

毛細(xì)支氣管炎主要由病毒感染引起，該研究中毛細(xì)支氣管炎患兒CD3+/CD4+、CD3+/CD8+比值下降，CD4+/CD8+比例失調(diào)，CD19+比值增高。此與賈莉婷等［3］研究結(jié)果一致。重癥毛細(xì)支氣管炎患兒中，小年齡組患兒CD3+/CD4+比值增高，CD3+/CD8+比值下降，CD4+/CD8+比例失調(diào)，與李建木等［4］研究哮喘患兒淋巴細(xì)胞亞群特點(diǎn)一致。而CD19+代表B淋巴細(xì)胞水平，在病原體作用下，B細(xì)胞表達(dá)水平增加，活化、分化增強(qiáng)，促進(jìn)IgE合成，而CD3+/CD4+可輔助B細(xì)胞合成、分泌IgE，引發(fā)喘息。CD16+/CD56+為NK細(xì)胞的表面標(biāo)記，可參與特異性及非特異性免疫應(yīng)答，清除病原和殺傷受感染細(xì)胞。該研究中重癥毛細(xì)支氣管炎患兒CD16+/CD56+比值不同程度的降低，可能因NK細(xì)胞比例低下而致疾病發(fā)生、發(fā)展和/或疾病免疫應(yīng)答過程中消耗過多，不利于機(jī)體清除致病原，致使感染持續(xù)及加重［5］。

毛細(xì)支氣管炎患兒，尤其是重癥毛細(xì)支氣管炎后，由于以上免疫狀態(tài)持續(xù)存在，易發(fā)生反復(fù)喘息。約有34%～50%毛細(xì)支氣管炎患兒日后會(huì)繼發(fā)氣道高反應(yīng)性疾?。?］。因此，在臨床早期對淋巴細(xì)胞亞群失衡，尤其是CD4+/CD8+比例失調(diào)及B淋巴細(xì)胞失衡的重癥毛細(xì)支氣管炎患兒免疫干預(yù)治療，可能有利于減少以后反復(fù)喘息及哮喘的發(fā)生。

綜上所述，重癥毛細(xì)支氣管炎患兒存在淋巴細(xì)胞亞群失衡，以小年齡組患兒為著，可指導(dǎo)臨床對重癥毛細(xì)支氣管炎治療中結(jié)合免疫治療，以利于縮短病程，改善預(yù)后。

［1］董賀婷，季偉，顧文婧，等.2歲以下毛細(xì)支氣管炎患兒臨床特征與淋巴細(xì)胞亞群比值關(guān)系［J］.中國實(shí)用兒科雜志，2016，31（12）：920－924.

［2］胡亞美，江載芳，申昆玲，等.諸福棠實(shí)用兒科學(xué)［M］.第8版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2015：1199－1201.

［3］賈莉婷，李靜，岳小欣，等.嬰幼兒常見下呼吸道感染型疾病與淋巴細(xì)胞亞群變化關(guān)系的研究［J］.中國當(dāng)代兒科雜志，2016，18（3）：229－232.

［4］李建木，李瓊林.支氣管哮喘患兒血清免疫球蛋白E及淋巴細(xì)胞亞群動(dòng)態(tài)變化［J］. 海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2015，21（3）：313－315.

［5］朱曉華，陳強(qiáng)，柯江維，等.支氣管肺炎患兒免疫功能變化的臨床分析［J］. 中國當(dāng)代兒科雜志，2013，15（3）：175－178.

［6］《中華兒科雜志》編輯委員會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)呼吸學(xué)組.毛細(xì)支氣管炎診斷、治療與預(yù)防專家共識(shí)（2014）［J］.中華兒科雜志，2015，53（3）：168－171.